韩慧明 作品数:14 被引量:87 H指数:5 供职机构: 北华大学基础医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 北京市自然科学基金 吉林省教育厅科学技术研究项目 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 文化科学 农业科学 更多>>
金黄色葡萄球菌SarA蛋白原核表达及免疫原性研究 被引量:1 2021年 目的构建SarA的原核表达载体,对SarA蛋白免疫原性进行初步研究.方法首先应用生物信息学方法对SarA基因进行分析;以金黄色葡萄球菌基因组为模板,通过PCR扩增、酶切、连接等一系列反应进行原核重组质粒的构建;IPTG诱导原核重组质粒表达,对SarA蛋白进行纯化、浓缩,将浓缩后的蛋白与佐剂混合免疫家兔,收集血清,通过间接ELISA法检测血清抗体效价,并通过Western blot鉴定抗体特异性.结果成功构建重组表达质粒SarA-pET32a(+),通过IPTG诱导表达,获得以可溶形式高效表达的SarA蛋白,分子质量约为32 kDa.用纯化的SarA蛋白免疫家兔,获得了SarA多克隆抗体,其效价为1∶512000.结论成功构建了SarA原核表达载体,且在大肠杆菌细胞中表达;得到了高效价和良好特异性的多克隆血清抗体,为进一步研究抗细菌生物膜疫苗奠定了基础. 程旭 杨雨晴 吴赛男 侯勤龙 李咏梅 韩慧明关键词:SARA 原核表达 免疫原性 高致病性猪链球菌双组分系统Ihk/Irr双基因缺失突变株的构建 2018年 目的构建Ⅱ型猪链球菌05ZYH33菌株双组分系统Ihk/Irr的双基因缺失突变株.方法首先对双组分系统Ihk/Irr基因进行序列分析;选取Ihk/Irr基因的相关片段克隆至p ET30a表达载体,进行可溶表达并注射家兔制备抗体;分别将ihk基因上游irr基因下游各1 kb的片段扩增,将两个片段连接起来;克隆至温敏型p JRS233的穿梭质粒中;利用两步同源重组法获得突变体;分别提取突变株的基因组DNA,RNA及菌体总蛋白,利用PCR,RT-PCR,Western-blot方法验证突变体.结果成功制备了双组分系统Ihk/Irr可溶性表达的蛋白,成功构建了重组的温敏型ikr-p JRS233重组质粒,成功将重组质粒转入猪链球菌05ZYH33中并获得突变株,基因组PCR,RTPCR及Western-blot分别证实了双组分系统Ihk/Irr双基因被成功敲除.结论成功构建重组温敏型的穿梭质粒,导入到猪链球菌05ZYH33菌株中经两步同源重组获得突变株,在基因组DNA,RNA及蛋白水平上验证了双组分系统Ihk/Irr双基因缺失株的成功构建. 郑美玉 张维瑜 李咏梅 韩慧明关键词:双组分系统 突变株 基础医学拔尖学生培养模式的改革与创新研究 2023年 重点培养拔尖学生,实现基础医学的改革与创新,以保证出更高效的、更先进的医学发展前景。在探索改革创新的过程中,以《北华大学拔尖计划2.0总体工作方案》为基础,依托基础医学学科教学工作任务,明确基础医学培养拔尖人才的初衷和根本目的,遵循学生的专业成长规律,通过改革教学模式、革新教学方式、深化国际合作等方式,并不断进行改良完善,为培养拔尖学生创造条件,最终实现医学的高质量发展。 韩慧明 李霜关键词:拔尖学生 猪链球菌2型毒力因子研究新进展 被引量:2 2018年 猪链球菌是一种传染性革兰氏阳性菌,是严重影响养猪业发展的重要人畜共患病原体,造成人类死亡率在5%~20%。其毒力因子在致病过程中发挥着重要作用。近年来对猪链球菌2型的毒力因子研究有诸多新的进展,对其致病机制的了解和对该病有效防控都有新的认识。对近些年研究2型猪链球菌毒力相关因子,对蛋白质类、酶类研究的新进展,同时对毒力因子基因表达双组分系统、与宿主免疫系统相互作用的Ⅳ型分泌系统的进展进行总结和分析,以期为猪链球菌病的治疗和疫苗的研制提供新参考。 刘静贤 何欣 韩慧明关键词:猪链球菌2型 毒力因子 致病机制 Fas基因mRNA反义靶点筛选和体外验证 2006年 应用PARASS(poly-A anchored RNA accessible sites screening)技术筛选Fas基因mRNA获得3个潜在反义作用靶点,靶点1、2、3分别位于Fas基因297nt-317m、619nt~639nt和662nt- 682nt。设计了对应靶点的反义寡核苷酸A1、A2、A3和10-23型DNAzyme D1、D2和D3。将反义寡核苷酸和Fas基因RNA结合再加入RNase H进行反应,10-23型DNAzyme则直接与Fas基因 RNA作用,结果表明:3个靶点的反义寡核苷酸组及DNAzyme均能降解Fas基因RNA,为有效靶点,其靶点反应优势次序为靶点3>靶点1>靶点2。