韩兆雪 作品数:23 被引量:145 H指数:7 供职机构: 西北农林科技大学生命科学学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 中央高校基本科研业务费专项资金 中国科学院西部之光基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 文化科学 环境科学与工程 更多>>
西藏青稞4个B组醇溶蛋白基因的克隆和特征(英文) 被引量:2 2006年 从两份西藏青稞材料中分离克隆出4个B组醇溶蛋白基因(BH1-BH4),DNA测序结果表明:它们均包含完整的开放阅读框。推断的氨基酸序列与先前报道的大麦B组醇溶蛋白具有相同的蛋白质基本结构。系统分析表明:它们推断的氨基酸序列与栽培大麦中的B组醇溶蛋白具有较高的相关性,与野生大麦和山羊草属的醇溶谷蛋白相似性较低。并且,在4个基因BH1-BH4中,BH1与先前报道的B组醇溶蛋白基因有较低的序列相似性,因此我们对BH1基因进行了原核表达,含该基因的表达载体在大肠杆菌中表达出相对分子质量为28.15 kDa.并以包涵体形式存在的蛋白,进一步对其在青稞谷粒品质改良中的潜在价值进行了探讨。 韩兆雪 钱刚 潘志芬 邓光兵 吴芳 唐亚伟 强小林 余懋群关键词:青稞 原核表达 DREB基因双T-DNA植物表达载体的构建及验证 被引量:14 2004年 W 34基因经 pGEM T EASY载体 ,克隆到 pBDREB载体EcoRI位点 ,得到在Amp平板上生长的转化子 pBW 34-DREB质粒 ;质粒pBW 34-DREB、pSPROK、pBlueks分别经PstI/KpnI、KpnI/EcoRI、PstI/EcoRI双酶切 ,三片段连接构建成中间表达载体 pBWD Tnos;再用SmaI/EcoRV双酶切 pBWD Tnos,将回收的DREB基因的完整的表达结构元插入到经SmaI酶切的质粒载体 pCDMAR Hyg中 ,构建成双T DNA植物表达载体 pCDMAR pWDT Hyg ,大小为 13 5 9kb ,经酶切鉴定 ,证明构建的载体与预期设计的一致。将此双T载体用农杆菌介导法转化玉米胚性愈伤组织 ,期望得到无选择标记的安全的转基因植物。 韩兆雪 曹墨菊 朱祯 荣廷昭关键词:DREB基因 双T-DNA 植物表达载体 无选择标记 青稞B组醇溶蛋白基因5′上游调控区的TAIL-PCR克隆及序列分析 被引量:6 2007年 为了阐明青稞种子中B组醇溶蛋白合成的遗传调控机制,为分子改良大麦和小麦籽粒品质奠定基础,以青稞品种Z09和Z26的基因组DNA为模板,根据已克隆的青稞B组醇溶蛋白(B-hordein)基因的5’端序列设计三个基因特异的反向引物,分别与随机简并引物配对,进行热不对称嵌套PCR(Thermal asymmetric interlaeed PCR,TAIL-PCR)扩增,从两份西藏青稞材料中分离克隆出2个B-hordein基因的上游调控序列。序列测定结果表明,两个扩增片段长度分别为395和396bp,加上已知B-hordein基因中的GSP2引物序列与翻译起始密码子之间198bp的长度,则可得到约600bp的B-hordein基因5’上游调控序列。将所得序列与Genbank中的三个贮藏蛋白基因的对应区段进行序列比对,所得序列与来自野生智利大麦(H.chil-ense)的B3-hordein基因(Genbank登录号:AY998010)、普通小麦(T.aestivum)的低分子量麦谷蛋白亚基基因(Genbank登录号:X07747)和栽培大麦(H.vulgare)的B-hordein基因(Genbank登录号:X03103)具有81%~95%的序列相似性。推测其TATAbox位于-80bp,CAAT-likebox位于-140bp处。另外,在-300bp处存在一个胚乳盒(EndospermBox,EB),包含EM基序和GCN4基序。EM基序高度保守,GCN4基序有一个核苷酸位点的突变。此外,在约-560bp处存在一个胚乳盒类似结构。 韩兆雪 吴芳 赵桃 杨凡 钱刚 余懋群关键词:青稞 上游调控序列 TAIL-PCR 可去除选择标记的植物抗逆转基因研究 非生物胁迫/(如干旱、盐渍、低温等/)使植物缺水受到伤害,严重时甚至导致植物体死亡,给作物生产带来相当严重的质量和产量的下降。为提高作物对环境胁迫的抗性,利用基因工程技术培育抗逆植物新品种已成为21世纪农业发展的一个重要... 