刘茂林
- 作品数：33 被引量：121H指数：7
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- 相关领域：医药卫生生物学文化科学哲学宗教更多>>
- 氟诱导大鼠肾脏细胞凋亡与Caspase蛋白表达关系的研究被引量：7
- 2014年
- 目的探究死亡受体途径、线粒体途径与氟诱导肾脏细胞凋亡的关系。方法48只SD大鼠随机分为4组:对照组、低氟组、中氟组和高氟组,每组12只,分别饮用含氟化钠浓度为0、50、100和200 mg/L的去离子水,染毒120天,观察氟斑牙形成情况,称体重,测尿氟含量。制备肾脏细胞悬液,流式细胞术(FCM)检测肾脏细胞凋亡。免疫组化检测肾脏组织中Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9及细胞色素C(Cyt C)蛋白表达。结果与对照组比较,低氟组、中氟组、高氟组肾脏细胞凋亡率显著增高(P<0.05)。与对照组比较,中氟组、高氟组Caspase-8、Cyt C、Caspase-9、Caspase-3阳性表达的平均光密度值明显增高(P<0.05)。结论死亡受体途径、线粒体途径可能同时参与了氟诱导大鼠肾脏细胞凋亡的过程。
- 高继萍宋国华刘茂林王裕杨霞
- 关键词：氟中毒肾脏细胞CASPASES
- 氟对大鼠肾脏组织中caspase-3和caspase-9蛋白表达影响被引量：5
- 2014年
- 目的探讨氟对大鼠肾脏组织细胞凋亡过程中caspase-3和caspase-9蛋白表达的影响。方法 48只SD大鼠分为对照组和低、中、高染氟组(氟化钠50、100、200 mg/L),每组12只,120 d后测尿氟含量,处死大鼠,称体重及肾脏脏器重量,计算肾脏脏器系数,肾病理切片观察及caspase-3和caspase-9免疫组化测定。结果与对照组比较,高氟组大鼠体重降低(P<0.01),中氟组肾脏脏器系数降低(P<0.05),各染氟组大鼠尿氟含量均升高(P<0.01),且尿氟含量与染氟浓度呈剂量-效应关系(r=0.925,P<0.01);染氟组肾小球体型变大,肾小管排列结构紊乱、疏松,肾小球内皮细胞和肾小管上皮细胞发生变形、坏死、空泡、萎缩;与对照组比较,中、高剂量染氟组大鼠肾脏caspase-3、caspase-9蛋白表达量[(0.37±0.05)、(0.40±0.02)和(0.41±0.07)、(0.46±0.06)]均明显增高(P<0.01)。结论氟中毒诱导大鼠肾脏组织中caspase-3和caspase-9蛋白表达增强,促进肾脏细胞凋亡。
- 高继萍宋国华王裕刘茂林郭民杨霞
- 关键词：氟化钠CASPASE-3CASPASE-9肾脏
- 中国地鼠线粒体基因组与微卫星遗传标记的研究被引量：2
- 2017年
- 中国地鼠在生物医学研究中占有重要的地位,但中国地鼠的分子遗传标记研究尚少。本研究运用生物信息学和比较基因组学等方法分析了中国地鼠的线粒体基因组的碱基组成、基因组结构、基因进化等特征,为中国地鼠应用于人类疾病动物模型提供基因组数据。建立了中国地鼠近交系遗传质量控制体系,为中国地鼠种质资源科学评估、合理开发利用奠定了基础。
- 宋国华陈朝阳刘田福庞文彪高继萍张锐虎刘茂林樊林花
- 关键词：中国地鼠线粒体基因组分子进化微卫星
- 糖代谢异常对大鼠肝脏组织中巨噬细胞移动抑制因子及C-Jun氨基端激酶表达水平的影响被引量：2
- 2015年
- 目的观察巨噬细胞移动抑制因子(MIF)和C-Jun氨基端激酶(JNK)在糖代谢异常大鼠肝脏组织中表达水平的变化,探讨糖代谢异常合并非酒精性脂肪肝(NAFLD)的病理机制。方法将60只大鼠随机分为糖耐量受损(IGT)模型组(n=20)、2型糖尿病(T2DM)模型组(n=20)、IGT对照组(n=10)及T2DM对照组(n=10),高脂饲料喂养复制IGT大鼠模型,高脂饲料喂养加腹腔注射小剂量链脲佐菌素(STZ)制备T2DM大鼠模型,采用TUNEL法检测各组大鼠肝脏细胞凋亡;实时荧光PCR技术检测肝脏组织中MIF mRNA的表达;Western blot方法检测肝脏组织中MIF、caspase-3、JNK蛋白表达及磷酸化JNK(p-JNK)的表达。结果 IGT大鼠及T2DM大鼠肝组织凋亡细胞明显增多;IGT组和T2DM组肝组织MIF基因表达较各自对照组明升高(P<0.01),MIF、caspase-3、JNK蛋白表达及JNK磷酸化水平也明显升高(P<0.05或P<0.01);与IGT组相比,T2DM组caspase-3、MIF、JNK蛋白表达水平明显降低(P<0.01),而JNK磷酸化水平是明显升高(P<0.01)。结论糖代谢异常合并非酒精性脂肪肝的发生可能与MIF、caspase-3、JNK表达水平的升高及JNK磷酸化水平的增强有关。