而非靶点对照组和有效靶点突变了2个碱基的对照组均没有反应。靶点2和靶点3与ISIS公司经过多次实验筛选到的Fas反义作用靶点位置基本相同,表明PARASS技术的有效性和可靠性。获得的有效反义寡核苷酸和DNAzyme为后续研究打下基础。 左刚 韩慧明 田晓丽 王全会 毛建平关键词:FAS 肾移植患者出院前健康指导 2013年 目的:探讨肾移植术后患者出院前健康指导的内容。方法:对肾移植术后患者从如何判断排斥反应、观察药物毒副作用、如何预防感染等方面进行指导。结果:肾移植术后患者并发症出现率降低,并对生活充满信心。结论:对于肾移植术后患者进行健康指导是必要的。 韩慧明 钟秀宏关键词:肾移植 “医学微生物学”慕课与翻转课堂混合式教学与传统式教学的比较 被引量:31 2021年 在“以学生为中心”的课堂教学改革中,需关注的主要问题是学生满意度和学生的表现。北华大学基础医学院“医学微生物学”慕课(Massive Open Online Courses,MOOC)是吉林省精品视频公开课,为充分发挥MOOC的优势,更好体现“以学生为中心”的教学理念,医学微生物学教研室采用基于慕课的翻转课堂(Flipped Classroom,FC)混合式教学模式进行了课堂教学改革。教学团队详细比较了临床医学专业中采用慕课与翻转课堂混合式教学模式与传统讲授模式在“医学微生物学”课程的教学效果,并对学生进行了2种教学方式的学习满意度调查。2组的独立样本t检验结果表明,MOOC&FC混合式教学方式未影响学生考试成绩,2种教学模式下学生的表现及这2种教学方法有效性是相同的;成绩分析表明,实验组学生分析问题及解决问题的能力显著提升;调查反馈表明,学生对MOOC&FC混合式教学中的自我学习能力与团队协作意识的提高更加满意,并且更喜欢MOOC&FC课程所具有的灵活性及主动性。 李咏梅 李霜 陈曦 孙晓红 王大海 韩慧明关键词:医学微生物学 混合式教学 传统式教学 长链非编码RNA HAGLROS对非小细胞肺癌A549细胞迁移和侵袭能力的影响 被引量:1 2020年 目的探讨长链非编码RNA HAGLROS(lncRNA HAGLROS)对非小细胞肺癌A549细胞系迁移和侵袭能力的影响.方法采用siRNA(小RNA干扰技术)对细胞进行转染;同时采用实时荧光定量PCR技术(qPCR)检测相关目的基因的表达水平;应用细胞划痕实验检测细胞的迁移能力;应用Transwell实验检测细胞的侵袭能力.结果qPCR结果显示:对A459细胞进行转染后,siRNA-lncRNA HAGLROS-homo-435敲减效率最高,差异具有统计学意义(P<0.05);划痕实验和Transwell实验结果表明:实验组与对照组比较,细胞迁移能力、细胞侵袭能力均下降,差异具有统计学意义(P<0.05).结论lncRNA HAGLROS在肺癌细胞系A549中作为促癌基因发挥作用,可为肺癌的诊断及治疗提供临床参考. 杨雨晴 李洋洋 程旭 韩慧明 李咏梅 朱滕滕关键词:细胞迁移 细胞侵袭 佐剂性关节炎的佐剂剂量条件探索 被引量:28 2001年 目的建立实验室条件下佐剂性关节炎模型的最佳剂量条件.方法取佐剂卡介苗在相应条件下制成Freund's佐剂,按不同剂量给Wista大白鼠进行足跖内皮注射,观察记录24 d.结果及结论0.1 mL Freund's佐剂组在实验室条件下,关节炎模型反应较典型. 苏畅 张成义 韩慧明 李冰 刘红关键词:佐剂性关节炎 关节炎模型 PBL与CBS相结合在医学微生物学教学法的探索 被引量:8 2018年 目的利用PBL(Problem Based Study)结合CBS(Case Based Study)的教学法在医学微生物学课堂教学的探索与体会。方法选择临床医学专业2015级3个班,共109人,选取1个班做为实验班(36人),另外2个班做为对照班(73人),对照班采用常规授课方法,实验班采用常规讲授的基础上进行了以临床病例为设置系列问题的PBL教学模式改革。综合理论知识考核、临床案例问题综合分析、学生满意度问卷调查的形式进行评分。结果实验班学生基础理论知识、临床案例问题综合分析及理解应用题的得分明显优于对照班学生(P<0.05),实验班学生问卷调查各项指标满意度均高于对照班。结论 PBL与CBS相结合的教学模式改革相对传统教学方法取得了良好的教学效果,此种教学方法改革使学生学习的自主性、能动性及处理问题的能力得到极大提高,培养了学生的科研思维与创新能力,增强了团队意识。 李霜 张维瑜 魏亚璇 韩慧明关键词:PBL教学法 CBS教学法 医学微生物学