张安玲
- 作品数：75 被引量：186H指数：8
- 供职机构：天津大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”天津市科技计划更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程生物学更多>>
- miR-200a通过β-catenin/TCF-4信号通路抑制胃癌细胞系生长侵袭能力的体外研究
- ＜正＞目的研究miR-200a通过β-catenin/TCF-4信号通路对SGC7901胃癌细胞增殖活性及侵袭迁移能力的影响。方法化学合成miR-200a mimics,采用脂质体Lipofeetamine 2000转染...
- 苏娟张安玲康春生谢佳贝韩静张庆瑜
- 文献传递
- 应用亚硫酸氢盐修饰后PCR联合TA克隆测序对E-cadherin启动子区甲基化水平的检测被引量：1
- 2014年
- E-cadherin是一种细胞粘附因子,通过增强细胞之间的粘附而起到抑制肿瘤转移的作用.Ecadherin基因启动子区的高甲基化是导致其在众多肿瘤细胞中表达下调甚至缺失的主要原因之一.本实验首先抽提SGC-7901细胞(胃腺癌细胞)、A549细胞(肺腺癌细胞)、MCF-7细胞(乳腺癌细胞)等3个肿瘤细胞株的全基因组DNA,然后对抽提的DNA进行亚硫酸氢盐修饰和纯化回收,根据修饰后的DNA序列设计引物并对其进行PCR扩增.然后将PCR扩增产物与pUC-T TA载体连接并转化入感受态大肠杆菌DH5α中进行培养,对筛选出的含有阳性重组子的菌落进行测序.测序结果显示,3个肿瘤细胞株的E-cadherin基因启动子区的CpG岛都呈现了高度的甲基化,亚硫酸氢盐的修饰效率达到了99.2%.综上研究表明,亚硫酸氢盐修饰后PCR(BSP)联合TA克隆测序可以对肿瘤细胞某基因启动子区CpG岛的甲基化水平进行精确量化,研究所使用的3个肿瘤细胞株均可作为研究肿瘤细胞E-cadherin基因甲基化的细胞模型.
- 贾文亮张庆瑜李素丽周芳张安玲
- 关键词：甲基化E-CADHERIN
- 反义miR221/222上调TIMP3抑制胶质母细胞瘤U251细胞侵袭能力的体外研究
- Trizol 法提取人脑胶质母细胞瘤细胞系 U251、TJ861、TJ905、TJ899和 A172以及星形细胞瘤细胞系 H4细胞的总 RNA 并寓集 miRNA,晶芯®哺乳动物 miRNA 微阵列芯片杂交, 扫描后 S...
- 张春智康春生杨卫东王广秀张安玲浦佩玉
- 关键词：MIR-221MIR-222TIMP3
- 文献传递
- 反义miR-30a-5p对人脑胶质瘤细胞U251生长的抑制作用被引量：3
- 2011年
- 目的观察敲低microRNA（miR）-30a-Sp表达对人脑胶质瘤U251细胞生物学特征的影响。方法用脂质体介导转染寡聚核苷酸抑制物（miR-30a-Spinhibitor）于人脑胶质瘤U251细胞。采用实时聚合酶链反应（real—time PCR）检测转染后U251细胞的miR-30a-5p表达水平以鉴定抑制效果；噻唑蓝（MTT）比色法评价miR-30a-5p inhibitor抑制U251细胞生长的作用；Transwell实验检测细胞侵袭能力变化；流式细胞术检测细胞周期变化；AnnexinV法检测细胞早期凋亡。结果real-time PCR检测结果显示转染miR-30a-5p inhibitor后，肿瘤细胞miR-30a-5p表达下降，细胞增殖活性降低，细胞侵袭能力明显受到抑制，细胞周期阻滞在G0／G1期及早期凋亡增加。结论miR-30a-5p可能是癌微RNA（oncomiR）之一，有望成为人脑胶质瘤基因治疗的候选靶点。
- 王坤贾志凡张安玲王广秀郝建伟浦佩玉
- 关键词：胶质瘤增殖细胞周期
- 敲低U251细胞miR-221/222表达对其基因组表达的影响
- 2011年
- 目的 采用基因表达谱芯片和生物信息学方法研究miR-221/222对胶质瘤U251细胞株信号通路的调控作用.方法 miR-221/222反义寡核苷酸瞬时转染人胶质瘤细胞株后提取总RNA进行基因表达谱检测,对差异表达基因行生物信息学分析,将核心转录因子进行实验验证.结果 敲低胶质瘤U251细胞中miR-221/222表达后,基因表达谱分析确定158个差异表达基因;生物信息学分析发现干扰素-α信号通路是受差异表达基因调节最显著的通路,其中STAT1和STAT2是干扰素-α通路的核心蛋白.结论 抑制miR--221/222基因簇表达可部分通过干扰素-α通路上调STAT1和STAT2 mRNA的翻译水平,并使U251细胞mRNA的表达谱发生改变.
