赵巧辉
- 作品数：10 被引量：38H指数：3
- 供职机构：甘肃农业大学动物科学技术学院更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划河南省教育厅自然科学基金甘肃省“十五”科技攻关项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 牛生长激素基因工程菌的构建及其诱导表达被引量：3
- 2008年
- 为获得牛生长激素(BST)蛋白,构建了工程菌并进行了诱导表达.先设计2对引物,从pUCm-T-BST克隆中扩增出BST成熟蛋白编码序列,双酶切后分别插入表达载体(pET30 a和pET29 a),转化E.coliDH5α并进行阳性克隆鉴定;再将重组质粒分别转化到E.coliBL21(DE3)和RosettaTM(DE3)pLysS中,构建BST原核工程菌;最后进行诱导表达.结果表明,重组表达载体pET30 a-BST和pET29 a-BST中均插入了正确的目的基因;经IPTG诱导后,以BL21(DE3)为宿主的工程菌无目的蛋白表达,而pET30 a-BST/RosettaTM和pET29 a-BST/RosettaTM分别可见分子量约29.5,26.5 kD的融合蛋白表达,约占菌体蛋白的26%,35%.说明稀有密码子限制BST基因在E.coli中的表达,选择适宜的宿主菌可克服此障碍.
- 石晓卫陈其新王凤云李明赵巧辉刘孟洲
- 关键词：牛生长激素蛋白质克隆
- 不同杂交组合猪肥育性能的比较研究
- 2007年
- 本试验通过对长×大(L×Y)、杜×长大(D×LY)、皮杜×长大(PD×LY)3个杂交组合猪的生长肥育、胴体品质及肉质性状进行研究,结果表明:PD×LY杂交组合的日增重、料肉比及屠宰率最优,日增重、屠宰率与L×Y组间差异显著(P<0.05);PD×LY的眼肌面积、后腿比例分别为48.09 cm2、34.23%,为3组合中最高,与L×Y组的差异显著(P<0.05),与D×LY组的差异不显著(P>0.05);D×LY组的肉色评分、嫩度测定结果最佳,组间差异显著(P<0.05);PD×LY组的失水率、熟肉率、嫩度最差,其中熟肉率、嫩度与其它组间差异显著(P<0.05)。综合评定:导入皮特兰猪的血液在提高了日增重、屠宰率、眼肌面积、后腿比例等性状的同时,却导致了肉质的下降;D×LY作为一个经典的杂交组合,生产性能总体稳定。
- 连总强刘孟洲石晓卫赵巧辉刘燕关红民安添午王玉涛
- 关键词：杂交组合肥育性能胴体性状肉品品质
- 实验动物采血方法被引量：3
- 2006年
- 赵巧辉刘孟洲
- 关键词：实验动物采血方法血液涂片生物化学分析静脉采血白细胞计数
- 家兔BMP7基因3′UTR的克隆及序列分析被引量：5
- 2009年
- 【目的】研究家兔BMP7基因3′非翻译区(3′UTR)序列的结构及功能特点。【方法】以家兔肾脏组织为材料,应用3′RACE技术对家兔BMP7基因3′UTR序列进行扩增,并与GenBank中登陆的其他哺乳动物相应序列进行比较分析。【结果】成功克隆了家兔BMP7基因的3′UTR(GenBank号:EU004072);在3′UTR序列末端存在2个切割与胞质多聚腺苷化特异因子(CPSF)结合位点(AAUAAA)和1个11 bp的poly(A)。家兔BMP7基因3′UTR序列与小鼠、人、牛和猪的一致性分别为41.45%,50.30%,47.84%和57.91%,相对不保守。【结论】家兔BMP7基因3′UTR结构特点可能与其基因功能有关。
- 赵巧辉陈其新李明石晓卫刘孟洲
- 关键词：家兔
- 猪骨形态发生蛋白4成熟肽cDNA的克隆及序列分析被引量：3
- 2008年
- 克隆猪骨形态发生蛋白4(BMP-4)成熟肽基因。通过提取猪肾的总RNA,通过RT-PCR技术扩增出目的基因,并将其回收后与pMD18-T载体连接,转化大肠杆菌TOP10感受态细胞,进行阳性克隆的筛选与鉴定。琼脂糖凝胶电泳检测RT-PCR产物,显示结果与预期片段大小一致,质粒PCR检测、酶切鉴定证实重组克隆中插入了PCR产物,测序结果揭示BMP-4成熟肽cDNA长为351bp,编码116个氨基酸。序列对比表明,猪与人、小鼠、牛、绵羊BMP-4成熟肽cDNA序列的同源性分别为94.87%、90.60%、94.87%、94.59%,而相应的氨基酸同源性分别为99.12%,99.12%,100%、100%。首次成功地克隆了猪BMP-4成熟肽编码基因,对于进一步研究猪BMP-4全基因结构、功能及其与繁殖性能的关系有重要的意义。
