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张应国: 作品数：60 被引量：164H指数：7; 供职机构：云南省动物疫病预防控制中心更多>>; 发文基金：云南省中青年学术和技术带头人后备人才项目云南省科技攻关计划公益性行业(农业)科研专项更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生更多>>

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2013年云南省禽流感病毒H9N2亚型监测及其血凝素基因序列分析被引量：4: 2015年; 为了解H9N2亚型禽流感病毒（AⅣ）的变异情况,本研究对2013年云南省16个地区的3 622份家禽临床样品进行AⅣ的鸡胚分离和RT-PCR检测,其中分离鉴定到97份H9N2亚型AⅣ分离株,并选取21个分离株进行HA基因测序及系统进化分析,结果表明：21份H9N2亚型AⅣ分离株的HA基因核苷酸序列同源性为86.0 ％～99.4％,均属于欧亚分支的类A/Chicken/BeiJing/1/1994亚分支,而且又进一步划分为Ⅲ-1、Ⅲ-2两个小分支.其中Ⅲ-2分支为云南地区新出现的进化分支.氨基酸比对分析显示,测序的21个HA基因编码蛋白的裂解位点基序均具有低致病性病毒分子特征;与现用疫苗株相比,HA推导氨基酸序列中存在多个氨基酸位点差异;其中,Ⅲ-1与Ⅲ-2分支的AⅣ的HA氨基酸序列多个位点存在各自特有的点突变（氨基酸替换）,这种变异具有一定的进化（亚）分支特异性.此外,HA基因多个受体结合位点氨基酸存在变异,其中234位氨基酸全部变为L,呈现了人流感受体结合特性;部分糖基化位点、抗原表位关键性氨基酸也存在变异.; 胡媛媛张文东宋建领刘庆亮曾伟王锐郑锦玲彭洁保志鹏张应国范泉水赵焕云张富强; 关键词：禽流感监测 H9N2亚型血凝素

云南省狂犬病病原监测及病毒遗传多样性分析被引量：3: 2013年; 目的阐明2006～2011年期间云南省狂犬病病原分布状况和病毒基因结构特征。方法 2006～2011年期间,在云南省不同地点采集疑似狂犬病犬脑组织样品或唾液拭子样品,开展狂犬病病原监测;选择代表性阳性样品,对G基因、G-L间隔区进行克隆、测序,并与参考毒株序列进行比对及系统发育分析。结果云南省11个地州30个县检出狂犬病病毒阳性样品,云南省狂犬病病毒均属于血清Ⅰ型和基因Ⅰ型毒株,至少存在4个不同遗传(亚)谱系(ChinaⅠ-1、ChinaⅠ-2、ChinaⅠ-3、Thailand)、7种基因结构类型。结论云南省狂犬病病毒G基因和G-L间隔区具有遗传多样性,ChinaⅠ-1毒株已成为当前流行的优势毒株。; 杜传海张文东胡挺松赵焕云张应国范泉水张富强刘勇; 关键词：狂犬病病毒糖蛋白

云南边境地区禽流感H5N1亚型病毒NS基因进化分析被引量：1: 2013年; 目的阐明云南边境地区禽流感H5N1亚型病毒NS1、NS2基因变异特征及遗传进化关系。方法在云南边境地区采集境外家禽和野生鸟类棉拭子样品，经H5N1亚型特异性多重RT-PCR检测，阳性样品对病毒NS基因进行扩增，克隆至pMD18-T载体测序，获得NS1、NS2基因序列，并与已知参考毒株序列进行序列比对及系统发育分析。结果自1240份样品中检出H5N1亚型阳性样品71份，阳性率为5．72％；30份代表性阳性样品病毒NS基因测序获得17种序列，存在3个不同进化（亚）分支（Ⅰ-1、Ⅰ-2、Ⅱ）；NS1／NS2基因与病毒血凝素（HA）基因呈现不同进化关系；NS1蛋白涉及核定位信号区、RNA结合区、效应区及其他致病性相关的关键性氨基酸位点存在替代或突变。结论云南边境地区H5N1亚型病毒NS1／NS2基因具有遗传差异，2010年以来NS基因进化分支Ⅰ-2、Ⅱ已成为当地流行的优势毒株。; 肖雪张文东段博芳赵焕云刘庆亮胡挺松邱薇冯子良郑颖范泉水张应国张富强; 关键词：禽流感病毒 H5N1亚型

