卫礼
- 作品数:112 被引量:228H指数:9
- 供职机构:中国食品药品检定研究院更多>>
- 发文基金:国家科技支撑计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学自然科学总论更多>>
- 鼠诺如病毒分离株全基因组序列的测定及分析被引量:1
- 2013年
- 目的对鼠诺如病毒分离株BJ102062进行全基因组序列测定,并对测序结果进行亲缘关系等分析。方法参照美国国立生物技术信息中心(TheNationalCenterforBiotechnologyInformation,NCBI)发表的MNVl(AY228235)全基因组序列设计引物,根据测定的结果设计下一步引物,分段扩增测序,最后将所测各段拼接;对分离株的全基因组序列进行分析,与人源、牛源和其他鼠诺如病毒的代表株分别进行核苷酸和氨基酸序列的比较并进行亲缘关系分析。结果鼠诺如病毒分离株BJ10-2062基因组全长7381bp,G+C含量56.63%,A+U含量43.33%,含3个开放读码框;全基因组序列经NCBIBI.AST比对,与美国的CR4(EU004674)分离株同源性最高,为92.7%;与其他鼠诺如病毒分离株的同源性大于88%,而与人源和牛源诺如病毒分离株的同源性均小于50%;ORF1~3编码的蛋白相对分子质量分别为187×10^3、58×10^3和22×10^3,含量最高的氨基酸分别是丙氨酸(Ala)、亮氨酸(Leu)、甘氨酸(Oly)和谷氨酰胺(Gln),BJ102062分离株各编码蛋白的氨基酸序列与其他鼠诺如病毒问的同源性明显高于人源和牛源诺如病毒;与原始分离株MNVl相比,BJ10-2062VP1衣壳蛋白第296位由赖氨酸突变为谷氨酸,导致其毒力减弱。基于全基因组核酸序列构建的亲缘关系树表明,BJ10-2062与其他鼠诺如病毒分离株均属于genogroupV,与美国的CR4和NIH-A114株亲缘关系最近,并与美国的其他NIH系列毒株一起形成一个独立的分支。结论对鼠诺如病毒BJ10-2062分离株全基因组的测序分析,为进一步研究鼠诺如病毒特性的分子生物学机制奠定了基础。
- 李晓波付瑞王吉卫礼王淑菁岳秉飞贺争鸣
- 猴B病毒抗体ELISA检测方法的建立和应用研究被引量:9
- 2003年
- 目的 建立猴B病毒抗体ELISA检测方法。方法 采用方阵滴定法 ,比较不同血清稀释度、3种酶结合物、2种抗原对检测结果的影响 ,与国外同类参比实验室进行检测结果的比较 ,确定ELISA法的最佳实验条件。结果 HSV抗原包被浓度 10 μg ml,抗人IgG HRP为 1∶2 0 0 0时 ;或B病毒抗原包被浓度 10 μg ml,抗人IgG HRP为1∶4 0 0 0时 ,阴性血清和阳性血清的A值差距最大。与国外B病毒检测专业实验室的检测结果符合率分别为98 0 2 %和 97 5 2 %。结论 建立了猴B病毒抗体的ELISA检测方法 ,提高了检测方法的准确性。
- 贺争鸣卫礼巩薇田克恭贾锐胜邢瑞昌
- 关键词:抗体ELISA疱疹病毒I型酶联免疫吸附测定
- 实验大鼠仙台病毒抗体检测能力验证结果评价
- 目的了解全国实验动物检测相关实验室在大鼠仙台病毒抗体检测项目的技术水平,发现并解决检验中存在的问题,促进各实验室加强质量管理,提高检测水平。方法制备大鼠血清样品,经过标定后分装,按照CNAS的要求进行均一性和稳定性验证,...
- 李晓波付瑞王洪王吉卫礼王淑菁邢进冯育芳贺争鸣岳秉飞
- 关键词:酶联免疫吸附试验
- 文献传递
- 2003-2008年我国实验猴BV抗体检测结果及抗体水平变化规律的分析被引量:7
- 2010年
- 目的对近年来我国实验猴BV(猴疱疹病毒Ⅰ型)抗体检测结果进行比较分析,以了解我国实验猴BV感染情况及其抗体水平变化规律,为我国实验猴质量控制及标准化提供依据。方法根据国标中ELISA方法 ,对2003~2008年我国11个单位送检的2个品种猴血清进行BV抗体检测,并对检测结果进行统计分析。结果检测的4612份猴血清中,有1843份BV抗体呈阳性,阳性率为39.96%;6年中检测猴群BV抗体阳性率基本在30%~50%。幼年(≤2岁)、青年(2.1~4.0岁)、成年(4.1~6.5岁)、老年(≥6.5岁)4个不同年龄段猴BV感染率分别为26.28%、31.53%、53.74%、87.27%。不同年龄感染率差异显著(P<0.01)。雌猴BV感染率(35.91%)高于雄猴(34.93%),但两者差异不显著(P>0.05)。结论不同年龄猴BV感染率不同,随着年龄的增长BV感染率升高。
- 王吉卫礼巩薇岳秉飞贺争鸣
- 关键词:实验猴酶联免疫吸附试验血清阳性率
- 分泌抗小鼠白血病病毒(MuLv)单克隆抗体杂交瘤的建株、初步鉴定和应用
- 1995年
- 分泌抗小鼠白血病病毒(MuLv)单克隆抗体杂交瘤的建株、初步鉴定和应用贺争鸣,卫礼,吴惠英(中国药品生物制品检定所,北京100050)鉴于MuLv的所有毒株具有共同的群特异性抗原,本文选用经X-C细胞空斑形成等试验证实携带有MuLv的细胞(SRSV感...
