张金平
- 作品数：44 被引量：106H指数：7
- 供职机构：河北医科大学更多>>
- 发文基金：河北省自然科学基金河北省科技厅资助项目河北省科学技术研究与发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学轻工技术与工程更多>>
- connexin43基因体外转染大鼠L6骨骼肌成肌细胞的研究被引量：3
- 2008年
- 目的将含有connexin 43基因的质粒在脂质体的介导下转染进入大鼠L6骨骼肌成肌细胞,使用G418根据有限稀释法筛选单克隆细胞株L6myoblast-Cx43。方法通过免疫细胞化学技术、Western blot技术,对整合有connexin43基因的阳性细胞克隆进行检测。结果两个阳性克隆组Cx43蛋白表达均明显高于对照组。结论获得的两个持续高表达connexin43蛋白的细胞株可用于进行移植细胞之间及移植细胞与宿主细胞之间能否形成良好的电偶联的研究。
- 王多张雷邵素霞吕萍张金平崔轶
- 关键词：CONNEXIN43骨骼肌成肌细胞基因表达转染细胞克隆
- 学习训练对谷氨酸单钠所致大鼠海马损伤的神经保护作用被引量：2
- 2006年
- 目的：探讨学习训练对谷氨酸神经毒性的保护作用。方法：在SD大鼠生后第3～9d腹腔注射谷氨酸单钠复制谷氨酸毒性模型，在1月龄和2月龄时训练大鼠学会以明暗辨别来获得食物，3月龄时取脑，在光镜下计数海马内存活神经元数，电镜下观察海马CA1区的超微结构，并计数突触数，测量突触活性带长度。结果：学习训练组海马CA3区和CA4区内的存活神经元数、海马CA1区内的突触数和突触活性带长度均大于非学习组，结论：结果提示学习训练可在一定程度上减轻MSG对海马的损伤。
- 张金平白文忠史玉兰金凤霞
- 关键词：神经保护谷氨酸单钠海马
- 康复训练对脑缺血大鼠突触体素表达的影响被引量：3
- 2009年
- 目的研究康复训练对脑缺血大鼠突触体素表达的影响。方法将80只SD大鼠随机分为脑缺血组、制动组、康复训练组及假手术组。脑缺血组、制动组及康复训练组大鼠均制成脑缺血动物模型，假手术组制模方法同上，但不阻断大脑中动脉血流。假手术组及脑缺血组大鼠于制模结束后均置于普通笼内饲养，制动组大鼠术后则置于网状笼内固定，康复训练组大鼠术后每天给予康复训练，包括滚笼、平衡木、转棒及网屏训练。于实验进行1，7，14及21d时各组分别取5只大鼠检测神经、运动功能以及大脑皮质突触体素表达水平。结果从术后第7天开始，康复训练组大鼠神经及运动功能均明显优于脑缺血组及制动组。假手术组大鼠脑皮质内可见突触体素免疫产物呈点状分布，密度较高；脑缺血组大鼠随缺血时间延长，其脑皮质内突触体素免疫产物逐渐减少，密度降低；制动组大鼠随缺血时间延长，其脑皮质内突触体素免疫产物减少程度更显著；康复训练组随缺血时间延长，其脑皮质内突触体素免疫产物减少幅度逐渐趋缓，明显高于制动组水平。结论脑缺血能显著降低实验大鼠脑皮质突触体素水平，康复训练能明显增强大鼠脑皮质突触体素表达，促进神经突触再生及神经、运动功能恢复。
- 王慧娟李陈莉张金平赵静李莉龚淼张雷
- 关键词：突触体素脑缺血康复训练
- 叔丁基对苯二酚减轻高糖诱导的肾小球系膜细胞氧化应激损伤被引量：7
- 2011年
- 目的研究叔丁基对苯二酚(tert-butylhydroquinone,tBHQ)对高糖培养的小鼠肾小球系膜细胞株(mouse mesang-ial cells,MMCs)核因子NF-E2相关因子(nuclear factor ery-throid 2-related factor 2,Nrf2)表达及氧化应激的影响,探讨tBHQ保护糖尿病肾脏的部分机制。方法 MMCs随机分为4组,正常糖对照组(C组)、高糖组(HG组)、高糖+溶剂对照组(HG+D组)、高糖+tBHQ预处理组(HG+t组),于高糖刺激48 h后收集细胞及上清液,2’7’-二氯荧光素探针(2’,7’-Dichlorofluorescin diacetate,2.7-DCFH-DA)检测细胞内活性氧族(reactive oxygen species,ROS);硫代巴比妥法检测细胞内丙二醛(malondialdehyd,MDA)浓度;流式细胞学检测细胞增殖;酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosor-bent assay,ELISA)检测细胞上清液转化生长因子-β1(trans-forming growth factor-β1,TGF-β1)水平;Western blot及反转录-多聚酶链反应(reverse transcription polymerse chain reac-tion,RT-PCR)检测系膜细胞Nrf2、血红素氧化酶-1(hemeoxygenase-1,HO-1)、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-glutamyl-cysteine synthethase,γ-GCS)的表达水平。结果①高糖刺激使MMCs的ROS、MDA、细胞增殖及细胞上清液TGF-β1水平明显升高,而tBHQ预处理可以使以上指标明显下降。②tBHQ预处理可以增加高糖刺激下系膜细胞内Nrf2在细胞内和细胞核的表达以及细胞内HO-1、γ-GCS蛋白和mR-NA的表达水平。结论 tBHQ减轻了高糖诱导的肾小球系膜细胞的氧化应激损伤,其作用机制可能是通过激活Nrf2-ARE信号通路,进而增强抗氧化蛋白、HO-1、γ-GCS的表达而实现的。
- 李航曹延萍张连珊陈玮王慧娟张金平段惠军
- 关键词：活性氧族血红素氧化酶-1Γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶叔丁基对苯二酚
- 人胚发育过程中大脑皮质超微结构的变化
- 2009年
- 王慧娟张金平龚淼李莉赵昱李陈莉
- 关键词：超微结构变化发育过程大脑皮质人胚先天畸形
- 新生大鼠神经干细胞的体外培养方法被引量：1
- 2011年
- 目的 探讨新生SD大鼠神经干细胞（neural stem cells,NSCs）适宜的体外分离培养方法.方法 从出生1～3d的SD大鼠脑组织中分离NSCs,采用不同的接种密度、传代方法,在体外培养NSCs,观察细胞的生长情况.巢蛋白（Nestin）、神经元特异性烯醇化酶（neuron specific enolase,NSE）、胶质原纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）免疫细胞化学法对NSCs进行鉴定.结果 培养的神经球Nestin表达阳性,血清诱导后可分化为NSE阳性神经元和GFAP阳性星形胶质细胞,具有自我增殖和多向分化能力,是NSCs.当NSCs接种密度为1×106/mL时,细胞增殖速度快,神经球生成的数量多.传代的方法应视情况而定,传代时间为7d左右.结论 建立了简单、稳定的新生大鼠NSCs的体外培养方法,为进一步研究NSCs的生物学特征及组织移植奠定了基础.
