孙文学 作品数:33 被引量:127 H指数:6 供职机构: 温州医学院附属第一医院 更多>> 发文基金: 浙江省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
原发性肾病综合征时血树突状细胞的变化 背景:原发性肾病综合征(prime nephrotic syndrome,PNS)发病机理较复杂,多数学者认为与机体免疫功能紊乱有关,是一组免疫介导性疾病。以往大多数研究只注重了。PNS的T细胞免疫功能的紊乱,而树突状细... 孙文学 戴勇 李富荣 黄朝兴 齐辉文献传递 雷公藤多甙治疗肾小球肾炎的分子机制研究进展 被引量:30 2003年 孙文学 戴勇关键词:雷公藤多甙 肾小球肾炎 系膜细胞 细胞因子 筛选大鼠血管钙化消退差异表达基因及初步分析 被引量:3 2011年 目的:探讨大鼠在血管钙化消退过程中基因表达的变化。方法:选取6周龄SPF级雄性SD大鼠24只,随机分成3组(n=8),分别为对照组、钙化组和消退组。钙化组和消退组制作血管钙化模型(vitamin D3 plus nico-tine,VDN),对照组生理盐水和花生油灌胃。钙化组和对照组于实验第8周处死,消退组继续饲养至16周处死,测定各组大鼠动脉组织钙含量并作病理检查。采用抑制性消减杂交方法将消退组和钙化组大鼠血管cDNA作差减杂交,分离消退组较钙化组高表达或低表达基因的cDNA片段,建立消退组和钙化组的差异表达文库,扩增、鉴定文库并测序阳性克隆,BLAST比对测序序列。随机挑选4个基因进行RT-PCR验证和DNA条带半定量分析。结果:①血管组织钙含量测定显示钙化组((15.34±2.51)mg/g)较对照组((5.20±0.75)mg/g)血管组织钙含量明显升高(P<0.01);消退组((12.73±1.89)mg/g)较钙化组降低(P<0.05);②构建了血管钙化的差减文库,对所获阳性克隆进行测序和BLAST比对分析,获得28个表达上调基因和22个表达下调基因。RT-PCR验证示Prdx3,Ank2,Ror2,Abcc1等基因在消退组和钙化组间差异表达,消退组较钙化组表达增高,平均约为后者的1.7倍。结论:VDN模型诱导的大鼠血管钙化可以发生主动消退。钙化消退过程中焦磷酸合成相关基因、谷氨酸信号相关基因、还原及凋亡调节基因表达上调,同时见较多骨化相关基因及氧化活性等基因表达下调。钙化抑制基因的表达增多而钙化促进基因表达的下降可能是钙化发生主动消退的内源性机制。 吴秀娟 刘毅 孙文学 杜晓红 陈天新 毛瑞阳 徐利鸳关键词:钙质沉着症 基因文库 骨化 抑制性消减杂交 终末期肾脏病患者外周血树突细胞的数量及活性 被引量:2 2007年 目的观察终末期肾脏病(ESRD)患者外周血中树突细胞(DC)数量及活性,为反映细胞免疫功能、评估透析对机体免疫状态的影响及开展ESRD免疫治疗提出可能。方法31例ESRD患者分为尿毒症组(未透析,11例)、腹膜透析组(10例)、血液透析组(10例),另选取23名健康者作为正常对照组。采用DC分类试剂盒检测外周血DC亚群百分率。分离外周血单个核细胞,细胞因子体外诱导培养,采用流式细胞仪检测DC表型分子表达水平。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测第9天DC培养上清液中白介素(IL)-12的含量。采用异体混合淋巴细胞培养评估DC刺激T细胞增殖的能力。结果①DC亚群状况:与正常对照组比较,尿毒症组的外周血DC显著减少(P<0.05),以淋巴系DC(PDC)减少为主(P<0.01);腹膜透析组的外周血DC较尿毒症组显著增多(P<0.01),接近正常对照组(P>0.05);与正常对照组比较,血液透析组的髓系DC(MDCI)明显减少(P<0.01),PDC明显增多(P<0.01),MDC1/PDC降低(P<0.01)。②DC表型分析:与正常对照组比较,尿毒症组的DC表型分子表达均显著减少(P值均<0.01);腹膜透析组DC表达CD40、CD80、CD83显著减少(P值分别<0.05和0.01);血液透析组DC表达CD1a、CD11c、CD40显著减少(P值均<0.01),表达CD123显著增多(P<0.05)。③IL-12:尿毒症、腹膜透析和血液透析组DC分泌IL-12较正常对照组明显减少(P值均<0.05)。④异体混合淋巴细胞反应:与正常对照组比较,尿毒症和腹膜透析组的DC刺激T细胞增殖的能力明显降低(P值均<0.01),血液透析组接近正常(P>0.05)。结论ESRD患者DC数量明显减少且功能明显紊乱,腹膜透析及血液透析不同程度地改善了此现象,为患者的生物免疫治疗提供可能。 孙文学 戴勇 齐晖 郑伟红 李富荣关键词:树突细胞 流式细胞仪 混合淋巴细胞反应 抗原呈递 血液透析中心静脉长期留置导管感染相关因素的回顾性分析 目的 分析血液透析中心静脉长期留置导管感染的发病率、相关因素,以采取有效的防控措施和护理对策降低感染发生.