刘清 作品数:55 被引量:115 H指数:5 供职机构: 新疆医科大学第一附属医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 新疆维吾尔自治区重大科技专项 新疆维吾尔自治区自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
皮肤恶性黑色素瘤预后影响因素分析 目的:通过收集新疆医科大学第三临床医学院治疗的153例皮肤恶性黑色素瘤患者的临床诊治资料及随访情况,分析预后影响因素对患者生存期的影响并对患者预后进行综合分析,为临床治疗及预后预测提供依据。方法:回顾性分析2009年1月... 刘清关键词:黑色素瘤 预后因素 文献传递 食管癌微环境中PKM2参与细胞恶性表型的调控机制研究 目的:探讨M2型丙酮酸激酶(Pyruvate Kinase M2,PKM2)与食管鳞状细胞癌(Esophageal Squamous Cell Carcinoma,ESCC)临床恶性表型的相关性;验证微环境中PKM2对食... 刘清关键词:食管癌 M2型丙酮酸激酶 恶性表型 临床病理参数 哈萨克族食管癌中人乳头状瘤病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用 2012年 目的建立检测哈萨克族食管癌石蜡样本中HPV16/18(human papillomavirus 16/18,HPV16/18)病毒载量的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR(real time fluorescent quantitative PCR,qRT-PCR)方法,并探讨病毒载量与食管癌病理分级的相关性。方法分别构建HPV16/18和内参基因β-actin的重组质粒,制备质粒标准品;确定最佳实验条件,建立高灵敏度的qRT-PCR方法,并对103例经病理学确诊的哈萨克族食管癌石蜡包埋组织提取DNA后,进行HPV16/18载量的检测,分析其载量与哈萨克族食管癌病理分级的相关性。结果建立了HPV16/18和β-actin标准曲线,HPV16/18和β-actin标准品Ct值与其相应梯度稀释标准品浓度呈良好线性关系r,2>0.990,扩增效率分别为85.3%~105.0%,经溶解曲线分析产物特异。103例哈萨克族食管癌样中HPV16的检出率为18.3%,并有3例合并混合HPV18感染;其中HPV16的病毒载量在哈萨克族食管癌转移组中是未转移组中的1.35倍。结论成功建立了灵敏度较高的检测HPV16/18病毒载量的实时荧光定量PCR方法。HPV16/18感染是哈萨克族食管癌发生发展的因素之一,但其病毒载量与恶性程度相关性不显著。 刘涛 郭景霞 郑树涛 梁萌 李秀凌 刘清 朱慧 马正海关键词:哈萨克族食管癌 HPV16/18 病毒载量 CALM1在食管鳞癌细胞及组织水平中的表达 被引量:5 2020年 目的研究钙调蛋白1(camodulin1,CALM1)在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)组织中的表达及临床意义,观察CALM1对食管鳞状细胞癌KYSE150细胞迁移、侵袭能力的影响。方法运用免疫组织化学(SP)法检测食管鳞癌患者组织中CALM1的阳性表达情况。运用实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测CALM1在3种食管鳞癌细胞系中的本底表达量。运用CRISPR-cas9技术敲除KYSE150细胞系的CALM1基因,构建CALM1 sgRNA表达载体,实验分两组:NC组(阴性对照病毒感染的细胞组)、KO组(CALM1基因sgRNA慢病毒感染的细胞组)。运用细胞划痕实验及细胞侵袭实验检测CALM1对KYSE150迁移、侵袭能力的影响。结果食管鳞状细胞癌组织CALM1阳性表达率显著高于癌旁正常组织(P<0.01),且其表达与T分期和病理分级有关(P<0.05);但与患者性别、年龄、肿瘤大小、病理分型以及淋巴结转移差异无统计学意义(P>0.05)。CALM1在KYSE150食管癌细胞系中本底表达量最高,在Eca109、TE-1中表达量相同。与对照组相比,CALM1敲除的实验组中食管鳞状细胞癌细胞的迁移、侵袭能力明显受抑制(P<0.05)。结论CALM1阳性表达情况与食管鳞状细胞癌T分期和病理分级有关,CALM1在食管鳞状细胞癌中对肿瘤细胞的侵袭、迁移能力有促进作用。 