张文龙
- 作品数：4 被引量：8H指数：2
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家临床重点专科建设项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- TNF-α促进HepG2肝细胞脂质积聚及其机制的初步研究被引量：2
- 2013年
- 目的探讨肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)是否能够促进肝细胞脂质积聚,并对其机制进行初步探讨。方法将HepG2肝细胞分为空白对照组、单纯TNF-α组(TNF-α2ng/mL或20ng/mL)、软脂酸组(软脂酸0.08mmol/L或0.2mmol/L)及联合组(TNF-α2ng/mL联合软脂酸0.08mmol/L、TNF-α2ng/mL联合软脂酸0.2mmol/L、TNF-α20ng/mL联合软脂酸0.08mmol/L、TNF-α20ng/mL联合软脂酸0.2mmol/L),处理24h,应用化学酶促-比色法定量检测细胞内TG含量。进一步选取TNF-α20ng/mL和软脂酸0.08mmol/L,通过油红O染色观察HepG2细胞内脂质积聚情况;实时荧光定量PCR和Western blot检测HepG2细胞SREBP-1、FAS、ACCα的表达水平。结果①单纯TNF-α组TG含量[TNF-α2ng/mL组(0.344±0.093)μg/μg、TNF-α20ng/mL组(0.329±0.068)μg/μg]分别较空白对照组[(0.192±0.048)μg/μg]显著升高(P<0.05);联合组[TNF-α2ng/mL联合软脂酸0.08mmol/L组(0.451±0.096)μg/μg、TNF-α2ng/mL联合软脂酸0.2mmol/L组(0.821±0.257)μg/μg、TNF-α20ng/mL联合软脂酸0.08mmol/L组(1.032±0.286)μg/μg、TNF-α20ng/mL联合软脂酸0.2mmol/L组(2.134±1.049)μg/μg]分别较软脂酸组[软脂酸0.08mmol/L组(0.247±0.069)μg/μg、软脂酸0.2mmol/L组(0.341±0.031)μg/μg]显著升高(P<0.05);②油红O染色进一步显示,TNF-α促进肝细胞内脂质积聚。③实时荧光定量PCR和Western blot检测结果显示单纯TNF-α组与空白对照组相比,HepG2细胞SREBP-1、FAS、ACCα的表达均增加(P<0.05);联合组与软脂酸组相比,肝细胞内SREBP-1、FAS、ACCα的表达水平明显上调(P<0.05)。结论TNF-α促进HepG2肝细胞内脂质积聚,增加SREBP-1、FAS、ACCα的表达。
- 陈书梅杨淑敏张文龙吕琼叶鹏高茹菲梅玫汪志红李启富
- 关键词：TNF-Α软脂酸SREBP-1
- 慢性炎症诱导的肝脏脂质沉积小鼠模型中抵抗素表达的变化被引量：1
- 2013年
- 目的:探讨慢性低度炎症诱导肝脏脂质沉积过程中抵抗素表达和分泌的变化。方法:采用酪蛋白皮下注射18周建立慢性炎症小鼠模型,油红O染色及甘油三酯定量检测肝脏脂质沉积情况,酶联免疫及液态芯片法检测血清炎症因子、抵抗素、游离脂肪酸水平,同时荧光定量PCR检测肝脏、脂肪组织抵抗素和肝脏脂代谢相关基因的表达。结果:成功构建小鼠慢性低度炎症模型,并观察到炎症小鼠血清游离脂肪酸水平增加(P=0.012、P=0.125),胰岛素敏感性降低(P<0.05),肝脏表现为明显的脂代谢紊乱及脂质沉积增加(P<0.05),脂肪组织脂滴变小。同时,炎症小鼠血清抵抗素水平增加(P=0.008、P=0.001),肝脏及脂肪组织抵抗素mRNA表达增加(P<0.05)。结论:慢性炎症诱导的肝脏脂质沉积的小鼠模型中,血清抵抗素水平升高,肝脏及脂肪组织抵抗素mRNA表达增加,提示抵抗素可能在炎症引起的肝脏脂质沉积过程中发挥重要作用。
- 叶鹏杨淑敏吕琼陈书梅张文龙程庆丰梅玫罗婷刘露路高茹菲李启富