牛奇异变形杆菌的分离鉴定及16SrRNA基因系统发育分析被引量：8: 2018年; 目的:对发病断奶犊牛分离到的1株致病菌(KMD3)进行鉴定及16Sr RNA基因系统发育分析。方法:对分离菌株进行革兰氏染色、培养特性观察、生化试验、动物试验、药物敏感性试验及16S r RNA序列分析并构建系统发育树。结果:该菌形态、菌落形态、生化鉴定结果与奇异变形杆菌(Proteus mirabilis,PM)一致;接种小白鼠表现出较强的致病性;对氨基糖苷类抗生素等高度敏感,而对β内酰胺类大部抗生素和磺胺类抗生素耐药;分离株16S r RNA基因序列在Gen Bank进行Blast比对,与公布的序列同源高达99.0%,系统发育树中KMD3与13个代表菌株均属同一分支,且与鼠源(HQ169118.1)、牛源(JQ975907.1)、山羊源(KP401767.1)同源性达100%。结论:此次分离菌株KMD3是奇异变形杆菌,具有较强的致病性和耐药性,该菌是造成此次断奶犊牛发病的主要原因。; 曾邦权段博芳郑欢莉张应国周建国赵焕云岳亮戴玲玲张文东; 关键词：RRNA 系统发育分析

2013年云南省禽流感H9N2亚型病毒神经氨酸酶基因序列分析被引量：1: 2015年; 目的了解2013年云南省禽流感H9N2亚型病毒NA基因变异及进化特征。方法对2013年云南省禽流感H9N2监测阳性样品进行NA基因克隆、测序及系统发育分析。结果 2013年云南省禽流感H9N2亚型病毒株NA基因核苷酸序列同源性为84.5%-99.5%,属于欧亚分支的类ADKHKY28097分支和类ACKHKG997分支。类ADKHKY28097分支为目前云南优势分支,且又进一步划分为Ⅰ-1、Ⅰ-2小分支。氨基酸比对分析表明,2013年云南毒株NA蛋白402位糖基化位点存在显著变化,161位新增了一个糖基化位点;唾液酸结合位点、抗原位点存在显著变异;酶活性位点稳定。除上述关键性氨基酸位点外,其余位点与现用疫苗株、参考毒株相比存在显著差异;且Ⅰ-1、Ⅰ-2、Ⅱ分支毒株多个位点存在各自特有的氨基酸替代,这种替代具有一定的进化（亚）分支特异性。结论 2013年云南省H9N2亚型禽流感病毒间具有遗传差异,类ADKHKY28097分支已成为当地流行的优势毒株,NA蛋白存在特异性氨基酸变异位点。; 胡媛媛张文东宋建领张应国赵焕云张富强; 关键词：禽流感病毒 H9N2亚型神经氨酸酶

一种快速检测口蹄疫疫苗中培养基质BHK-21细胞残留的方法: 本发明涉及一种快速检测口蹄疫疫苗中培养基质BHK-21细胞残留的方法，属于生物技术领域。该方法是利用破乳剂对口蹄疫疫苗进行破乳，然后提取疫苗残留的总RNA，使用荧光定量RT-PCR的方法检测残留细胞的Cytb基因，同时使...; 周建国毕峻龙尹革芬段博芳张应国杨贵树

口蹄疫、猪瘟和高致病性猪蓝耳病三种疫苗同步两点免疫新技术研究与应用被引量：8: 2016年; 本研究采用猪口蹄疫（FMD）灭活疫苗和合成肽疫苗、猪瘟（CSF）脾淋活疫苗和高致病性猪蓝耳病（HPPRRS）活疫苗同步两点免疫技术,对被免疫猪只分别进行了小组试验、免疫持续期观察等试验研究,并用ELISA方法定期对各阶段血清抗体进行检测,旨在探索一种适合基层应用的FMD、CSF、HPPRRS三种疫苗同步分点注射免疫技术,提高免疫密度和免疫效果,降低基层防疫人员劳动强度,提高工作效率,破解基层强制免疫工作难题。本研究得出下列结论：（1）建立了口蹄疫、猪瘟和高致病性猪蓝耳病三种疫苗同步两点免疫技术方法并证明了其临床应用的可行性与科学性。（2）口蹄疫、猪瘟和高致病性猪蓝耳病三种疫苗同步两点免疫证明了三种疫苗同步分点免疫相互间未出现免疫干扰现象。同时,对应用三种疫苗同步两点免疫技术中各病种免疫效果的同步评估需在免疫后35-40d期间进行监测为佳。（3）三种疫苗同步两点免疫技术列入云南省2013年重大动物疫病免疫方案,在全省范围内推广应用至今。本研究证明了三种疫苗同步分点注射的可行性和科学性,并将三种疫苗同步两点免疫技术大面积应用于免疫工作,解决了困扰基层临床免疫的难点问题,为其临床应用提供了科学依据和数据支持,在生产实际的临床应用中具有重要意义。; 周建国张应国段博芳杨余山罗曼榕濮永华匡继才刘绍阳彭正啟黄杰; 关键词：口蹄疫猪瘟蓝耳病疫苗

