陈岩峰 作品数:30 被引量:57 H指数:6 供职机构: 福建省农业科学院 更多>> 发文基金: 国家兔产业技术体系建设项目 福建省属公益类科研院所基本科研专项 福建省自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 化学工程 更多>>
兔源F型多杀性巴氏杆菌双重PCR检测方法的建立 被引量:5 2021年 【目的】建立检测兔源F型多杀性巴氏杆菌的双重PCR检测方法,为兔巴氏杆菌病的诊断提供技术支持。【方法】根据多杀性巴氏杆菌kmt1基因和F型多杀性巴氏杆菌fcbD基因的保守序列分别设计了2对引物进行双重PCR扩增,对双重PCR检测方法的退火温度和混合引物浓度进行优化,并对方法的特异性、敏感性、重复性和准确性进行验证。【结果】该双重PCR方法最优反应条件为:退火温度60℃、混合引物浓度0.8μmol·L^(−1)。该双重PCR方法能扩增出兔源F型多杀性巴氏杆菌的kmt1基因片段(260 bp)和fcbD基因片段(490 bp)、兔源A和D型多杀性巴氏杆菌的kmt1基因片段(260 bp),对兔源支气管败血波氏杆菌、肺炎克雷伯菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和阴性对照均为阴性,无交叉反应,特异性较强。该方法对兔源F型多杀性巴氏杆菌的最低检出限为1×10^(3)拷贝·μL^(−1),敏感性高。应用该方法对90份病死兔肺脏样品进行批内和批间重复性试验,结果均一致,重复性好。应用该双重PCR方法和已报道的多重PCR方法同时检测87份已知结果的呼吸道病死兔肺脏样品,结果显示双重PCR方法检测结果和已报道的多重PCR方法检测结果与已知结果的符合率分别为97.70%和94.25%,双重PCR方法检测结果与已报道的多重PCR方法检测结果的符合率为93.10%,双重PCR方法的准确性更高。【结论】针对多杀性巴氏杆菌kmt1基因和F型多杀性巴氏杆菌fcbD基因建立的双重PCR检测方法具有良好的特异性、敏感性、重复性和准确性,为兔源F型多杀性巴氏杆菌的快速检测提供了技术支撑。 王锦祥 孙世坤 陈岩峰 陈冬金 桑雷 谢喜平福建黄兔促卵泡素β亚基cDNA序列的克隆与序列分析 目前国内外已经克隆出了人、猪、牛、绵羊、马、大鼠等多种哺乳动物的FSHβ亚基基因,家兔和穴兔属中只有日本白兔的FSHβ亚基基因cDNA被报道,中国地方兔种的相关基因的cDNA未见有任何报道,本研究对福建黄兔FSHβ亚基c... 桑雷 孙世坤 陈冬金 陈岩峰 谢喜平关键词:福建黄兔 克隆 文献传递 福建省部分地区兔波氏杆菌和巴氏杆菌的流行病学调查 为了解福建省兔群中波氏杆菌和巴氏杆菌的流行情况,通过细菌分离鉴定,对2017.10~2018.11期间采集自福建省福州市、南平市和龙岩市9个兔场的243份病死兔肺脏进行支气管败血波氏杆菌(Bb)和多杀性巴氏杆菌(Pm)检... 王锦祥 桑雷 孙世坤 陈冬金 陈岩峰 谢喜平关键词:支气管败血波氏杆菌 多杀性巴氏杆菌 流行病学 福建黄兔促卵泡素β亚基cDNA序列的克隆与序列分析 从性成熟的福建黄兔母兔脑垂体中提取总RNA,经RT-PCR扩增目的片段,获得长为390bp的黄兔促卵泡素β亚基cDNA片段.将扩增的片段与pMD 18-T载体连接,转化至DH5α感受态细胞中.随机挑选阳性重组子进行鉴定、... 桑雷 孙世坤 陈冬金 陈岩峰 谢喜平关键词:福建黄兔 克隆 一株兔源D型多杀性巴氏杆菌的分离和鉴定 被引量:1 2021年 多杀性巴氏杆菌是引起兔呼吸道疾病的重要病原。2020年12月,福建省某兔场发生一起呼吸道传染病,从病死兔肺脏样品中分离到一株D型多杀性巴氏杆菌PMD2057。PMD2057经滴鼻感染试验兔,能复制出临床症状和病变特征与自然感染发病病例相同的病兔,且能从试验兔的肺脏样品中回收到该菌,证实D型多杀性巴氏杆菌PMD2057是该起呼吸道传染病的病原。药敏试验结果显示,PMD2057对氧氟沙星、环丙沙星、阿奇霉素和头孢克肟高度敏感,对氨苄西林、庆大霉素、恩诺沙星和头孢唑肟中度敏感,对链霉素和头孢曲松不敏感。 