周文瑜
- 作品数:30 被引量:140H指数:7
- 供职机构:华东理工大学更多>>
- 发文基金:上海市教育委员会重点学科基金国家重点实验室开放基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:化学工程医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 一种乳糖诱导型表达载体及其转化的粘质沙雷氏菌
- 本发明公开了一种乳糖诱导型表达载体,可用廉价的乳糖替代昂贵的异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)作为诱导剂,可广泛应用于外源基因的表达以及粘质沙雷氏菌代谢途径的改造,例如用于将内消旋-2,3-丁二醇脱氢酶(meso-...
- 魏东芝沈亚领朱虎周文瑜曹学
- 文献传递
- 头孢菌素C去乙酰基酶产生菌的筛选、酶学性质及产酶条件优化
- 2011年
- 以7-ACA为底物从土壤中筛选得到一株产头孢菌素C乙酰水解酶的微生物,初步鉴定为红酵母。酶学性质研究表明:静息细胞CAH的最适pH为7.0,最适反应温度为25℃;在温度低于40℃保存静息细胞时CAH的稳定性很好,在pH 5.5~8.0的范围内保存静息细胞时CAH比较稳定。产酶条件优化结果为:葡萄糖30g/L,国产酵母粉20 g/L,KH_2PO_4 5g/L,培养基的最优初始pH为7.0。
- 韩云宾周文瑜胡媛魏东芝沈亚领方善综金雄熊叶凤起
- 关键词:7-氨基头孢烷酸
- 粘质沙雷氏菌G1利用玉米浆干粉和磷酸氢二铵生产2,3-丁二醇的研究被引量:3
- 2013年
- 研究了几种工业氮源对粘质沙雷氏菌G1发酵生产2,3-丁二醇的影响,在确定玉米浆干粉为氮源的基础上,利用Plackett-Burman(PB)实验和响应面法(RSM)实验对玉米浆干粉和磷酸氢二铵[(NH4)2HPO4]的浓度进行了优化,确定优化培养基(g·L-1)为:蔗糖90,玉米浆干粉20.32,(NH4)2HPO47.21,NaAc 4,柠檬酸钠14,MgSO40.5,Fe-SO40.02,MnSO40.01。并以此优化培养基进行了摇瓶和分批补料发酵,结果表明,摇瓶发酵中,90g·L-1的蔗糖最终被转化成43.06g·L-1的2,3-丁二醇;分批补料发酵中,2,3-丁二醇浓度为128.28g·L-1,产率为2.67g·L-1·h-1,转化率为0.48g·g-1蔗糖。以玉米浆干粉和(NH4)2HPO4为氮源,2,3-丁二醇浓度较高,培养基的成本大幅降低,为工业化生产奠定了基础。
- 郝英利张燎原孙建安魏东芝周文瑜沈亚领朱家文
- 关键词:响应面法分批补料发酵
- TRAIL蛋白的体外活性稳定性初步研究
- 2011年
- 大肠杆菌发酵表达的TRAIL蛋白经过两步纯化可得到纯度95%以上的活性蛋白,得率为40%。天然TRAIL蛋白为同源三聚体形式,在三聚体中心隐蔽结合Zn^(2+),Zn^(2+)可维持TRAIL蛋白天然结构的稳定性。研究发现在纯化后的重组可溶性TRAIL蛋白中添加Zn^(2+),并且Zn^(2+)与TRAIL单体的摩尔比例达到2:1时,TRAIL蛋白的活性达到最高。本文初步研究了TRAIL蛋白的体外活性稳定性问题,发现在添加了最适Zn^(2+)后的TRAIL蛋白保存溶液中添加25mmol/L LArg与50mmol/L L-Glu有助于抑制TRAIL蛋白活性下降、并可能长期稳定蛋白活性。
- 张红魏东芝周文瑜陶欣艺沈亚领周劲松张国钧孙菁球谊
- 关键词:TRAILZN^2+L-ARG
- 粘质沙雷氏菌利用蔗糖和柠檬酸铵生产2,3-丁二醇的研究被引量:5
- 2009年
- 研究了几种无机氮源对粘质沙雷氏菌发酵生物量和产物2,3-丁二醇形成的影响,在确定柠檬酸铵为无机氮源的基础上,利用响应面法(RSM)对柠檬酸铵和硫酸锰的浓度进行了优化,得出了最佳浓度,并以此最优成分进行了摇瓶发酵和分批补料发酵。在摇瓶发酵中,110g·L-1的蔗糖最终被转化成44g·L-1的2,3-丁二醇,转化率为0.4g.g-1,产率为1.13g·L-1.h-1;在分批补料发酵中,共有166g·L-1的蔗糖被消耗,2,3-丁二醇的最高浓度为81.2g.L-1,乙偶姻的浓度为7.7g·L-1,2,3-丁二醇转化率达到0.489g.g-1,产率达到1.7g·L-1.h-1。
- 杨云龙张燎原孙建安魏东芝周文瑜沈亚领朱家文
- 关键词:粘质沙雷氏菌2,3-丁二醇响应面法分批补料发酵
- 粘质沙雷氏菌D-乳酸脱氢酶基因,克隆、表达重组菌株及重组酶的研究
- 本发明涉及粘质沙雷氏菌D-乳酸脱氢酶基因,克隆、表达重组菌株及重组酶的研究。具体地,本发明提供了一种新的D-乳酸脱氢酶(简称为“D-LDH蛋白”),编码D-LDH蛋白的多核苷酸和经重组技术产生这种D-LDH蛋白的方法。本...
