宁小敏 作品数:9 被引量:42 H指数:4 供职机构: 西北农林科技大学 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 国家自然科学基金 国家生猪现代产业技术体系建设项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 更多>>
miR-191通过调控C/EBPβ转录影响猪前体脂肪细胞分化 被引量:4 2013年 对实验室前期Solexa结果进行深入挖掘,结合生物信息学分析从不同发育阶段猪皮下脂肪组织差异表达的miRNAs中筛选出高丰度差异极显著的候选miR-191.采用腺病毒过表达miR-191,实时定量PCR、Western blot及双荧光素酶报告基因检测等技术方法,初步研究miR-191对猪前体脂肪细胞分化的影响.结果发现,miR-191随着猪前体脂肪细胞的分化表达量逐渐增加.与对照组相比,过表达miR-191的猪前体脂肪细胞中miR-191转录本显著增加,并引起CCAAT增强子结合蛋白β(C/EBPβ)、PPARγ和aP2的mRNA水平降低,抑制了猪前体脂肪细胞分化.同时,Western blot结果显示,与对照组相比过表达miR-191的猪前体脂肪细胞在48 h C/EBPβ蛋白水平下降了55%.更重要的是,通过TargetScan等算法正向筛选以及MicroInspector反向筛选联合获得miR-191候选靶基因,经双荧光素酶报告基因检测结果证实,miR-191可直接作用于C/EBPβ3′UTR,从而降低萤火虫荧光素酶活性.综上所述,miR-191可能通过抑制脂肪细胞分化早期标志基因C/EBPβ的表达,从而抑制了猪前体脂肪细胞的分化. 刘帅 宁小敏 李美航 仇杨 李艳杰 董培越 杨公社关键词:猪前体脂肪细胞 表达谱 腺病毒 Wnt3a在EMSC脂肪细胞线粒体生物合成和蛋白乙酰化中的作用研究 Wnt蛋白是生物发育的关键调控因子,其中Wnt3a在脂肪形成和线粒体生物合成中起重要作用。尽管已有研究报道Wnt3a在脂肪形成中的调控作用,但是Wnt3a调控线粒体生物合成和功能的作用机制还不明确。本论文通过研究Wnt3... 宁小敏关键词:脂肪细胞 WNT3A 猪组织中miR-103实时定量PCR分析时合适内参的确定 被引量:4 2009年 定量实时PCR是miRNA表达检测的主要方法之一,而利用合适内参对定量实时PCR数据进行校正处理是确保该方法分析准确性的关键.为了确定猪正常组织中miR-103定量实时PCR检测分析的合适内参,首先采用geNorm算法和扩增效率试验对miR-196、U6 snRNA和总RNA3个候选内参进行了评价;然后以miR-103的绝对定量结果为对照,比较分析了3个候选内参的校正准确性.结果表明,miR-196的表达稳定性和扩增效率均优于U6 snRNA和总RNA;以miR-196为内参的miR-103相对定量结果同绝对定量结果具有较高的一致性,两者均显示miR-103在猪大脑中高丰度表达,在胃、小脑、小肠、心脏、肝脏和胰脏中适度表达,在肺、脾脏和腿肌中轻度表达.这些结果说明,miR-196可作为猪正常组织中miR-103定量实时PCR相对定量分析的一个合适内参. 李国喜 宁小敏 李新建 吴宗松 杨公社过表达miR-103促进猪前体脂肪细胞分化 被引量:14 2012年 为阐明miR-103在猪前体脂肪细胞分化过程中的调控作用,采用Real-time PCR检测猪前体脂肪细胞成脂分化过程中的miR-103表达谱,明确了其在分化过程中的表达趋势;使用miR-103的腺病毒超表达载体感染猪原代脂肪细胞,随后采用Real-time PCR和Western blotting分别检测成脂标记基因PPARγ、aP2的mRNA和蛋白表达量变化;油红O染色观察腺病毒miR-103侵染的前体脂肪细胞诱导分化第8天的成脂情况。结果显示,miR-103的表达量随着脂肪细胞分化而增加,在miR-103超表达的猪原代脂肪细胞的诱导分化过程中,成脂标记基因PPARγ、aP2的表达量与对照相比显著升高,分化第8天观察到明显的脂滴。说明miR-103能够促进猪前体脂肪细胞分化。 李美航 仇杨 刘帅 董培越 宁小敏 李艳杰 杨公社 孙世铎关键词:猪前体脂肪细胞 腺病毒 乳酸菌对生猪健康和生产性能的影响 被引量:8 2019年 病原体对抗生素的耐药性不断增强,以及动物源性食品中抗生素残留所带来的食品安全问题引起越来越多的关注。乳酸菌是一种安全、优质、高效的益生菌,可调节肠道环境,抑制或杀死胃肠道病原体,改善肠道微生物平衡,调节肠粘膜免疫力,保持肠屏障功能,有利于猪的健康,提供了抗生素策略的潜在替代方案。本文就饲料中添加乳酸菌作为益生菌对新生仔猪、断奶仔猪、生长育肥猪和母猪的作用进行综述,以期为进一步提高猪的生产性能和健康养殖提供参考,不断提高猪的福利和养殖水平。 王蔚 王勃 卢军锋 宁小敏 王智 王智 史新娥关键词:饲料 乳酸菌 健康养殖 miR-196a对猪脂肪细胞增殖分化的影响 microRNA (miRNA)是一类在转录后水平调控基因表达的内源性非编码小RNA(Wightman et al.1993;Reinhart et al.2000),在机体内广泛地参与许多生命过程的调控,包括细胞分化、... 宁小敏关键词:脂肪细胞 文献传递 MicroRNA调控动物脂肪细胞的分化 被引量:8 2009年 MicroRNA(miRNA)属于非编码小调节RNA,在动物细胞的增殖、分化、凋亡和代谢等许多生物学过程中具重要作用.研究显示大量miRNA也参与动物脂肪细胞的分化调节,在前体脂肪细胞向成熟脂肪细胞的分化过程中具有多种功能.目前的研究结果表明,这些miRNA在脂肪细胞分化的早期或后期通过其靶基因发挥功能,如miR-17-92和miR-143分别通过其靶基因Rb2/p130和ERK5/BMK1调节脂肪细胞分化,过表达可促进体外培养的脂肪细胞分化.因此,了解更多miRNA在脂肪细胞分化中的功能,可以加深对动物脂肪形成分子机制的理解,并有可能将其作为脂类代谢性疾病治疗的潜在靶点. 李国喜 宁小敏 康相涛 杨公社关键词:MICRORNA 脂肪细胞 分化