刘亚杰
- 作品数：10 被引量：34H指数：3
- 供职机构：重庆医科大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市教育委员会科学技术研究项目重庆市卫生局科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 基因谱系示踪揭示小鼠Tbx18^+肾脏间质祖细胞分化为输尿管平滑肌被引量：4
- 2012年
- 本文旨在研究Tbx18+肾脏间质祖细胞分化为输尿管平滑肌细胞的命运及转录因子Tbx18在小鼠输尿管平滑肌发育形成中起到的作用.实验建立Tbx18:Cre/R26REYFP和Tbx18:Cre/R26RLacZ两种谱系示踪系统和Tbx18:Cre/Cre敲除模型.该示踪模型通过cre重组酶的表达能有效地示踪Tbx18+肾脏间质祖细胞在泌尿系统的发育命运.通过免疫荧光染色和X-gal染色,同时发现Tbx18+肾脏间质祖细胞可分化为输尿管平滑肌细胞,但不分化为输尿管移行上皮细胞.在Tbx18:Cre/Cre基因突变模型中,泌尿系统出现明显的肾积水和输尿管积水,肾盏、肾盂扩张,输尿管明显缩短和扩张.实验结果揭示,Tbx18+肾脏间质祖细胞可以分化为输尿管平滑肌细胞,且转录因子Tbx18在哺乳动物输尿管平滑肌的发育中起到重要的作用.
- 高凌志杜建霖李晓群汪浩查承沁刘亚杰佘强
- 关键词：输尿管平滑肌
- 遗传谱系示踪技术揭示小鼠胚胎前体心外膜向心外膜转化过程
- 2016年
- 心外膜的形成是胚胎心脏发育的关键生理过程之一。利用遗传谱系示踪技术示踪观察前体心外膜向心外膜细胞转化过程,具有重要的科学研究价值。本研究拟利用Tbx18＋前体/心外膜祖细胞遗传谱系示踪模型,揭示胚胎心外膜的起源及前体心外膜向心外膜转化的过程。利用整胚和切片原位杂交技术揭示,Tbx18 mRNA特异性表达于胚龄（E）9.5 d小鼠胚胎前体心外膜;故Tbx18是前体心外膜的特异性标记基因。利用整胚X-Gal染色,揭示报告基因Lacz在E9.5 d遗传谱系示踪模型鼠胚前体心外膜中大量表达,此时报告基因从前体心外膜逐渐迁移并开始少量表达于心外膜。Lacz在E10~E10.5 d双杂合鼠胚前体心外膜中表达逐渐减少,而在心外膜组织中逐渐增多;在E11.5 d,报告基因在前体心外膜中表达基本消失,而在心外膜组织中大量表达。切片进行XGal染色也揭示,报告基因Lacz定位于早期胚胎前体心外膜及心外膜。免疫荧光染色证实,早期胚胎心外膜细胞呈现未分化的祖细胞状态。通过报告基因的表达变化模式揭示,胚胎心外膜的形成经历了启动、转化、完成3个阶段;E9.5~11.5 d左右这个时间段发生的前体心外膜向心外膜转化,可能是心外膜形成的主要来源和形式。
- 杜建霖袁欣刘亚杰邓松柏佘强
- 关键词：心外膜
- ST段压低碎裂QRS波可能是NSTE-MI病死率的预警指标被引量：13
- 2014年
- 目的观察非ST段抬高心肌梗死(NSTE-MI)后48h内出现碎裂QRS波(fQRS)和ST段压低fQRS(STD-fQRS)的发生率,并探讨fQRS、STD-fQRS对NSTE-MI患者病死率的预警价值。方法纳入NSTE-ACS患者为研究对象,根据其心电图结果,将NSTE-MI患者分为fQRS组和无fQRS组,再将fQRS组分为STD-fQRS和无STD-fQRS两个亚组,长期随访观察其病死率。结果 (1)共纳入731例NSTE-ACS,其中NSTE-MI组609例,UA组122例。NSTE-MI组出现fQRS的比率明显高于UA组。(2)fQRS组近期全因病死率高于无fQRS组;亚组分析STD-fQRS组近期全因病死率高于无STD-fQRS组。长期随访表明,fQRS组全因病死率高于无fQRS组;亚组分析STD-fQRS组远期全因病死率高于无STD-fQRS组。(3)COX回归分析表明,fQRS不是NSTE-MI患者远期全因病死率独立预测性因子;NSTE-MI后48h内出现STD-fQRS是远期全因病死率独立预测性较强的因子。结论 STD-fQRS可能是NSTE-MI全因病死率独立危险预警指标。
- 袁欣杜建霖邓松柏刘亚杰高凌志佘强唐琳
