张蓉颖 作品数:18 被引量:206 H指数:3 供职机构: 华中科技大学生命科学与技术学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 全球变化研究国家重大科学研究计划 湖北省自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 理学 医药卫生 电子电信 更多>>
线虫基因显微注射和整合技术——设备、操作与指南 被引量:2 2009年 秀丽线虫(Caenorhabditis elegans)是研究动物遗传、个体发育和行为活动的重要模式生物,其主要优点是能够研究从分子细胞水平到整体系统水平的相关生命活动的作用机理.其中基因显微注射和整合是该领域的核心技术,广泛应用于研究线虫的基因表达、功能和基因间的相互作用等.显微注射技术使用尖端开口直径为微米级的玻璃微管,将所研究的目的DNA注射进线虫的性腺.注射的DNA被成熟的卵细胞吸收,以染色体外遗传物质的形式存在.但这种形式并不能稳定遗传,可采用基因整合技术将外源基因整合到染色体上,得到稳定遗传的线虫种系.显微注射是一项精细的实验技术,影响实验成功与否的因素较多,实际操作需要有一定的经验.在实践过程中逐步改进和完善了这项技术,在此主要介绍线虫显微注射技术的操作过程、创新方法以及注意细节. 酒亚明 张蓉颖 吴政星关键词:秀丽线虫 基因整合 秀丽线虫基因敲除突变库中sec-10突变种系的筛选 2010年 从秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)的基因突变库中筛选出目的基因的突变种系,并对其进行分子机制的研究,是研究不同基因及其蛋白产物作用机制的一项基本技术.以sec-10突变种系的成功筛选为例,详细描述如何通过PCR检测方法从笔者实验室所构建的国内第一个秀丽线虫基因敲除突变库(可进行多达几百次的筛选量)中筛选出目的基因的突变种系,同时证明突变库的可用性.根据sec-10基因序列设计多套针对不同靶点的含干扰引物的巢式引物,通过凝胶电泳正确判断扩增产物的特异性和干扰引物对长片段产物的抑制特性,以选择有效的检测引物.简化了线虫复苏后的饲养方法,以取代恒温恒湿培养箱的使用.通过纯和致死平衡子的引入,克服了sec-10基因突变致死所导致的无法稳定传代的问题.总结了从秀丽线虫基因突变库中筛选突变种系的注意要点,为国内其它线虫基因突变库的筛选提供重要的参考意见. 李江丽 张蓉颖关键词:秀丽隐杆线虫 基因敲除 PCR检测 DNA单分子层的制备及其STM与电化学定量 张蓉颖 庞代文 蔡汝秀 颜佳伟 毛秉伟关键词:寡聚核苷酸 单分子层 STM 表面化学 文献传递 抗癌药物的电化学研究(Ⅱ)道诺霉素在DNA修饰石墨粉末微电极上的电化学行为及分析应用 被引量:25 2002年 研究了道诺霉素 ( DNM)在石墨粉末微电极和 DNA修饰石墨粉末微电极上的电化学行为 ,并分析了产生差别的原因。在此基础上 ,提出了测定微量 DNM的方法 ,DNM浓度在 1 .0× 1 0 - 7~ 1 .0× 1 0 - 5mol/L之间其微分脉冲伏安 ( DPV)峰电流与浓度有良好的线性关系 ,检出限为 5 .0× 1 0 - 8mol/L。采用标准加入法测定了模拟样品中的 DNM,回收率在 94%~ 1 0 8%之间 。 罗济文 张敏 张蓉颖 庞代文关键词:抗癌药物 道诺霉素 标准加入法 AIY神经元对线虫化学趋向性的调控 2009年 AIY神经元作为线虫重要的中间神经元,一般认为在线虫的温度感受中发挥功能.分别进行的苯甲醛和硫酸铜的趋向性实验显示,AIY在线虫对于这两种化学物质的感受过程中起作用,而且对于硫酸铜的感受行使抑制功能.苯甲醛和硫酸铜的抉择实验显示,AIY在线虫中能够对这两种物质引起的信号进行整合,在ttx-3突变体中AIY神经元仍然可以行使整合的功能.但是无法判断该整合的功能是否完全无缺陷. 章雷 孟令峰 张蓉颖关键词:线虫 Rab蛋白调控胞内囊泡运输 被引量:2 2012年 细胞内各个细胞器之间通过囊泡的膜转运是真核细胞存在的基本。Rab蛋白确保了转运蛋白被运输至正确的目的地。Rab蛋白是小GTP酶中的一大家族,它通过募集其效应物蛋白,其中包括接头蛋白,栓系因子,激酶,磷酸酶以及动力蛋白等,调控了细胞膜的选取,囊泡出芽,去包被,转运以及膜融合等过程。本文主要从Rab蛋白循环着手,依次论述了Rab蛋白在囊泡出芽,去包被,转运和膜融合等过程中起到的作用,从而使读者对Rab蛋白能有一个更加系统的了解。 冯婉娟 徐子静 孟令锋 张蓉颖关键词:RAB蛋白 囊泡运输 膜融合 纳米电极-膜片钳监测单个活囊泡连续释放 被引量:3 2005年 Carbon fiber nanoelectrode(tip diameter ca. 100 nm)-patch clamp was firstly applied to real-time monitoring dopamine release from single living vesicles of single Rat pheochromocytoma(PC12) cells with highly temporal and spatial resolution. It is first demonstrated that there are continual vesicle releases of dopamine at the same site in the active release zone, which play a main role in the exocytosis. 吴文展 黄卫华 王玮 王宗礼 程介克 张蓉颖 陈宇 刘杰 郑从义 沈超关键词:纳米电极 膜片钳 金电极上DNA的吸附机理及相关应用研究 张蓉颖关键词:脱氧核糖核酸 电化学分析 修饰电极 阿霉素 ESYT-2在致密核心囊泡分泌中起到的作用 2012年 目的:研究秀丽隐杆线虫(简称线虫)中一种扩展的Synaptotagmin同源物ESYT-2在致密核心囊泡分泌过程中起到的作用。方法:以线虫为研究对象,运用线虫腔胞吸收ANF-GFP的基本原理来确定ESYT-2与分泌相关,之后又进一步使用全内反射荧光显微镜技术(TIRFM)来研究ESYT-2对致密核心囊泡的具体调控。结果:①ESYT-2功能缺失影响线虫神经细胞致密核心囊泡分泌。②ESYT-2影响致密核心囊泡分泌的栓系过程。结论:ESYT-2调控了致密核心囊泡的分泌过程。 冯婉娟 刘贝 孟令锋 张立 张蓉颖关键词:致密核心囊泡 线虫 全内反射荧光显微镜 DNA与其靶向分子相互作用研究进展 被引量:173 1999年 DNA与其靶向分子相互作用的研究不仅对阐述一些抗肿瘤、抗病毒药物及致癌物的作用机理 ,而且对进一步指导人工核酸酶的合成及 DNA高级结构研究等方面的工作都具有重要意义 .本文着重评述了近年来不同结构类型的 DNA靶向分子与 DNA相互作用研究方面的进展 . 张蓉颖 庞代文 蔡汝秀关键词:DNA 相互作用 抗生素