韩兆雪关键词:农杆菌介导法 双T-DNA 共转化 无选择标记 文献传递 西藏青稞LEA3蛋白新抗旱基因的克隆与序列分析 被引量:20 2007年 以强抗旱青稞冬青8号和弱抗旱青稞品比14为材料,将幼苗经干旱诱导处理12 h提取总RNA,RT-PCR同源克隆到2个有差异的LEA3蛋白抗旱基因的全编码框序列。冬青8号、品比14的LEA3蛋白基因序列全长分别为661 bp和694 bp,其中,来源于品比14的LEA3蛋白基因编码框全长639 bp,编码含213个氨基酸残基的蛋白质,该多肽含有9个重复的、由11个氨基酸残基组成的保守基元序列。而来源冬青8号的LEA3蛋白基因与之相比较除缺少33 bp核苷酸外,另有6个碱基的差异,所编码的蛋白质也相应地缺少第4个保守基元序列,由8个重复的保守基元序列组成。二者在DNA与氨基酸序列上的同源性分别为94.38%和92.02%。结果证实抗旱性不同的青稞品种之间LEA3抗旱蛋白保守基元拷贝数有差异,推测抗旱蛋白结构的差异可能对植物的抗旱性有影响。 钱刚 翟旭光 韩兆雪 潘志芬 邓光兵 余懋群关键词:基因克隆 青稞 普通小麦HMW谷蛋白亚基与蛋白质含量和沉降值的关系 被引量:5 2006年 对148个不同小麦品种高分子量麦谷蛋白亚基与蛋白质含量、沉降值之间的关系进行了研究。结果表明:G lu-1三位点控制的亚基等位变异与品质性状关系密切。A 1位点1亚基和N出现的频率基本相当,对蛋白质含量效应N>1,对沉降值1>N;B 1位点7+9亚基对出现频率最高,其次为7+8,各亚基对蛋白质含量效应为17+18>7+8>7>7+9>6+8>14+15>13+16,对沉降值的作用为7+8>13+16>17+18>7+9=7>14+15>6+8;D 1位点5+10亚基对频率高于2+12,各亚基对蛋白质含量效应以5+10>2.2+12>2+12>2+10,沉降值效应以2.2+12>5+10>2+12>2+10。具有亚基N,17+18,5+10组合类型的小麦品种可成为蛋白含量较高的品种;1,7+8,2.2+12组合类型的小麦品种可成为加工品质较好的品种。 吴芳 潘志芬 韩兆雪 刘毅 邓光兵 余懋群关键词:小麦 高分子量谷蛋白亚基 蛋白质含量 沉降值 开启生命科学的大门--新形势下生物化学绪论教学的实践与探索 被引量:12 2020年 围绕上好生物化学绪论,本文从创建师生交流互动的信息化平台,促进师生情感交流、拉近师生距离,明确教学目标,提纲挈领、统领全局,并以史为鉴、启发思维,联系实际、激发学生学习兴趣等进行介绍。上述教学探索夯实师生交流互动的根基,增强学生为祖国富强、为人类造福苦练本领的初心和使命感,培养学生的科学素养,激发学生的学习兴趣,为学生的成长注入强劲动力。 徐全乐 李科友 张新梅 陈鹏 张劲 罗鑫娟 韩兆雪关键词:生物化学 绪论 信息化教学 西藏青稞四个B组醇溶蛋白基因的克隆和特征 从两份西藏青稞材料中分离克隆出四个B组醇溶蛋白基因(BH1-BH4),它们均包含完全的开放阅读框。推断的氨基酸序列与先前报道的醇溶蛋白具有相同的蛋白质基本结构。系统分析表明它们推断的氨基酸序列与栽培大麦中的B组醇溶蛋白具... 韩兆雪 钱刚 潘志芬 邓光兵 吴芳 余懋群文献传递 中国普通小麦品种醇溶蛋白组成分析 被引量:4 2007年 利用酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳(A-PAGE)方法,鉴定分析了148份我国重要小麦品种和高代品系的醇溶蛋白组成。在ω-、γ-、β-和α-四个区中,共鉴定出48种不同的组成模式。其中ω-区29种,出现频率最高的模式是A6;γ-区9种,出现频率最高的模式是B;β-和α-区各5种,出现频率最高的模式分别是B和A。148个样品共表现出114种醇溶蛋白组成类型。在所分析的样品中,ω-区的A3、C、H、M和X几种模式是以前国内外未曾报道的。另外还发现,1 B L.RS易位系在中国小麦品种中出现的频率较高,为41.2%,这可能是中国小麦品种品质普遍较差的一个原因。这些研究结果将为小麦育种工作者有效利用小麦种质提供参考。 吴芳 潘志芬 韩兆雪 邓光兵 余懋群关键词:醇溶蛋白 APAGE 普通小麦 青稞B组醇溶蛋白基因与上游调控区的克隆及基因表达 高等植物种子胚乳贮藏蛋白是种子发芽时的主要氮源,也是人类和动物食用植物蛋白的主要来源。大麦种子胚乳贮藏蛋白主要是醇溶蛋白(hordeins),占大麦胚乳总蛋白的50-60%。根据大麦醇溶蛋白的大小和组成特点,大麦醇溶蛋白... 韩兆雪关键词:青稞 文献传递