- 贺争鸣卫礼吴惠英
- 关键词:白血病病毒病毒抗体单克隆抗体杂交瘤
- 豚鼠弓形虫抗体ELISA检测方法的建立及应用被引量:1
- 2013年
- 目的建立以弓形虫重组抗原的豚鼠弓形虫抗体ELISA方法,并进行初步应用。方法根据重组抗原的工作浓度包被酶标板,确定酶标二抗浓度,对方法的特异性、灵敏度、稳定性和重复性等进行测试。结果确定酶标二抗最佳稀释度为1:8000;与豚鼠淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(LCM)、仙台病毒(sv)、肺炎病毒(PVM)及呼肠孤3型(Re03)阳性血清均无交叉反应;对已知阳性血清的检测上限可达1:2560;6个月的稳定性试验显示A490值的相对偏差均小于15%;批内变异系数(cv)5.7%~9.5%,批间变异系数(CV)1.9%~9.0%;对182份样本的检测表明豚鼠弓形虫抗体阳性率为7.14%(13/182),与IFA检测结果的符合率为100%,与商品化试剂盒的阳性符合率为92-3%,阴性符合率为100%。结论建立的豚鼠弓形虫重组抗原ELISA检测方法可用以弓形虫抗体的常规检测。
- 李晓波付瑞巩薇王吉卫礼王淑菁岳秉飞贺争鸣
- 关键词:弓形虫重组抗原酶联免疫吸附试验
- 乙型脑炎病毒(JEV)免疫荧光(IFA)检测方法的建立被引量:8
- 2010年
- 目的建立乙型脑炎病毒(JEV)免疫荧光(IFA)检测方法,应用于猪及猪源性生物材料JEV的检测。方法滴定病毒TCID50,筛选JEV敏感细胞,依据国标IFA法制备抗原片,并进行特异性、敏感性和稳定性试验。结果选取BHK21细胞作为JEV敏感细胞,病毒感染力滴度(TCID50)为10-8.9.mL-1;与猪瘟病毒(CSFV)、猪细小病毒(PPV)均无交叉反应;稳定性和敏感性试验显示,不同时间IFA检测灵敏度均为1∶2560;可检测到的病毒滴度最低为10-6.5.mL-1。结论建立的IFA法敏感性、特异性强,稳定性好,可用于猪及猪源性生物材料JEV的检测。
- 王吉高正琴卫礼付瑞岳秉飞贺争鸣
- 关键词:乙型脑炎病毒免疫荧光试验
- 流感疫苗主种子批毒种中外源性禽腺病毒Ⅲ型荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用被引量:1
- 2016年
- 目的建立流感疫苗主种子批毒种中外源性禽腺病毒Ⅲ型(egg drop syndrome virus,EDSV)的荧光定量PCR检测方法,并进行验证及初步应用。方法针对EDSV六邻体蛋白保守区分别设计引物和探针,建立荧光定量PCR检测方法,并验证该方法的线性、特异性、精密性、灵敏度及可行性。采用新建立的荧光定量PCR法对16株流感疫苗主种子批毒种进行外源性EDSV检测。结果该方法的最佳线性范围为1×10~4~1×10~9 copies/μl,回归曲线为y=-3.385 x+39.616,R^2>0.99;与其他种属的腺病毒及流感病毒间均无交叉反应;试验内和试验间Ct值的变异系数(CV)均<2%;灵敏度为101 copies/μl;该方法检测P0代样品的最低检测限为10-6掺入体积比例,血清学方法检测P0~P3代样品的最低检测限为10^(-2)~10^(-3)掺入体积比例。该方法检测16株流感毒种中外源性EDSV的结果均为阴性,与血清学方法检测结果一致。结论成功建立了检测EDSV的荧光定量PCR法,提高了检测灵敏度和检测效率,更好地满足了流感疫苗应急检验中快检的要求。
- 王淑菁付瑞李晓波王吉卫礼贺争鸣岳秉飞
- 关键词:流感疫苗毒种
- 应用脾内直接免疫法制备鼠痘病毒单克隆抗体被引量:1
- 1997年
- 采用脾内直接免疫法和杂交瘤技术获得5株杂交瘤细胞。杂交瘤细胞培养上清液和腹水中单克隆抗体效价分别为1∶8~64和10-3~10-4(ELISA)。与其他10种鼠源性病毒和BHK21细胞无非特异性反应。与传统免疫方法相比较,即节省了抗原、缩短了免疫时间,又可避免因免疫抗原致病性强而导致动物死亡的缺点,是一种具有实际应用的免疫方法。
- 贺争鸣卫礼范文平吴惠英
- 关键词:单克隆抗体免疫法杂交瘤技术鼠痘病毒免疫时间
- 长爪沙鼠淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒抗体ELISA检测方法的建立与应用
- 目的建立长爪沙鼠淋巴细胞脉络丛炎病毒(LCMV)抗体ELISA检测方法,应用于长爪沙鼠携带LCMV的检测。方法培养Vero细胞,接种LCMV毒种,制备Vero正常抗原和LCMV特异抗原,滴定酶结合物、正常抗原及特异抗原最...
- 王吉卫礼付瑞李晓波王淑菁邢进冯育芳巩薇岳秉飞贺争鸣
- 关键词:ELISA长爪沙鼠
- 文献传递