方法 回顾性调查分析47例中心静脉长期留置导管患者,分析透析龄、导管留置时间与感染的关系,分析导管感染的发病率及菌... 孙文学 牟素青树突状细胞与肾脏病 被引量:1 2005年 孙文学 戴勇关键词:肾疾病 树突状细胞 T细胞 肾肿瘤 原发性肾病综合征患者外周血树突状细胞抗原提呈功能的研究 2005年 目的了解原发性肾病综合征患者外周血树突状细胞的抗原提呈能力。方法采用流式细胞仪检测细胞表面标记表达,混合淋巴细胞反应评价初发原发性肾病综合征病人组(14例)和对照组(21例)外周血树突状细胞的抗原递呈能力。结果原发性肾病综合征患者外周血单核细胞能向树突状细胞分化,分化后的树突状细胞表达CD11 c、CD40、CD80和CD83的阳性率显著低于对照组(P<0.01),刺激淋巴细胞增殖的能力显著弱于对照组(P<0.05)。结论原发性肾病综合征患者外周血单核细胞向树突状细胞分化的能力减弱,分化后的树突状细胞具有较弱的抗原递呈能力。 李德萍 孙文学 王康 戴勇 李富荣关键词:树突状细胞 细胞分化 抗原提呈 雌激素对大鼠血管钙化消退影响的研究 目的通过研究雌激素对尼古丁和维生素D3诱发的大鼠血管钙化变化过程的影响,进一步阐明血管钙化是否是可逆的过程,雌激素对血管钙化的消退有无促进的作用。方法 96只SD雌性大鼠随机分为对照组和钙化组,其中24只为对照组,72只... 孙文学 刘毅 阮吉 徐玉兰文献传递 抑制性消减杂交法筛选大鼠血管钙化相关基因的研究 被引量:4 2010年 目的了解大鼠血管钙化过程中血管组织基因表达的改变。方法选取6周龄SPF级雄性SD大鼠24只,随机分成钙化组和对照组(各12只),钙化组大鼠制作血管钙化模型(VDN)。两组大鼠于实验第8周处死后测定动脉组织钙含量并作病理检查。提取两组大鼠主动脉中膜RNA,反转录成eDNA,采用抑制消减杂交法(SSH)分离钙化组较正常组高表达基因的cDNA片段,将差异片段与PMD18-T质粒载体连接起来,热转化法转化感受态菌DH-5α,建立钙化组与对照组之间的差异表达eDNA文库。菌落PCR法鉴定重组载体,测序阳性克隆,BLAST比对分析测序结果。随机对Nell 1等6个基因进行差异表达的RT—PCR验证。结果(1)病理检查示钙化组大鼠主动脉中膜扭曲并见明显钙盐沉积,对照组大鼠主动脉中膜无任何钙盐沉积。(2)血管组织钙测定示钙化组和对照组大鼠分别为(15.34±2.51)mg/g和(5.20±0.75)mg/g,钙化组大鼠血管组织钙含量显著高于对照组(P〈0.01)。(3)采用SSH方法成功构建血管钙化的差减文库,对正反双向差减文库进行菌落PCR鉴定后分别获得92个阳性克隆(正向文库)和18个阳性克隆(反向文库),插入片段的大小主要集中于150~400bp。对所获阳性克隆进行测序和BLAST比对分析,获得钙化相关43个上调基因和11个下调基因。RT—PCR验证示CytoP450、Nell1等5个基因在钙化组和对照组中表达变化较大,钙化组表达高于对照组,约为后者的1.71倍。结论成功构建血管钙化VDN模型。血管钙化过程中相关基因表达发生改变,一些骨化基因以及凋亡、氧化、炎性反应和细胞因子等相关基因表达上调,同时伴有少数可能抑制钙化的基因下调。 吴秀娟 刘毅 孙文学 杜晓红 张媛元 徐利鸳关键词:钙质沉着症 基因文库 骨化 抑制性消减杂交 老年病人维持性血液透析的特点 被引量:21 2008年 目的探讨老年病人维持性血液透析的临床特点。方法对64例维持性血液透析的尿毒症患者,其中老年血液透析患者(≥65岁)32例,中青年血液透析患者(<65岁)32例,对此64例患者的原发病、透析效果、营养指标以及近5个月内并发症发生情况进行分析。结果继发性肾脏疾病成为老年人尿毒症的主要病因。老年组尿素氮清除效率(KT/v),尿素下降率(URR)与中青年组比无明显差异,蛋白分解代谢率(PCR)低于中青年组(P<0.05),心胸比值大于中青年组(P<0.05)。老年组患者血红蛋白(Hb),血浆白蛋白(Alb),血清肌酐(Cr)均低于中青年组(均P<0.05),血清尿素氮(BUN)低于中青年组(P<0.01),C反应蛋白(CRP)高于中青年组(P<0.05),总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),钙(Ca),磷(P),甲状旁腺激素(PTH)与中青年组比无明显差异(P>0.05)。老年组在透析中低血压、血管通路血流不畅发生率高于中青年组(P<0.001),高血压、感染发生率高于中青年组(P<0.05),恶心呕吐,肌肉痉挛发生率与中青年患者比无明显差异。结论减少透析并发症,保持血管通道长期通畅,改善营养状况是提高老年慢性肾衰竭维持性血液透析患者的生活质量和生存率的关键。 陈莉 刘毅 郑尘非 孙文学 徐玉兰关键词:老年人 尿毒症 血液透析