禽流感病毒型及亚型特异性免疫酶染色技术的研究: 2008年; 在获得禽流感病毒型及亚型特异性单克隆抗体的基础上,研究建立型及亚型特异性免疫酶染色技术,用于检测或鉴定禽流感病毒.优化反应条件,确定单克隆抗体及辣根过氧化物酶标记二抗的最佳工作浓度,进行敏感性、特异性、重复性及稳定性分析,并与病毒分离鉴定比较.结果表明该方法敏感、特异,具有良好的重复性和稳定性,可用于检测临床组织样品、鸡胚及细胞培养物中的禽流感病毒.; 金卫华宋建领张文东赵毅王金萍李作生冯子良胡媛媛郭松辉张应国范泉水宋学林邱薇张富强; 关键词：禽流感病毒免疫酶染色

云南地区2006～2009年狂犬病毒分离株P和M基因分子进化分析: 2010年; 2006-2009年自云南曲靖（YNQJ07、YNQJ08）、昭通（YNZT07、YNZT09）、楚雄（YNMD06）、保山（YNTC06）、红河（YNHH09）、怒江（YNNJ08）分离获得8株狂犬病毒,对其P和M基因进行克隆、测序,并与已知国内外代表毒株进行比对及系统发育分析。结果：云南狂犬病毒P基因核苷酸与氨基酸序列同源性分别为84.8%-99.4%和90.6%-99.3%;M基因核苷酸与氨基酸序列同源性分别为88.7%-99.5%和94.3%-100%;它们均属于基因Ⅰ型毒株,存在2个进化亚组群（Ⅰ、Ⅲ）;YNTC06与泰国和YN0601H、YN0701H毒株遗传关系密切,属于亚组群Ⅲ毒株;其余地州分离毒株均属于亚组群Ⅰ毒株,进一步可划分为2个不同进化亚分支,YNMD06属于分支Ⅰ,与近年江苏、安徽毒株遗传关系密切;分支Ⅱ包括YNQJ07、YNZT07、YNQJ08、YNNJ08、YNZT09、YNHH09,与湖南、贵州毒株遗传关系密切。亚组群Ⅰ毒株已成为当前我国狂犬病流行的优势毒株,亚组群Ⅰ的第Ⅱ分支毒株在云南省广泛分布。; 程万明张文东赵焕云张应国张念祖范泉水苑述友张富强; 关键词：狂犬病毒 M基因 P基因

2013年云南省H9N2亚型禽流感病毒两个进化分支毒株抗原性变异分析被引量：1: 2016年; 为明确2013年云南省H9N2亚型禽流感病毒Ⅲ-1和Ⅲ-2小分支间是否存在抗原性差异,以及这种抗原性差异是否与氨基酸位点变异有关,从2个小分支中选取7个毒株与疫苗株进行系统发育分析和血清学交叉比对试验。结果表明,2个小分支HA基因核苷酸序列同源性为86.6%~98.4%,与2000年前疫苗株亲缘关系较远,Ⅲ-1分支与2000年后疫苗株（ACKLGQ113和ACKDL2010）亲缘关系较近。血清学交叉比对试验结果经统计学分析显示,Ⅲ-1和Ⅲ-2小分支间抗原性存在差别。氨基酸比对结果表明,不同进化亚分支毒株与疫苗株相比氨基酸存在变异;与已报道的抗原表位关键性位点相比,Ⅲ-1分支中部分毒株抗原表位关键性位点存在变异,Ⅲ-2分支毒株无变异,但在其他8个氨基酸位点存在特有变异,是否存在未知抗原表位关键性位点,以及其他氨基酸位点变异是否会辅助性影响抗原变异,还有待进一步研究。; 石凤海胡媛媛张文东孔强张应国范泉水赵焕云张富强; 关键词：禽流感病毒 H9N2亚型

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