- 沈亚领邱昱张燎原魏东芝张国钧周文瑜朱家文
- 文献传递
- gdh和ldh基因共表达重组大肠杆菌合成D-乳酸研究被引量:3
- 2014年
- D-聚乳酸是一种生物可降解材料,具有高热稳定性,生物合成其单体D-乳酸将具有广阔的前景。以枯草芽孢杆菌基因组DNA为模板,PCR扩增葡萄糖脱氢酶基因gdh,与表达载体pETduet-1连接获得pETduetGDH;再以粘质沙雷氏菌基因组DNA为模板,PCR扩增乳酸脱氢酶基因ldh,与已构建的pETduet-GDH连接获得pETduet-LG,转化E.Coli BL21共表达。过表达GDH和LDH大肠杆菌可不对称还原丙酮酸合成D-乳酸。经全细胞转化条件优化发现,添加NAD+能提高起始反应速度,在最佳温度37℃、0.2 mol/L磷酸缓冲液、pH7.0、细胞浓度OD值为40和丙酮酸20 g/L时,底物转化率可达86.5%,D-乳酸产量为17.3 g/L。
- 胡媛周文瑜魏东芝沈亚领
- 关键词:D-乳酸葡萄糖脱氢酶共表达辅酶再生
- 胶原蛋白的高效制备及与明胶的鉴别被引量:8
- 2010年
- 在分析酸提取法和酶解法提取牛皮中胶原蛋白各自的优缺点后,研究并最终确定了一种提取牛皮中胶原蛋白的新方法——酸酶复合法,该法工艺简单,在相对较短的制备时间内,胶原蛋白的提取率可以达到54.5%,同时又保证了胶原蛋白的天然三螺旋结构。同时以对胶原蛋白性质的研究结果为基础,建立一种快速且准确的胶原蛋白和明胶的鉴定及质量评价方法——快速鉴定评价法,包括聚丙烯酰胺凝胶电泳、丹宁酸沉淀实验、胰蛋白酶敏感性实验和体外成纤维能力实验。酸酶复合法和快速鉴定评价法对胶原蛋白提取工艺的大规模生产应用及对市场上各种产品的鉴定及品质评价具有实际意义。
- 汤俊魏东芝张国钧沈菊泉董莹周文瑜马志英沈亚领
- 关键词:胶原蛋白明胶
- 淡竹叶中总黄酮和三种黄酮苷的同步HPLC检测(英文)被引量:5
- 2009年
- 目的:建立检测中药材淡竹叶中的总黄酮(以芦丁为外标)和3种黄酮苷(异荭草素、牡荆苷、苜蓿素7-0葡萄糖苷)的有效、精确而可靠的HPLC/DAD方法。方法:色谱柱为Agilent SB—C18柱(250mm×4.6mm,5.0μm),用乙腈和0.5%的冰醋酸为流动相梯度洗脱,波长为350nm。结果:其加样回收率为97.1%-102.3%,芦丁和3种黄酮苷均得到满意的分辨率和线性范围,同时为了确保方法的有效性,还分析了不同产地淡竹叶中的总黄酮和3种黄酮苷的含量。结论:HPLC检测方法可用于淡竹叶及其相关产品的质量控制。
- 刘体云卢艳花魏东芝周文瑜
- 关键词:淡竹叶黄酮苷
- 一种共价活化的固定化酶载体
- 本发明属于生物化学领域,是一种经共价活化的可制备固定化酶的蛋白质载体。本发明所说的固定化酶载体是一种经共价活化的蚕丝蛋白,它来源丰富、加工方便、机械强度和通透性好,可制成丝状,线状、纤维织物状,所得的固定化酶的比活性和稳...
- 楼一心周文瑜
- 文献传递