- 樊林花刘建新李丹卫兵艳刘茂林王春芳刘田福
- 关键词：巨噬细胞移动抑制因子C-JUN氨基端激酶CASPASE-3糖耐量受损
- 不同浓度氟对大鼠血清氧化应激效应的影响被引量：1
- 2013年
- 目的研究不同浓度氟对大鼠血清氧化应激效应的影响。方法采用饮水中加入不同剂量的氟化钠饲喂大鼠复制氟中毒大鼠模型,饲喂90 d和120 d后,各组随机处死5只大鼠,检查氟斑牙发生情况,采用比色法检测血清中总抗氧化能力(T-AOC)、黄嘌呤氧化酶法测定血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性,硫代巴比妥酸法测定血清中丙二醛(MDA)含量。结果 90 d和120 d时,各染氟组大鼠出现不同程度的氟斑牙,且随染氟剂量的增大和染氟时间的延长而加重。低氟组两时间点大鼠血清中T-AOC[(9.37±5.82)U/ml,(11.31±2.90)U/ml]均低于相应的对照组[(22.76±7.99)U/ml,(21.37±6.43)U/ml],差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。各组之间SOD活性差异均无统计学意义。90 d时,中氟组和高氟组MDA含量[(8.08±2.72)nmol/ml,(9.67±1.70)nmol/ml]均明显高于对照组[(4.26±0.53)nmol/ml],差异均有统计学意义(P<0.01);120 d时,各染氟组MDA含量[(7.49±0.47)nmol/ml,(10.48±1.97)nmol/ml,(12.50±2.59)nmol/ml]均明显高于对照组[(4.70±0.63)nmol/ml],差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论慢性氟中毒可导致大鼠血清氧化系统和抗氧化系统失衡,氧化应激在氟中毒中可能发挥重要作用。
- 樊林花刘茂林卫兵艳宋国华
- 关键词：氟中毒氧化应激
- 五味子乙素对染矽尘大鼠肺组织一氧化氮水平和诱导型一氧化氮合酶mRNA表达动态变化的影响被引量：9
- 2011年
- 目的观察五味子乙素(Sch-B)对染矽尘大鼠肺组织一氧化氮(NO)水平和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA动态变化的影响。方法将96只大鼠随机分为对照组、染矽尘组、Sch-B组,每组32只,气管暴露法建立大鼠矽肺模型,造模后d 1开始灌胃给予Sch-B治疗,药物治疗3 d、7 d、14 d和28 d后,HE染色检测肺组织病理改变;硝酸还原酶法测肺组织NO含量;RT-PCR检测肺组织iNOS mRNA的表达。结果 HE染色显示Sch-B组大鼠肺损伤较染矽尘组明显减轻。NO含量和iNOS mRNA表达在染尘后各个时间点均较相应的对照组明显升高(P<0.01),其中NO含量在d 7时达到高峰后开始下降,iNOS mRNA的峰值出现在d 14。五味子组与染矽尘组相比,各时间点NO含量均明显降低(P<0.05或P<0.01),而iNOS mRNA表达仅在d 3和d 7时降低明显(P<0.05)。结论染矽尘大鼠肺组织存在着NO含量和iNOS mRNA的动态变化。Sch-B能减轻染矽尘大鼠肺组织的纤维化程度,其机制可能与染尘初期Sch-B降低iNOS mRNA转录水平,抑制NO炎症介质的合成与释放有关。
- 樊林花刘田福郭民刘茂林
- 关键词：五味子乙素肺纤维化一氧化氮诱导型一氧化氮合酶
- 氟化钠对大鼠睾丸生精细胞Caspase-3和Caspase-9蛋白表达的影响被引量：1
- 2013年
- 目的研究氟化钠对大鼠睾丸生精细胞Caspase-3和Caspase-9表达的影响,探讨其在生精细胞凋亡调控中的作用。方法雄性Wistar大鼠,随机分为4组,对照组、低氟组、中氟组和高氟组,对照组饮去离子水,低氟组、中氟组和高氟组饮用分别含50、100和200 mg/L氟化钠去离子水。染毒120 d后处死动物。采用免疫组化法(SP法),观察不同剂量染毒后睾丸生精细胞中Caspase-3和Caspase-9的表达情况。结果所有染氟组均观察到生精细胞凋亡和Caspase-3及Caspase-9表达的变化,50、100和200 mg/L染毒120 d后,大鼠睾丸生精细胞中Caspase-3和Caspase-9的表达水平不同程度的上升,尤其以200 mg/L组最为明显。结论本试验条件下,氟化钠可能通过影响大鼠睾丸生精细胞中Caspase-3和Caspase-9的释放,调控生精细胞凋亡。
