张玉玲
- 作品数：6 被引量：37H指数：4
- 供职机构：中国中医科学院广安门医院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Cocktail探针药物法评价小檗碱对肝微粒体CYP450酶的抑制作用被引量：11
- 2013年
- 目的:研究小檗碱对人肝微粒体CYP活性的影响。方法:以苯海拉明为内标,建立LC-MS/MS同时测定5种探针药物:咪达唑仑、非那西丁、右美沙芬、甲苯磺丁脲和氯唑沙宗的含量,采用鸡尾酒(cocktail)法探针药物法评价不同浓度小檗碱对混合人肝微粒体CYP不同亚型活性的影响。结果:与对照组相比,咪达唑仑、非那西丁和甲苯磺丁脲的代谢速率基本没有变化,而氯唑沙宗的代谢速率明显变慢,对于右美沙芬,当小檗碱的质量浓度为50μg.L-1时,其代谢速率基本没有变化,当小檗碱的质量浓度大于200μg.L-1时,其代谢速率明显变慢。结论:小檗碱质量浓度在2000μg.L-1以下时对人肝微粒体中CYP3A4,CYP1A2和CYP2C9活性没有明显影响,但对CYP2E1和CYP2D6有明显的浓度依赖性抑制作用。
- 陈健龙张玉玲董宇贡济宇崔翰明
- 关键词：探针药物小檗碱
- LC-MS/MS同时测定大鼠血浆中4种黄连生物碱的含量被引量：4
- 2013年
- 目的:建立LC-MS/MS同时测定大鼠血浆中黄连碱、药根碱、巴马汀和小檗碱含量的方法。方法:采用ACQUITYUPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm),流动相乙腈-水(含2 mmoL乙酸铵和0.05%甲酸),流速0.3 mL.min-1,柱温30℃,以士的宁为内标,血浆样品用4倍量乙腈萃取并沉淀蛋白,用电喷雾离子化(ESI)和正离子多离子反应监测(MRM)模式检测,选择离子对为药根碱m/z 338.227→m/z 322.824;黄连碱m/z 320.244→m/z 291.996;巴马汀:m/z 352.243→m/z308.016;小檗碱:m/z 336.227→m/z 277.981;士的宁:m/z 335.264→m/z 184.017。结果:药根碱、黄连碱、巴马汀和小檗碱的线性范围分别为1.01～505,1.06～530,1.13～565,1.07～535μg.L-1;定量下限分别为0.539 2,0.646 3,0.761 5,0.197 1μg.L-1;平均回收率分别为103.90%,101.50%,101.58%,115.54%;日内和日间精密度、稳定性的RSD均<10%。结论:建立的方法准确、灵敏、特异、简便,适用于大鼠血浆中黄连碱、药根碱、巴马汀和小檗碱的同时测定及药动学研究。
- 陈健龙张玉玲董宇蔡广知王虎贡济宇崔翰明
- 关键词：LC-MS药根碱黄连碱血浆浓度
- UPLC法同时测定黄连与代综方中4种生物碱的含量被引量：3
- 2013年
- 目的:建立同时测定黄连与代综方中药根碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱4种原小檗碱型生物碱含量的方法。方法:采用超高效液相色谱法。色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C18(100mm×2.1mm,1.7μm),流动相为乙腈-水(含2mmol乙酸铵和0.05%甲酸,30∶70,V/V,pH3.20),流速为0.3ml/min,柱温为30℃,检测波长为345nm。结果:盐酸药根碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱的质量浓度分别在21.76～1088.05、20.88～1044.00、17.68～884.05、18.32～916.10ng/ml范围内与各自峰面积积分值呈良好的线性关系(r均为0.9999)。精密度、稳定性、重复性试验结果的RSD均<5%。平均加样回收率结果:(1)黄连:盐酸药根碱为101.56%,RSD=2.16%(n=6);盐酸黄连碱为100.21%,RSD=3.32%(n=6);盐酸巴马汀为97.60%,RSD=1.96%(n=6);盐酸小檗碱为98.81%,RSD=1.48%(n=6)。(2)代综方:盐酸药根碱为98.87%,RSD=2.41%(n=6);盐酸黄连碱为99.12%,RSD=2.68%(n=6);盐酸巴马汀为98.98%,RSD=2.23%(n=6);盐酸小檗碱为98.55%,RSD=2.82%(n=6)。最低检出限和最低定量限:盐酸药根碱分别为4.50、14.99ng/ml,盐酸黄连碱分别为5.10、17.00ng/ml,盐酸巴马汀分别为4.81、16.04ng/ml,盐酸小檗碱分别为4.64、15.47ng/ml。结论:该方法简便、灵敏、准确、高效,可用于黄连及其复方制剂的质量控制。