- 关键词：抵抗素炎症脂质沉积胰岛素抵抗
- 重庆地区汉族人群多囊卵巢综合征与葡萄糖激酶调节蛋白基因多态性的相关性研究被引量：1
- 2014年
- 目的：探讨重庆地区汉族人群葡萄糖激酶调节蛋白（glucokinase regulatory protein,GCKR）基因位点单核苷酸多态性（single lenuclear polymorphisms,SNPs）与多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome,PCOS）及其相关代谢指标的关系。方法：纳入PCOS患者147例,正常对照156例;应用Taqman探针法对研究对象GCKR基因多态性位点rs3817488及rs780094进行基因分型;PCOS组及20例对照人群的胰岛素敏感性用高胰岛素-正葡萄糖钳夹方法评估。结果：PCOS患者GCKR基因位点rs3817588的基因型及等位基因分布频率与正常对照相比无统计学差异（OR=0.929,95%CI=0.541-1.594,χ^2=0.72,P=0.79;OR=0.995,95%CI=0.759-1.304,χ^2=0.00,P=0.97）,同时rs780094位点的基因型及等位基因分布频率与正常对照相比也无统计学差异（OR=1.427,95%CI=0.974-1.598,χ^2=2.74,P=0.10;OR=0.880,95%CI=0.700-1.107,χ^2=1.20,P=0.27）。结论：重庆地区汉族人群GCKR基因位点rs3817588与rs780094的单核苷酸多态性可能与PCOS的发生及相关代谢指标无明显相关性。
- 张文龙李启富杨淑敏高茹菲赵长虹王越
- 关键词：基因多态性多囊卵巢综合征
- miR1934,一种脂联素特异性调控的靶microRNA,在肥胖小鼠的脂肪组织中表达降低被引量：4
- 2015年
- 目的:脂联素(Adiponectin,Ap N)是脂肪细胞分泌的最主要抗炎细胞因子。利用Ap N过表达(Ap N-Over)和Ap N基因敲除(Ap N-KO)小鼠模型筛选出Ap N的靶micro RNAs(mi RNAs),以探寻脂肪组织新的具抗炎作用的功能性mi RNAs。方法:给予4周龄雄性Ap N-Over小鼠和其野生型对照小鼠高脂饮食6周后,分离提取腹股沟脂肪组织。采用mi RNA微陈列芯片筛选出两组小鼠脂肪组织间表达有差异的mi RNAs;在Ap N-Over,Ap N-KO和高脂(HFD)诱发的肥胖小鼠脂肪组织中用定量PCR验证上述筛选出的差异mi RNAs;采用生物信息学数据库预测mi RNAs的靶基因。结果:Ap N-Over小鼠脂肪组织中有12个mi RNAs的表达与野生对照小鼠显著不同;定量PCR验证结果显示有3个mi RNAs确实受到Ap N的调节:mi R532-5p的表达被Ap N下调,而mi R883b-5p和mi R1934的表达被上调;其中仅有mi R1934在Ap N-KO小鼠的脂肪组织中明显下降,与Ap NOver小鼠脂肪组织呈现相反的表达模式;mi R1934在HFD诱发的肥胖小鼠的内脏脂肪组织中的表达明显低于普通饮食喂养的小鼠(1.00±0.22 vs.0.54±0.13,P=0.04)。生物信息数据库预测出mi R1934有53个靶基因,其中2个靶基因为丝氨酸/苏氨酸激酶3(serine/threonine kinase 3,STK3)和趋化因子(C-C motif)配体[chemokine(C-C motif)ligand,CCL19],二者均为参与JNK信号通路的分子。结论:mi R1934是体内脂肪组织中受脂联素特异性调节的mi RNA。肥胖小鼠内脏脂肪组织中mi R1934的表达显著降低;生物信息学分析初步发现mi R1934可能参与调节JNK信号通路。因此脂联素特异性的靶mi R1934有可能为改善脂肪组织炎症及其相关的代谢异常提供新的治疗前景。
- 葛倩张文龙刘露路李启富
- 关键词：肥胖脂联素微小RNA脂肪细胞因子