- 宋国华高继萍刘茂林郭民王裕
- 关键词：氟化钠生精细胞凋亡CASPASE-3CASPASE-9
- Gli2调控Hedgehog通路活化对Tca8113细胞增殖、转移和上皮间充质转化的影响
- 2024年
- 目的 本研究通过在细胞水平检测Gli2对口腔癌细胞Tca8113增殖、生长、迁移和侵袭的影响,明确Gli2调控口腔癌细胞迁移和侵袭的分子机制。方法 本研究利用siRNA抑制Tca8113细胞中Gli2的表达,通过CCK-8、平板克隆以及transwell小室实验分别检测Gli2对Tca8113细胞增殖、生长、迁移与侵袭的影响。进一步利用qRT-PCR与Western blot实验探究Gli2调控Tca8113细胞恶性增殖和转移机制。结果 口腔癌细胞Tca8113中Gli2的mRNA和蛋白表达升高。干扰Gli2表达可抑制Tca8113细胞增殖、生长、迁移及侵袭。进一步研究发现干扰Gli2表达可抑制Hedgehog(Hh)通路关键因子的mRNA与蛋白表达。此外,干扰Gli2表达可显著影响上皮间充质转化(epithelial mesenchymal transformation, EMT)通路关键因子的mRNA与蛋白表达。结论 口腔癌病变过程中Gli2被异常激活,干扰Gli2表达显著抑制口腔癌细胞的增殖、生长、迁移和侵袭。Gli2通过调控Hh通路与EMT通路,进而影响口腔癌细胞的迁移和侵袭。本研究为阐明口腔癌的发病机制提供新思路,并为口腔癌的临床治疗提供新视角。
- 刘茂林王晓堂宋晓娜马云辉常潇琪宋国华
- 关键词：TCA8113细胞口腔癌GLI2细胞侵袭HEDGEHOG通路上皮间充质转化
- C57小鼠LATl真核表达载体的构建及其对Neuro-2a细胞的影响
- 2014年
- 目的构建C57小鼠L型氨基酸转运载体1(LAT1)的真核表达载体,转染Neuro-2a肿瘤细胞进行表达,探讨LAT1对Neuro-2a细胞增殖及凋亡的影响。方法采用RT-PCR扩增出LAT1全长目的基因,定向克隆pcDNA3.1表达载体,构建pcDNA3.1-LAT1重组表达质粒,通过脂质体法将阳性克隆转染Neuro-2a细胞,经G418筛选获得稳定表达株后,用RT-PCR和western blot蛋白印迹法检测LAT1的表达情况。通过MTT法检测各组Neuro-2a细胞的增殖情况,并借助流式细胞仪检测LAT1对Neuro-2a细胞增殖和凋亡的影响。结果成功构建小鼠pcDNA3.1-LAT1真核表达载体,酶切和测序证实其序列正确,并成功转染Neuro-2a细胞建立稳定转染细胞系。MTT法显示转染重组质粒pcDNA3.1-LAT1的Neuro-2a细胞增殖速度显著高于对照组(P<0.05),且流式细胞术检测转染组对Neuro-2a细胞具有促进增殖抑制凋亡的作用。结论转染pcDNA3.1-LAT1质粒的Neuro-2a细胞能成功表达LAT1蛋白,且LAT1对Neuro-2a细胞的增殖和凋亡均有显著影响,为进一步研究LAT1的生物学作用奠定了重要基础。
- 卫兵艳刘田福樊林花刘茂林
- 关键词：真核表达载体增殖凋亡
- 相对定量2^(-△△CT)法分析Caspase-3和Caspase-9在氟诱导大鼠肾脏中的表达被引量：8
- 2014年
- 目的检测caspase-3和caspase-9基因在氟诱导大鼠肾脏组织中的表达。方法 48只雄性SD大鼠分为4组(对照组、低氟组、中氟组和高氟组),每组12只,分别加入不同浓度的氟化钠染毒(0、50、100和200 mg/L)。120 d后,处死大鼠,提取各组大鼠肾组织总RNA,实时荧光定量PCR法检测各染氟组caspase-3、caspase-9基因的表达,选择β-actin作为内参基因,使用相对定量2-△△CT法分析。结果对照组和3个染氟组(低、中和高氟组)caspase-3基因表达量分别是1.01±0.01、1.41±0.68、2.31±0.95和2.69±0.49,其中中氟组和高氟组表达显著增高(P<0.05)。caspase-9的基因表达量分别是1.01±0.01、1.30±0.26、2.63±0.56和3.97±0.60,中氟组和高氟组表达显著增高(P<0.01)。结论氟诱导大鼠肾脏后caspase-3和caspase-9基因表达增高,为氟中毒发病机制的研究提供一定的理论依据。
- 宋国华高继萍王春芳刘茂林王裕
- 关键词：氟中毒CASPASE-3CASPASE-9荧光定量PCR肾脏