- 杨旸张春智杨卫东韩磊张安玲浦佩玉康春生
- 关键词：MIR-221MIR-222神经胶质瘤
- 敲低Yes相关蛋白表达对人脑胶质瘤细胞SNB19生长的抑制作用被引量：4
- 2014年
- 目的探究敲低Yes相关蛋白（YAP）对人脑胶质瘤细胞SNBl9细胞生物学特征的影响。方法采用YAP干扰RNA（YAPsiRNA）敲低SNBl9细胞中YAP的表达，Westernblot法鉴定肿瘤细胞中YAP是否已被敲低；噻唑蓝（MTY）比色法测定YAP敲低后胶质瘤细胞的增殖能力；Transwell实验检测胶质瘤细胞侵袭能力的变化；流式细胞术和AnnexinV标记法分别检测胶质瘤细胞周期及凋亡的变化。应用统计软件SPSS18．0进行统计学处理。结果Westernblot证实转染YAPsiRNA可有效敲低SNB19细胞中Yes相关蛋白的表达；敲低Yes相关蛋白的表达可以抑制胶质瘤细胞增殖活性，细胞存活率由（100．00±0．00）％下降为（52．32±3．10）％（F=33．00，P〈0．01），细胞周期阻滞于G0-G1期（F=8．76，P〈0．01），细胞侵袭能力明显受抑，穿膜细胞数由（163．20±10．10）个下降至（37．71±2．52）个（F=282．05，P〈0．01），凋亡增加，凋亡率由（3．56±0．35）％增加至（18．99±0．66）％（F=931．99，P〈0．01）。结论敲低胶质瘤细胞SNB19中YAP表达可抑制肿瘤细胞增殖和侵袭，诱导细胞凋亡；YAP可成为人脑胶质瘤基因治疗的潜在靶点。
- 于福华贾志凡浦佩玉王广秀张安玲杨卫东
- 关键词：神经胶质瘤细胞增殖细胞凋亡
- 人脑胶质瘤中IKKε的表达及其意义被引量：3
- 2012年
- 目的探讨IKKε基因在人脑胶质瘤组织中的表达及其意义。方法收集具有明确病理分级的51新鲜胶质瘤标本,其中Ⅰ～Ⅱ级胶质瘤24例,Ⅲ～Ⅳ级胶质瘤27例,并取7例内减压去除的脑组织标本作为对照。采用实时定量PCR(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)方法检测IKKεmRNA和蛋白水平的表达,免疫组化染色确定IKKε的细胞定位,研究IKKε蛋白表达与胶质瘤病理分级的关系。结果 IKKεmRNA水平(t=23.734,P<0.05)和蛋白水平(掊2=12.583,P<0.05)在人胶质瘤中的表达显著高于对照脑组织,在Ⅲ～Ⅳ级胶质瘤组的表达显著高于Ⅰ～Ⅱ级组(t=21.587,P<0.05)。Western blot结果显示7例对照脑组织6例无IKKε表达(6/7),24例Ⅰ～Ⅱ级胶质瘤3例中/高表达,27例Ⅲ～Ⅳ级胶质瘤23例中/高表达。IKKε的表达与人脑胶质瘤病理分级呈正相关(r=0.513,P<0.05)。免疫组化染色显示IKKε阳性反应物主要位于胞浆。结论IKKε在人脑胶质瘤中呈高表达,IKKε的表达与人脑胶质瘤的病理分级相关,可能与人脑胶质瘤的发生及恶性进展有关。
- 李会兵俞凯张安玲王坤王广秀康春生黄强
- 关键词：人脑胶质瘤
- 转染Notch2基因对人脑胶质瘤细胞系A172生长的抑制作用被引量：1
- 2014年