- 赵昱李莉张金平赵文杰陈炜王慧娟李陈莉
- 关键词：干细胞细胞培养技术
- 外源表达Nkx2-5基因诱导P19细胞心肌分化
- 目的：哺乳动物成熟个体中的心肌细胞是终末分化的细胞，受到损伤时一般由瘢痕进行替代修复，由此造成的心肌细胞缺失和数量下降是导致心脏收缩功能下降，进而引起心力衰竭等心脏疾病的重要原因。近年来的研究表明，成体心脏中的心肌干细胞...
- 张金平
- 关键词：NKX2-5P19细胞心肌分化基因转染5-氮胞苷
- 文献传递
- 大鼠应激耐受多系分化细胞的分离、扩增及鉴定
- 陈炜尹青张金平赵春芳孔祥增
- 该课题为Muse cells研究和临床应用提供种子细胞。以大鼠BMSCs为来源，进一步完善了BMSCs分离、培养技术，经流式细胞技术和向心肌等细胞分化鉴定，结果表明培养的BMSCs具有较高纯度，具有干细胞性质；首次以大鼠...
- 关键词：
- 关键词：干细胞种子细胞
- 外源表达Nkx2-5基因诱导P19细胞向心肌分化被引量：8
- 2007年
- 目的:构建人Nkx2-5基因融合绿色荧光蛋白真核表达质粒pEGFP-N1-Nkx2-5,探讨外源性Nkx2-5基因诱导P19细胞向心肌分化的作用。方法:以真核表达质粒pEFSA-HA-Nkx2-5为模板,PCR扩增得到人Nkx2-5基因,将目的片段亚克隆到pEGFP-N1载体,鉴定正确。将重组质粒pEGFP-N1-Nkx2-5以脂质体法转染P19细胞,G418筛选2周,聚集4d,贴壁培养16d。以免疫细胞化学检测desmin、α-sarcomeric actin和cardiac Troponin T(cTnT)的表达。结果:将Nkx2-5基因正确插入pEGFP-N1载体,外源表达Nkx2-5基因可使P19细胞在无诱导剂、聚集条件下表达desmin、α-sarcomeric actin和cTnT蛋白。结论:成功构建真核表达质粒pEGFP-N1-Nkx2-5,外源表达Nkx2-5基因诱导P19细胞向心肌分化。
- 张金平张雷王惠娟王多赵昱尹青赵春芳
- 关键词：NKX2-5质粒构建P19细胞心肌分化
- 5-氮胞苷诱导外源表达Nkx2-5的P19细胞向心肌分化的研究被引量：1
- 2009年
- 目的研究在单层培养条件下,5-氮胞苷(5-azacytidine,5-aza)诱导表达Nkx2-5的P19细胞向心肌分化的可能性和效率。方法实验分为实验组和对照组,实验组细胞为稳定表达Nkx2-5的P19细胞,对照组为P19细胞。2组细胞均在单层培养条件下,以5-aza(1μmol/L)诱导。倒置显微镜观察细胞的生长状态;诱导4、8、12、16d,Western blot检测α-sarcomeric actin和cTnT的表达;并用免疫荧光双标检测α-sarcomeric actin和cTnT的共表达。结果实验组和对照组细胞在5-aza诱导下,生长缓慢,死亡细胞数目增多。随贴壁细胞密度增加,形成类似于聚集体贴壁生长的状态,中心细胞小、密集,周边细胞呈放射状排列,胞体长梭形,伸出突起。实验组诱导8、12、16d检测到α-sarcomeric actin和cTnT2种蛋白的表达和共表达,表达量呈增多趋势;诱导12、16d时α-sarcomerica ctin的表达量与8d比差异有统计学意义(P<0.01),诱导16d的表达量与12d比差异有统计学意义(P<0.01);cTnT在诱导12、16d的表达量与8d比差异有统计学意义(P<0.01)。对照组没有2种蛋白的表达和共表达。结论5-aza可诱导单层生长的表达Nkx2-5的P19细胞向心肌分化。
- 张金平赵静王慧娟赵秀军赵春芳张雷
- 关键词：P19细胞心肌分化
