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氯霉素单克隆抗体ELISA检测方法的建立被引量：2: 2007年; 目的建立CAP间接和直接ELISA检测方法。方法用重氮化法分别偶联氯霉素(Chloramphenicol,CAP)与BSA和OVA作为免疫原和检测原,腹腔注射8周健康雌BALB/c小鼠大量制备抗CAP的单克隆抗体并优化条件,建立了CAP的快速、灵敏、简便的直接和间接竞争ELISA方法。结果两种检测方法的回归方程和相关系数分别为:y=-25.411x+97.041,R2=0.9889和y=-27.768x+103.91,R2=0.9889,线性范围分别为1.87-75 ng/mL和0.93-25ng/mL,对CAP的最低检出浓度为0.97 ng/mL和0.35 ng/mL。并利用所建立的两种ELISA方法对鸡肉模拟样品进行了检测,其检测样品的回收率分别为98.607%,85.152%。结论为下步CAP的试纸条或试剂盒建立提供基础。; 王颖张磊饶星李月婷柳增善; 关键词：氯霉素 CIELISA

抗CD_3单克隆抗体激活杀伤细胞高效扩增培养体系的建立及细胞毒活性检测被引量：1: 2007年; 目的：建立从20mL外周血中高效扩增抗CD3单克隆抗体激活的杀伤细胞（CD3AK）的培养体系,并进行体外细胞毒活性检测。方法：采用抗CD3单克隆抗体（Anti-CD3mAb）激活人外周血单个核细胞（PBMC）,在人重组白细胞介素2（rIL-2）的协同活化下,获得CD3AK。对CD3AK进行长期体外培养,进行增殖动力学、免疫表型和体外抗肿瘤活性的分析。结果：在培养第7-22天,CD3AK增殖倍数明显提高,最高可达317倍;免疫表型分析显示,CD3^＋细胞从活化前的51.9%增加至94.6%,CD4^＋细胞从19.5%增加至51.1%,CD8^＋细胞从22.1%增加至52.1%;效靶比20∶1组和40∶1组的杀伤肿瘤细胞活性明显高于10∶1组（P〈0.05和P〈0.01）;在7-19 d的培养天数之内,杀伤肿瘤细胞活性最强。结论：从外周血中高效扩增的CD3AK是以CD3^＋、CD4^＋和CD8^＋细胞为主的异质性细胞群,在体外有明显的杀伤肿瘤细胞活性。; 张赢予张馨木王建秋张磊焦平王丁丁王文加马杰颜炜群; 关键词：杀伤细胞淋巴因子激活细胞培养抗肿瘤活性

抗CD3单克隆抗体和rIL-2协同活化PBMC抗肿瘤的体外实验研究: 目的:对抗CD单克隆抗体激活的杀伤细胞(CDAK)的体外抗肿瘤活性进行观察。方法:采用抗CD单克隆抗体(CDMcAb)激活人外周血单个核细胞(PBMC),在重组白介素2(rIL-2)的协同活化下,获得CDAK。对CDAK...; 张赢予张馨木张磊; 关键词：杀瘤活性; 文献传递

抗河豚毒素单链抗体基因的构建、表达及活性分析: 2009年; 目的:构建抗河豚毒素(TTX)单链抗体表达载体并进行活性分析。方法:提取抗TTX单克隆抗体3D4杂交瘤细胞总RNA,根据鼠源单克隆抗体设计轻、重链可变区基因VL和VH引物并进行RT-PCR扩增,借助Linker(G1y4Ser)3连接成单链抗体TTX-ScFv(VH-Linker-VL)基因,克隆至表达载体pET-22b(+)后转入E.coliBL21(DE3)诱导表达,SDS-PAGE鉴定表达产物,ELISA检测表达蛋白的反应活性。结果:测序结果表明TTX-ScFv基因全长744 bp,经NCBI blast分析氨基酸序列符合鼠抗体可变区特征,其中VH366 bp,VL333 bp,Linker 45 bp,SDS-PAGE与薄层扫描分析显示表达产物相对分子量为26.045ku,表达蛋白以包涵体形式存在,表达量占菌体总量的42%;ELISA检测表明TTX-ScFv可与TTX特异结合。结论:成功构建了抗TTX单链抗体表达载体,表达产物具有一定的免疫学结合活性。; 孟宪梅周玉卢士英李岩松张俊辉李研东张磊柳增善; 关键词：河豚毒素单链抗体活性

西加毒素的研究概况被引量：6: 2009年; 西加毒素是由剧毒纲比甲藻产生,是一种毒性极强的珊瑚鱼毒素,通过食物链传递而蓄积于各种珊瑚鱼体内。西加毒素与钠通道受体靶部位VI结合,激活钠通道,增加钠离子通透性。人类误食了含有西加毒素的珊瑚鱼即引起中毒。近几年,随着珊瑚鱼大量的出口,西加毒素中毒已经成为世界性的健康问题。西加毒素中毒可造成胃肠功能紊乱、心血管功能障碍、持续长时间的神经感觉异常,并且以温度感觉倒错最具特征性。西加毒素轻度中毒病例可出现暂时性近视及眼痛症状,饮酒可加重病情。曾经西加毒素中毒的人再次中毒的机会较大,症状会更严重。由于目前对含西加毒素的鱼类缺乏一种简便、准确的检测手段,使得西加毒素中毒事件时有发生。为避免中毒,建议勿食用重1.5 kg以上的珊瑚鱼,特别是其头和内脏。通过对西加毒素的来源和转移,积累西加毒素的鱼类,西加毒素中毒的分布情况、中毒的机理、对人类的危害,西加毒素的制备方法及检测方法的概述,为有关研究提供参考。; 李春媛周玉张磊沈庆丰; 关键词：中毒公共卫生

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张磊