韩秀娟 刘清 郑树涛 刘涛 张潇 申铜雪 杨丽菲 张琪琪 卢晓梅关键词:食管鳞状细胞癌 lncRNA H19在食管鳞癌细胞KYSE30中的作用与功能 被引量:6 2017年 目的研究长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)H19在食管鳞癌细胞中的作用与功能。方法运用实时荧光定量PCR(Real time quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测5种食管鳞癌细胞系中lncRNA H19本底表达,用RNA干扰技术转染H19小干扰RNA(Small interfering RNA,siRNA)至食管鳞癌细胞KYSE30;实验分3组:空白对照组(空白载体组)、阴性对照组(随机序列组)和实验组(H19干扰组)。用噻唑蓝比色法(MTT)、流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)、细胞划痕、Transwell侵袭实验检测lncRNA H19对食管鳞癌细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭能力的影响。结果 5种食管鳞癌细胞系中,KYSE30细胞lncRNA H19表达量最高,其次分别是Eca109、KYSE150、EC9706和KYSE450细胞。实验组敲低KYSE30细胞中lncRNA H19的表达(P<0.05),细胞增殖受到抑制(P<0.05),细胞凋亡增加(P<0.05),细胞迁移距离明显减小(P<0.05),细胞侵袭能力明显减弱(P<0.05),与空白对照组和阴性对照组相比,差异有统计学意义。结论 lncRNA H19的表达能够促进食管鳞癌细胞的增殖、迁移和侵袭,并抑制细胞凋亡,食管癌中lncRNA H19发挥促进细胞恶性增殖及浸润、转移的癌基因作用,实验结果为今后可能用于临床诊断及治疗奠定了基础。 陈玉梅 刘清 郑树涛 刘涛 周剑 马蓉 谭豆豆 卢晓梅关键词:H19 食管鳞状细胞癌 细胞功能 M2型巨噬细胞对食管癌细胞浸润和转移的促进作用 被引量:3 2017年 目的探讨M2型巨噬细胞在食管癌细胞增殖、迁移、侵袭和上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)中的作用。方法将人急性白血病单核细胞(THP-1)诱导分化为M2型巨噬细胞,然后将其与食管鳞癌Eca109和KYSE-150细胞系共培养,通过细胞增殖(MTT)、细胞划痕及细胞侵袭实验分别评价共培养细胞(共培养组)与非共培养细胞(非共培养组)增殖、迁移和侵袭能力的变化,并运用Western-blot检测EMT相关指标E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)和锌指转录因子(Slug)的表达变化。结果与非共培养组相比,共培养组食管鳞癌细胞迁移和侵袭能力明显增强(P<0.05),但其增殖能力差异无统计学意义(P>0.05)。Western-blot检测显示,上皮标志物E-cadherin表达减少,间质标志物Vimentin和Slug表达增加。结论 M2型巨噬细胞促进食管鳞癌细胞的迁移、浸润及上皮间质转化,但对其增殖无明显影响。 周剑 贺家勇 郑树涛 刘涛 刘清 孙燕云 马蓉 谭豆豆 陈玉梅 卢晓梅关键词:肿瘤相关巨噬细胞 肿瘤浸润转移 分泌细胞因子 基质细胞 PKM2在TGF-β1诱导的食管癌细胞侵袭、迁移中的作用 被引量:2 2019年 目的探讨丙酮酸激酶M2亚型(PKM2)在转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞侵袭、迁移中的作用机制。方法在细胞培养基中加入TGF-β1刺激ESCC细胞,以加入PBS的ESCC细胞作为Control组,检测其侵袭、迁移能力及PKM2蛋白表达水平变化;在过表达PKM2的ESCC细胞中加入TGF-β1抑制剂,以加入PBS及TGF-β1抑制剂的ESCC细胞作为Control组,检测ESCC细胞侵袭、迁移能力变化。结果 TGF-β1刺激ESCC细胞后,其侵袭、迁移能力增强,PKM2蛋白水平表达增高,与Control组细胞比较差异有统计学意义(P<0.05);过表达PKM2减弱了TGF-β1抑制剂对ESCC细胞侵袭、迁移能力的抑制作用,与Control组细胞比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PKM2促进TGF-β1诱导的食管癌细胞侵袭、迁移。 