- 李明孙桂荣陈其新刘孟洲石晓卫赵巧辉杨跃霞
- 关键词：骨形态发生蛋白4成熟肽基因克隆
- 实验动物采血方法被引量：13
- 2006年
- 赵巧辉刘孟洲
- 关键词：实验动物采血方法血液涂片生物化学分析静脉采血二氧化碳分压
- 黄淮山羊Leptin cDNA的克隆及鉴定被引量：3
- 2007年
- 根据GenBank中公布的山羊Leptin基因部分基因组核苷酸序列,设计合成一对引物,以山羊脂肪组织总RNA为模板,采用RT-PCR法,扩增出Leptin成熟蛋白编码cDNA序列,将此扩增产物克隆入pMD18-T载体,进行PCR、双酶切鉴定及序列测定与分析。结果表明,扩增的山羊Leptin基因编码序列长为441bp,编码146个氨基酸。同源性分析表明,山羊Leptin基因成熟蛋白编码cDNA与小鼠、人、猪、牛及绵羊基因相应序列的同源性分别为82.22%、87.76%、92.97%、96.15%和98.64%,氨基酸同源性为84.25%、86.99%、92.47%、97.95%和100.00%,说明Leptin是一组在进化上高度保守的蛋白质。山羊Leptin成熟蛋白cDNA的成功克隆,为进一步研究黄淮山羊Leptin基因全结构、基因表达与调控奠定了基础。
- 陈其新李明石晓为赵巧辉
- 关键词：LEPTIN山羊克隆
- 黄淮山羊骨形态发生蛋白4(BMP4)基因的克隆及优化表达被引量：1
- 2010年
- 根据GenBank公布的人和牛BMP4基因序列设计引物,通过RT-PCR和PCR方法分别扩增全长编码序列和内含子2、3,进行克隆及测序鉴定;根据已得到的序列设计引物扩增BMP4成熟蛋白cDNA,克隆入pET32a表达载体,转化E.coliBL21(DE3)plysS进行诱导表达,同时进行诱导条件的优化。结果显示,山羊BMP4基因全编码序列、内含子2和3序列长度分别为1 230、1 053、962 bp,与猪、人、小鼠和牛相应序列的同源性分别为:96.10%、94.96%、91.79%、99.19%,83.80%、76.03%、66.94%、96.71%和87.15%、80.24%、67.20%、98.13%。在E.coliBL21(DE3)plsS中表达的BMP4融合蛋白的相对分子量为31 000,适宜的诱导条件为:0.5 mmol/L IPTG、22℃、诱导8 h.结果表明,黄淮山羊BMP4基因全长编码序列和内含子2、3已被成功克隆。适宜表达条件的确定为进一步研究山羊BMP4的生物学功能奠定了基础。
- 李明石晓卫陈其新张弛周建设刘孟洲赵巧辉
- 关键词：黄淮山羊BMP4
- 家兔BMP7基因的克隆及其生物信息学分析被引量：7
- 2008年
- 在对已知部分编码序列(CDS)进行分析的基础上,采用RT-PCR分步扩增以及RACE方法,对家兔BMP7基因3′和5′末端未知序列进行了克隆与生物信息学分析。测序结果综合分析表明,所获序列共计1654bp,包括家兔BMP7近全长前肽、全长成熟肽CDS及3′非翻译序列(3′UTR),将已有的序列向5′和3′端分别延伸了395bp和628bp。序列对比表明,克隆的家兔BMP7 CDS部分与人、小鼠的对应序列的同源性分别为91.89%和89.32%,预测的氨基酸序列同源性分别为96.51%和96.01%。家兔BMP7 3′UTR长446bp,与人、小鼠对应序列同源性分别为57.38%和45.57%;具有2个转录终止信号位点。推测家兔BMP7成熟蛋白有BMPs特有的7个位置固定的半胱氨酸残基和TGF-β家族指纹。家兔BMP7 3′UTR区转录终止信号的可选择性可能与基因转录后调控有关。
- 李明赵巧辉陈其新刘孟洲石晓卫
- 关键词：家兔BMP7克隆生物信息学分析
- 家兔骨形态发生蛋白-7（BMP-7）cDNA的克隆与表达
- 本研究主要目的是对家兔BMP-7基因的结构特征进行分析,为研究BMP-7基因在胚胎的发生和发育以及其它生殖生理过程的作用提供参考。主要得到以下一些结论:
1/)结合数据库已有的兔BMF-7基因部分编码序列,采...
- 赵巧辉
- 关键词：家兔
- 文献传递