王锦祥 孙世坤 陈岩峰 陈冬金 桑雷 谢喜平关键词:多杀性巴氏杆菌 兔金黄色葡萄球菌和支气管败血波氏杆菌双重PCR检测方法的建立 被引量:6 2018年 为建立同时检测兔金黄色葡萄球菌和支气管败血波氏杆菌的双重PCR检测方法,本研究根据金黄色葡萄球菌的nuc基因和支气管败血波氏杆菌的fimN基因的保守序列设计2对特异性引物,通过优化反应条件,成功建立兔金黄色葡萄球菌和支气管败血波氏杆菌双重PCR检测方法。该方法对兔多杀性巴氏杆菌、大肠杆菌和魏氏梭菌的检测结果为阴性;能够检出5pg的金黄色葡萄球菌和支气管败血波氏杆菌的基因组DNA;与单重PCR检测方法的符合率为100%。说明本试验建立的双重PCR检测方法具有良好的特异性、敏感性和准确性,为兔金黄色葡萄球菌和支气管败血波氏杆菌的鉴别诊断提供了有效的技术手段。 王锦祥 桑雷 孙世坤 陈冬金 陈岩峰 谢喜平关键词:金黄色葡萄球菌 支气管败血波氏杆菌 双重PCR 一起兔流行性腹胀病的细菌分离和鉴定 2018年 本试验对一起兔流行性腹胀病病死兔进行细菌的分离和鉴定。结果显示:病死兔心脏、心包液、肝脏、脾脏、肾脏和淋巴结无菌;从胃内容物、小肠内容物和盲肠内容物中共分离到9株细菌,包括6株大肠杆菌、1株地衣芽孢杆菌、1株苏云金芽孢杆菌和1株蜡样芽孢杆菌。结果表明:细菌性因素可能是诱导兔流行性腹胀病发生的原因。试验结果为该病的进一步研究奠定基础。 王锦祥 桑雷雷 孙世坤 陈冬金 陈岩峰 谢喜平关键词:细菌 RRNA 一株致兔结膜炎多杀性巴氏杆菌的分离和鉴定 被引量:9 2020年 本试验从福建省某兔场传染性结膜炎患兔的眼眶分泌物中分离到一株革兰氏阴性杆菌。BLAST分析结果表明,该菌16S r RNA基因序列的同源性与多杀性巴氏杆菌的16S r RNA基因序列最高,高达99%以上,因此确定该菌为多杀性巴氏杆菌,并命名为FZ1901。致病性试验结果表明,分离菌FZ1901能复制出临床症状与自然感染病例相同的患兔,且从试验兔结膜炎病料中能回收到分离菌FZ1901。根据上述结果,确定分离菌FZ1901即多杀性巴氏杆菌为该兔场传染性结膜炎的病原。 王锦祥 孙世坤 陈冬金 桑雷 陈岩峰 谢喜平关键词:结膜炎 多杀性巴氏杆菌 一株致兔皮下脓肿金黄色葡萄球菌的分离鉴定 被引量:8 2019年 为确定福建省某兔场皮下脓肿病的病原,本试验从病死兔的皮下脓肿病料中分离到分离菌FJLYSA001。根据菌落特征、革兰氏染色特性和16S rRNA序列BLAST分析结果,确定该分离菌为金黄色葡萄球菌。药敏试验结果表明,分离菌FJLYSA001对氧氟沙星、左氧氟沙星、环丙沙星、氟苯尼考和多西环素5种药物高度敏感;对庆大霉素和卡那霉素2种药物中度敏感;对氨苄西林、链霉素和恩诺沙星3种药物不敏感。 王锦祥 孙世坤 陈岩峰 陈冬金 桑雷 谢喜平关键词:皮下脓肿 金黄色葡萄球菌 不同光源对闽西南黑母兔同期发情及激素分泌的影响 被引量:3 2019年 【目的】研究不同光源诱导闽西南黑母兔同期发情与激素之间的关系,以提高闽西南黑兔的繁殖性能。【方法】选用150日龄未经产雌性闽西南黑兔,于LED灯和节能灯下饲养1周,光照周期L∶D=16∶8h,对照组只提供自然光照。于补光前1d、光照3d后和光照7d后观察记录发情率并耳缘静脉采血。采用ELISA方法,研究不同光源对闽西南黑兔褪黑激素、促卵泡素和雌二醇分泌的影响。【结果】(1)LED灯和节能灯光组的发情率明显高于对照组,差异显著,表明LED灯和节能灯补光对闽西南黑母兔的发情率有明显影响;(2)ELISA试剂盒检测不同光源下血清中褪黑激素、促卵泡素和雌二醇素含量,LED灯和节能灯光处理使150日龄闽西南黑母兔在光照后3d和光照后7d血清中褪黑激素水平显著降低,而促卵泡素和雌二醇激素水平有增加的趋势,但差异不显著。【结论】不同光源长光照可以显著影响150日龄未经产雌性闽西南黑兔同期发情,且对血浆中的褪黑激素具有明显下降作用,但对促卵泡素和雌二醇影响较小。 孙世坤 桑雷 王锦祥 陈冬金 陈岩峰 谢喜平关键词:节能灯 同期发情 激素