马蓉 马蓉 刘清 郑树涛 郑树涛 刘涛 韩秀娟 卢晓梅关键词:转化生长因子Β1 食管鳞状细胞癌 HSP27在食管鳞状细胞癌KYSE150细胞中的功能 2019年 目的研究热休克蛋白27(HSP27)对食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞迁移、侵袭、增殖的作用。方法用Western blot技术检测5种食管癌细胞系(KYSE30、KYSE150、KYSE510、TE-1、Eca9706)中HSP27的本底表达情况。用慢病毒转染HSP27的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)至KYSE150细胞系,实验共分5组:Empty vector组(未转染的KYSE150细胞),Negative control组(转染随机序列),3组实验组(分别转染shRNA-HSP27-1、shRNA-HSP27-2、shRNA-HSP27-3)。用噻唑蓝比色法(MTT)、Transwell侵袭实验以及细胞划痕实验检测HSP27不同表达水平对食管鳞状细胞癌细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响。结果 5种食管癌细胞系中HSP27本底表达量由高到低分别是:KYSE150、KYSE510、KYSE30、Eca9706、TE-1。与Empty vector组和Negative control组相比,HSP27敲低的实验组中食管鳞状细胞癌细胞的增殖、侵袭、迁移能力明显受抑制(P<0.05),差异有统计学意义。结论 HSP27在食管鳞状细胞癌中对肿瘤细胞的增殖、侵袭、迁移能力有促进作用,研究结果为食管癌的临床分子靶向治疗提供了新的研究方向。 张潇 刘涛 郑树涛 刘清 申铜雪 马蓉 韩秀娟 卢晓梅关键词:HSP27 食管鳞状细胞癌 CXCL6在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其对食管癌细胞生物学特性的影响 被引量:1 2019年 目的研究趋化因子(C-X-C motif chemokine ligand 6,CXCL6)在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其表达的临床病理学相关性,并观察CXCL6对食管鳞状细胞癌Eca109细胞迁移和侵袭的影响。方法运用免疫组织化学SP法检测食管鳞癌组织(含105例食管鳞状细胞癌组织,75例癌旁正常组织)中CXCL6的阳性表达率,并分析CXCL6阳性表达与临床病理参数之间的相关性。运用细胞划痕实验和Transwell实验检测CXCL6对Eca109迁移和侵袭能力的影响。以食管鳞癌细胞Eca109作为未处理组,用CXCL6重组蛋白(50 ng/mL)刺激Eca109细胞,培养48 h作为CXCL6处理组,以加入PBS代替CXCL6重组蛋白作为阴性对照组。观察CXCL6重组蛋白处理后Eca109细胞的迁移和侵袭能力变化。结果食管鳞状细胞癌组织中阳性表达率(71.43%)明显高于癌旁正常组织(33.33%),差异具有统计学意义(P<0.05);高分化的食管鳞状细胞癌患者CXCL6的阳性表达率(26.32%)明显低于低分化者(73.13%),差异有统计学意义(P<0.05)。CXCL6阳性表达与食管癌患者的性别、年龄、肿瘤大小、病理形态、浸润深度、临床分期、淋巴结转移均无统计学意义(P>0.05)。生存分析结果显示:CXCL6阳性表达与患者总预后无统计学意义(P>0.05)。在体外,CXCL6重组蛋白处理后,食管癌细胞Eca109迁移和侵袭能力明显增强,与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 CXCL6在食管鳞状细胞癌组织中高表达,其阳性表达与分化程度有关,而且CXCL6可以促食管鳞状细胞癌细胞的迁移和浸润。 申铜雪 郑树涛 刘清 刘涛 张潇 马蓉 韩秀娟 卢晓梅关键词:食管鳞状细胞癌 迁移 食管鳞状细胞癌组织中HSP27蛋白表达与患者临床病理参数相关性研究 被引量:5 2019年 目的探讨HSP27蛋白在食管鳞状细胞癌组织中的表达及临床意义。方法应用Envision免疫组织化学染色方法检测食管鳞状细胞癌及癌旁组织中HSP27表达情况。结果 HSP27阳性表达主要定位于细胞质,其在食管鳞状细胞癌组织中的表达水平明显高于癌旁组织(P<0.05)。HSP27阳性表达与T分期和病理分级有关(P<0.05);但与患者性别、年龄、肿瘤大小、病理分型以及淋巴结转移无关(P>0.05)。结论 HSP27阳性表达情况与食管鳞状细胞癌T分期和病理分级有关,提示HSP27可能作为判断食管癌预后以及治疗的新指标。 彭辉 张潇 刘涛 郑树涛 刘清 申铜雪 马蓉 卢晓梅关键词:病理参数