- 目的探讨人脑胶质瘤细胞系A172转染Atoc/i2基因后抑制细胞增殖情况及其机 制。方法将A172细胞分为空白对照组、转染空载质粒组（pcDNA3）、转染Notch2质粒组 （Notch2-pcDNA3）三组，后两组分别转染空载体和Notch2。采用MTT法检测其对细胞增殖的影响，流式细胞术检测其对细胞周期和凋亡的影响，Transwell方法检测其对细胞侵袭的作用，Western blotting检测转染Notch2质粒后A172细胞中重要信号通路成员Notch2、表皮生长因子受体 （EGFR）、组织磷酸化蛋白（p-AKT）、胞内磷脂酰肌醇激酶（PI3K）、人第10号染色体缺失的磷酸酶 （PTEN）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（caspase3）、细胞核因子kB（NF-kB）、增殖细胞核抗原（PCNA）、白细胞介素-2（Bcl-2）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）及周期素依赖性激酶 抑制因子l（CyclinDl）]相关基因的表达。结果MTT实验结果显示，与对照组及pcDNA3组比 较，A172细胞被转染Notch2后细胞存活率明显下降，差异有统计学意义（P〈0.05）;S期及G2/M期 细胞减少，G0/G1细胞较对照组相比增加22.1%,细胞明显被阻滞于G0/G1期；凋亡细胞数从对照组 的1.2%增加到14.8%;细胞侵袭数由对照组的35.23个降低至17.43个。与PI3K-AKT通路相关的 重要成员 EGFR、p-AKT、PI3K 以及 NF-kB、PCNA、Bc1-2、MMP-2、MMP-9 及 CyclinDl 等表达水平 均有明显下调；而拮抗PI3K/AKT活性的抑癌蛋白PTEN以及Caspase-3的表达则明显上调。结论转染TVoteM基因可抑制细胞增殖和侵袭，诱导细胞凋亡以及重要信号通路成员的基因表达变化。
- 王广秀许鹏贾志凡张安玲浦佩玉
- 关键词：NOTCH2神经胶质瘤EGFRPI3KAKT通路
- RNA干扰敲低Dicer对胶质瘤细胞恶性表型的影响被引量：4
- 2011年
- 目的 观察应用RNA干扰（RNAi）技术敲低Dicer酶后,在体外对U251人胶质瘤细胞生物学特征的影响.方法 构建针对Dicer基因的小分子干扰RNA重组腺病毒表达载体（rAd-Dicer）转染至U251细胞.应用RT-PCR检测Dicer mRNA水平的变化,应用免疫荧光和Western blot方法检测Dicer基因在蛋白水平的变化,并对肿瘤细胞中相关功能蛋白的表达进行分析比较.应用MTT法、流式细胞术和Transwell方法评价肿瘤细胞转染前后生物学行为的变化.结果 rAd-Dicer可显著抑制U251细胞Dicer基因的表达;与正常对照组（control）和阴性对照组（rAd-HK）比较,Western blot分析结果显示p-AKT,MMP2/9,PCNA,Cyclin a,VEGF,CD34功能蛋白在rAd-Dicer转染组细胞中表达明显上调;细胞周期结果表明rAd-Dicer转染组进入S期的细胞数增加了 14.1%～15.3%,MTT和Transwell实验结果显示rAd-Dicer转染组细胞增殖速率和体外侵袭能力显著增强.结论 敲低Dicer酶表达后,U251细胞表型具有更为恶性转化的倾向,由此初步推测全面抑制细胞microRNAs表达有可能促进肿瘤生成.
- 韩磊张安玲岳晓许鹏杨旸王广秀贾志凡浦佩玉康春生
- 关键词：神经胶质瘤DICERRNA干扰生物学表型
- 反义miR-106b抑制人脑胶质瘤细胞增殖及侵袭的研究
- 目的探讨抑制miR-106b过表达对人脑胶质瘤细胞系增殖和侵袭的影响。方法将反义miR-106b用脂质体转染于人脑胶质瘤细胞抑制miR-106b的表达,qRT-PCR检测转染后miR-106b表达情况,流式细胞术检测;M...
- 张安玲王坤王广秀贾志凡浦佩玉
- 关键词：胶质瘤细胞生长
- 文献传递