- 陈健龙张玉玲肖胜利崔翰明贡济宇
- 关键词：超高效液相色谱法黄连药根碱黄连碱小檗碱
- 小檗碱在Caco-2细胞单层模型中吸收和外排机制的研究被引量：8
- 2014年
- 目的利用Caco-2细胞单层模型研究小檗碱的双向转运和外排动力学机制。方法超高液相色谱法测定Tran-swell^TM中供给池和接受池中小檗碱的浓度，计算其表观渗透系数（Papp），分析P-糖蛋白外排泵（P-gP）的作用。结果不同浓度小檗碱由肠腔面到基底面（A→B面）的Papp约在（2-3）×10^-6，吸收量与浓度成线性关系，而由基底面到肠腔面（B→A面）的Papp约在（2-3）X10^-5，约是A—B面的8～10倍，给予P→gP抑制剂维拉帕米后B→A面的外排转运明显减低，A→B面的吸收明显增加。结论小檗碱是以被动扩散为主要转运方式被小肠上皮细胞摄取和转运，属吸收中等的药物，且存在P-糖蛋白介导的外排机制。
- 陈健龙张玉玲董宇蔡广知贡济宇崔翰明
- 关键词：小檗碱CACO-2细胞模型外排
- 小檗碱的油水分配系数及其在体肠循环灌流模型中的肠吸收特性被引量：5
- 2013年
- 目的:测定小檗碱和黄连总生物碱中小檗碱的油水分配系数,并研究小檗碱、黄连总生物碱和清热通腑片中小檗碱在大鼠空肠和回肠的吸收特性,同时比较两者的相关性。方法:采用摇瓶法测定小檗碱在正辛醇-水中的表观油水分配系数,采用大鼠在体肠循环灌流模型研究小檗碱的吸收特性,UPLC测定小檗碱质量浓度,计算小檗碱的油水分配系数、肠吸收速度常数(Ka)表观渗透系数(Papp)。结果:小檗碱和黄连总生物碱在肠液/正辛醇中油水分配系数分别为0.213 5,0.175 7。小檗碱在空肠中Ka=0.046 6,Papp=4.88×10-6cm.s-1,回肠中Ka=0.034 9,Papp=4.13×10-6cm.s-1;黄连总生物碱在空肠中Ka=0.035 1,Papp=3.92×10-6cm.s-1,回肠中Ka=0.026 6,Papp=3.21×10-6cm.s-1;清热通腑片在空肠中Ka=0.028 3,Papp=3.11×10-6cm.s-1,回肠中Ka=0.018 1,Papp=2.23×10-6cm.s-1。结论:小檗碱在空肠和回肠中均有吸收,且吸收速率较慢,但空肠吸收速率大于回肠,具有显著性差异;小檗碱的吸收快慢为小檗碱对照品>黄连生物碱物>清热通腑片,小檗碱油水分配系数的预测结果与肠吸收结果基本一致。
- 张玉玲陈健龙王虑虎孙丽玲张诗航李超英崔翰明
- 关键词：小檗碱油水分配系数UPLC肠吸收
- 小檗碱的酶反应动力学及其代谢酶表型和代谢产物研究被引量：7
- 2013年
- 目的采用混合人肝微粒体和重组人源细胞色素酶P450(CYP)同工酶,研究小檗碱的代谢特性,明确参与小檗碱代谢的CYP酶亚型及其贡献度,并确证相关代谢产物的结构。方法将混合人肝微粒体分别与20、100、200、400、600、800、1 200 ng/mL的小檗碱共同孵育后,计算小檗碱酶反应动力学米氏常数(Km)、最大反应速率(Vmax)、体外肝微粒体对药物的固有清除率(CLint);采用CYP酶的特异性抑制剂研究小檗碱的代谢表型;将重组人源CYP同工酶CYP3A4、CYP1A2、CYP2D6、CYP2C9与一定质量浓度的小檗碱孵育,UPLC法测定孵育液中原形药物的剩余量和代谢产物的生成量;整体归一化法计算各酶的代谢贡献度;LC-MS/MS法鉴定相关代谢产物。结果小檗碱在混合人肝微粒体中的Vmax为1.51nmol·mg-1·h-1;Km为2.69 nmol/mL;CLint为0.56 mL·mg-1·h-1。CYP2D6的特异性抑制剂奎尼丁和CYP1A2的特异性抑制剂呋喃茶碱对小檗碱的代谢有显著抑制作用,其他CYP酶抑制剂对小檗碱的代谢无显著影响。CYP2D6、CYP1A2对小檗碱代谢产物M1(去亚甲基小檗碱)的贡献度分别为75.253 9%、23.323 6%;对M2产物(唐松草分定或小檗红碱)的贡献度分别为46.893 8%、8.679 5%。小檗碱在体外混合人肝微粒体温孵体系中的主要代谢途径为O-去甲基化,可生成去亚甲基小檗碱和唐松草分定或小檗红碱。结论小檗碱在肝脏中主要被CYP2D6和CYP1A2代谢,分别生成去亚甲基小檗碱、唐松草分定或小檗红碱。
- 陈健龙张玉玲董宇张蕾刘丹杨建龙蔡广知贡济宇崔翰明
- 关键词：小檗碱