- 关键词：碎裂QRS波ST段压低病死率非ST段抬高心肌梗死
- 共培养诱导心外膜祖细胞向血管平滑肌细胞的分化被引量：1
- 2019年
- 目的探讨冠脉发育过程中,血管内皮细胞是否可以影响心外膜祖细胞(epicardial progenitor cells,EpiCs)的分化从而调节冠状动脉的发育。方法饲养7～8周龄成年C57BL/6小鼠60只(雌、雄各半,体质量25～30 g)。提取出高纯度的EpiCs,实验分为对照组与共培养组,通过Transwell共培养系统探讨血管内皮细胞和EpiCs间的相互作用,采用细胞免疫荧光技术和荧光定量PCR分别检测EpiCs标志物WT1和Tbx18、平滑肌细胞标志物α-SMA和Myh11的蛋白表达与mRNA表达;胶原凝胶收缩实验检测细胞收缩能力;ELISA实验检测培养基中生长因子的表达。结果与对照组比较,共培养系统下血管内皮细胞可促进EpiCs中α-SMA[(1.73±0.85)%vs(34.20±3.38)%,P<0.01,n=3]与Myh11[(3.70±1.49)%vs(45.63±4.85)%,P<0.01,n=3]的表达并增强EpiCs的收缩能力,并且对共培养条件培养基的检测可见在此过程中碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factors,bFGFs)的升高[(87.64±8.78)vs(304.96±52.91)pg/mL,P<0.01,n=3]。结论血管内皮细胞可通过分泌bFGFs调节EpiCs向血管平滑肌细胞的分化,从而调节冠状动脉的发育。
- 李英瑞李郁景小东刘亚杰赵郑波刘斌佘强
- 关键词：细胞分化
- 高效建立成年小鼠心肌梗死模型被引量：1
- 2012年
- 目的探讨高效建立小鼠心肌梗死模型的方法。方法分别采用右侧卧位及仰卧位两种方法来建立模型,通过观察心电图变化、检测cTNT、病理检测等方法来证明模型成功,并以比较其存活率、手术时间、出血量、肺损伤率等来评价两种方法的高效性。结果结扎后心肌局部变苍白,心电图ST-T段抬高,cTNT呈阳性,心肌纤维化,右侧卧位方法建模小鼠存活率显著提高。结论右侧卧位横切口开胸结扎冠脉是一种更高效的建模方法。
- 李晓群高凌志张进杜建霖蒲荻刘亚杰翁敏杰佘强
- 关键词：心肌梗死右侧卧位纤维化
- Tbx18^+心外膜祖细胞参与成年小鼠部分心脏组织形成被引量：1
- 2016年
- 转录因子Tbx18在胚胎心脏发育过程中起重要调控作用,是心外膜祖细胞标记之一;故以Tbx18为标记的阳性祖细胞群被称为:Tbx18+心外膜祖细胞(epicardial progenitor cells,EPCs)。小鼠胚胎、新生和成年期心脏组织细胞的特性区别较大,成年小鼠的心脏属于终末分化组织。但是,Tbx18+EPCs对成年小鼠心脏组织的贡献大小尚存争议。本研究拟定量分析Tbx18+EPCs对成年小鼠心脏组织的贡献大小。采用整体和组织切片X-gal染色检测成年心脏组织Lac Z的表达;荧光激活细胞分选法(fluorescence activated cell sorting,FACS)分离成年Tbx18Cre/R26EYFP小鼠心脏组织EYFP+细胞。结果显示,在Tbx18+EPCs遗传谱系示踪小鼠,报告基因Lac Z和EYFP在成年小鼠心脏的心室、心房、冠状动脉、室间隔等处表达;成年Tbx18Cre/R26EYFP小鼠心脏组织细胞用FACS分离,分选的EYFP+细胞比例平均约为33.94%。由此可见,成年小鼠心脏的心室、心房、冠状动脉、室间隔等心脏组织均可来源于Tbx18+EPCs;约1/3成年小鼠心脏组织细胞来源于Tbx18+EPCs。故Tbx18+EPCs参与成年小鼠心脏组织的部分形成。
- 杜建霖邓松柏刘亚杰佘强
- 关键词：成年
- Tbx18-Cre基因敲入小鼠的繁殖、鉴定及其应用被引量：1
- 2012年
