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马雪梅
作品数:
8
被引量:29
H指数:2
供职机构:
中国医学科学院北京协和医学院基础医学院基础医学研究所
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发文基金:
“九五”国家科技攻关计划
山东大学青年科学基金
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相关领域:
生物学
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合作作者
黄秉仁
中国医学科学院基础医学研究所
蔡良婉
中国医学科学院基础医学研究所
郑华军
中国医学科学院北京协和医学院基...
蔡良琬
中国医学科学院北京协和医学院基...
王欣
中国医学科学院中国协和医科大学
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作者
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马雪梅
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黄秉仁
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1篇
山东大学学报...
年份
3篇
2001
3篇
1998
2篇
1995
共
8
条 记 录,以下是 1-8
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被引量排序
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胶质细胞衍生的神经营养因子成熟肽基因的克隆、表达及纯化的研究
被引量:1
1998年
通过PCR的方法克隆了胶质细胞衍生的神经营养因子(gliacel-linederivedneu-rotrophicfactor,GDNF)成熟肽的基因,并将其连接到E.coli高效表达载体pET16b,在E.coli中获得高效表达.表达蛋白占菌体总蛋白21%以上,以包涵体形式存在,经体外复性后用金属螯合亲和层析的方法得到具有较高纯度和活性rhGDNF.
马雪梅
黄秉仁
蔡良琬
关键词:
GDNF
E.COLI
基因表达
纯化
钝齿棒杆菌YL_1基因文库的建立及异亮氨酸基因在大肠杆菌中的克隆表达
被引量:1
1995年
以pUC19质粒为载体建立了异亮氨酸产生菌钝齿棒杆菌(Corymebacteriumcrenatum)YLl的基因文库,并通过酶切重组子、斑点杂交得到证实.共筛选5800个重组子,一个特定DNA片断在库中存在的可靠性达99.99%.从中克隆重组了带有ilvA基因片断的重组质粒pYI94,转化AHV的大肠杆菌ED8654-5,使本来不产Ile的大肠杆菌可以积累Ile1.5g/L,为进一步高效表达构建工程菌创造了条件.
马雪梅
高东
蔡勉
邹文
关键词:
基因文库
异亮氨酸
棒杆菌
神经营养因子与帕金森病的治疗(综述)
被引量:1
1998年
马雪梅
黄秉仁
蔡良婉
关键词:
神经营养因子
震颤性麻痹
多巴胺能
ThioFusion表达系统──大肠杆菌中表达可溶性蛋白的重大突破
被引量:7
1995年
ThioFusion表达系统──大肠杆菌中表达可溶性蛋白的重大突破马雪梅,黄秉仁,蔡良婉(中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室,北京100005)在细菌中生产重组蛋白快速、简便,可以产生大量目的蛋白。然而,在大肠杆菌中表达异源蛋白...
马雪梅
黄秉仁
蔡良婉
关键词:
细菌
大肠杆菌
可溶性蛋白
甲基营养型酵母系统表达的重组人表皮生长因子的纯化及其性质
被引量:18
2001年
目的 获得可用于动物试验和临床试验的人表皮生长因子原料药。方法 化学合成的人表皮生长因子基因在甲基营养型酵母中表达并分泌到培养基中的人表皮生长因子蛋白经 Phenysepharose 6 Fast Flow( high sub)柱、 Q-sepharose High Performance柱、 Superdex 30柱纯化后进行生物学性质检测。结果 纯化后的蛋白产物纯度达 98%,是无热源、无内毒素、无甲基营养型酵母染色体 DNA污染的,有正确的分子量、等电点、氨基末端氨基酸顺序、肽图、紫外光谱、及生物活性性质的重组蛋白。结论 纯化蛋白符合动物试验和临床试验的要求,为制备多种人表皮生长因子制剂进行动物实验和临床试验打下了基础。
黄秉仁
蔡良婉
王欣
马雪梅
马晓骊
李旌军
李红卓
韦忠明
梁青
郑华军
唐琪浩
唐申秀
廖洪涛
向绪传
关键词:
重组人表皮生长因子
纯化
生物活性
人Neurturin结构类似物多肽、其编码序列及其制备方法
本发明涉及一种人Neurturin结构类似物多肽,其与天然人Neurturin相比,N-末端缺失了2-6个氨基酸。本发明还涉及编码所述人Neurturin结构类似物多肽的多核苷酸,在不改变所编码的氨基酸组成的前提下,该多...
马雪梅
黄秉仁
文献传递
GDNF家族及其受体
被引量:1
2001年
陈工
马雪梅
黄秉仁
关键词:
信号通路
受体
白细胞介素-6基因的克隆、表达及纯化的研究
1998年
目的进行重组人白细胞介素-6(rhIL-6)的批量生产研究。方法将克隆的人IL-6基因置于pET30a载体的T7启动子下游,在宿主大肠杆菌中进行表达。结果工程菌表达量占菌体总蛋白的50%以上,纯品纯度大于95%,rhIL-6的分子量为21 000,等电点为6.7。用依赖IL-6的小鼠杂交瘤细胞系7TD1以MTT比色法测定表达蛋白生物活性表明,rhIL-6的ED50为0.35 ng/ml。结论上述结果表明rhIL-6已基本达到中试生产的要求。
马雪梅
陈忠
郑华军
黄秉仁
蔡良琬
关键词:
白细胞介素-6
基因表达
纯化
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