- 为了探讨Tbx18-Cre基因敲入小鼠(Tbx18:Cre knock-in Mus musculus)的繁殖、鉴定及Tbx18基因敲除小鼠和遗传示踪小鼠模型的应用,将Tbx18-Cre基因敲入杂合子小鼠进行繁殖,应用PCR法鉴定其子代基因型。将子代雌雄杂合子小鼠互交,应用H.E染色观察Tbx18基因敲除胚鼠心的形态学变化。将杂合子小鼠与RosaEYFP报告小鼠交配,应用心冰冻切片技术观察Tbx18:Cre/Rosa26REYFP双转基因遗传示踪胚鼠心内Tbx18阳性心外膜祖细胞发育命运。结果表明,用于繁殖、基因敲除研究及基因遗传示踪的子代基因型均符合孟德尔遗传规律。同时心H.E染色和心冰冻切片发现,Tbx18敲除小鼠心窦房结发育存在缺陷,而Tbx18阳性心外膜祖细胞是心发育重要的祖细胞来源。研究结果揭示,Tbx18-Cre基因敲除小鼠是研究先天性心脏病发病机制的理想模式动物,Tbx18阳性心外膜祖细胞可能是心脏病患者心脏修复和再生潜在的种子细胞。
- 张进刘亚杰翁敏杰佘强
- 关键词：基因敲入
- PCSK9抑制剂对极高危动脉粥样硬化性心血管疾病患者血脂谱的影响被引量：14
- 2020年
- 目的:探讨前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶/kexin9型(PCSK9)抑制剂对极高危动脉粥样硬化性心血管疾病(ASCVD)患者的降脂效果及其安全性。方法:选择2019年4月至10月重庆医科大学附属第二医院门诊及住院的极高危ASCVD患者。应用随机数字表法将入选患者分为两组。阿托伐他汀组仅每晚单独给予阿托伐他汀20 mg口服,疗程为4周;联合用药组在口服阿托伐他汀的基础上皮下注射PCSK9抑制剂依洛尤单抗注射液140 mg,2周1次,疗程为4周。分别于治疗前及治疗4周后检测患者血脂谱水平,包括三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和脂蛋白-a(Lp-a);并记录患者不良反应发生情况。结果:研究期间共纳入40例患者,阿托伐他汀组和联合用药组各20例。两组治疗前血脂谱水平差异无统计学意义;经过4周治疗后,两组TC和LDL-C水平以及联合用药组Lp-a水平均较治疗前明显降低,而两组TG和HDL-C水平与治疗前差异无统计学意义。进一步分析显示,联合用药组TC、LDL-C和Lp-a治疗前后的差值均较阿托伐他汀组明显增加〔TC差值(mmol/L):2.78±1.98比0.54±0.83,LDL-C差值(mmol/L):1.91±1.38比0.39±0.72,Lp-a差值(mg/L):115.87±138.93比-84.19±251.85,均P<0.05〕。联合用药组仅有1例患者发生过敏反应,主要表现为皮疹,经抗过敏治疗后好转;两组均无肝功能异常、肌酶增高等其他不良反应发生。结论:PCSK9抑制剂可快速有效降低极高危ASCVD患者TC、LDL-C及Lp-a水平,但对TG、HDL-C水平影响不大,并具有一定安全性。
- 王晶邓松柏刘亚杰佘强杜建霖
- 关键词：血脂
- 一管酒精法提取转基因小鼠胚胎组织基因组的实验方法及应用被引量：2
- 2012年
- 目的:优化提取基因组的方法,建立高效、简便、快速提取基因组DNA的方法,用于大批量转基因小鼠鉴定。方法:用一管酒精基因组DNA抽提法抽提基因组DNA。结果:经过分光光度法检测基因组DNA浓度、纯度及电泳分析DNA质量,显示一管酒精抽提法提取的基因组与经典酚/氯仿提取法提取的基因组产量、纯度及质量没有明显差别;酶切全基因组后,2种方法获得的基因组都可以被酶完全切开;两者模板都能成功应用PCR扩增来鉴定基因敲入小鼠并可应用于基因组测序及Real-time PCR检测基因敲入小鼠中外源基因并鉴定其相对拷贝数。结论:一管酒精基因组抽提法得到的DNA质量可靠,可高效、简便、快速鉴定转基因小鼠及进行基因组DNA酶切、测序、Real-time PCR等后续实验。
- 翁敏杰杜建霖蒲荻张进李晓群刘亚杰佘强
- 关键词：基因敲入基因组DNA
- 心外膜细胞在心脏发育及再生的研究进展
- 2012年
- 心外膜是由前体心外膜细胞逐渐分化形成并覆盖于心脏表面的间皮组织。研究表明,哺乳动物心外膜细胞具有多向分化的潜能,因而心外膜细胞现已成为心肌再生领域的研究热点。现就心外膜细胞功能、标志基因及其在心脏再生领域研究进展做一综述,并展望其研究前景。
- 刘亚杰佘强
- 关键词：心脏发育
