徐旭东
- 作品数：11 被引量：43H指数：3
- 供职机构：山东省寄生虫病防治研究所更多>>
- 发文基金：山东省科委基金国家高技术研究发展计划山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 用基因融合技术进行杀蚊幼毒蛋白基因的研究 Ⅰ.球形芽孢杆菌毒蛋白基因42的克隆被引量：2
- 1999年
- 为了提高球形芽孢杆菌对中华按蚊的毒效，采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术成功扩增了Ｂ．ｓ．中有毒效作用的基因片段，通过Ｔ４ＤＮＡ聚合酶的修饰，使目的基因片段得以成功克隆。借助光敏生物素核酸标记探针，原位杂交筛选出目的基因阳性克隆。
- 刘相萍闫歌徐旭东孔任秋
- 关键词：球形芽孢杆菌PCR基因融合灭蚊
- 基因工程杀蚊幼蓝藻的研究被引量：21
- 1993年
- 应用基因工程手段研制杀蚊幼蓝藻,是解决苏云金杆菌和球形芽孢杆菌等短持效问题的途径之一。但国际上基因工程蓝藻的毒效一直限于较低水平,甚至需要破碎细胞才能检测到对蚊幼虫的毒杀作用。本文将球形芽孢杆菌毒素基因装配鱼腥藻启动子后,转移入鱼腥藻进行表达,所得基因工程株对蚊幼虫具有十分显著的毒效,对淡色库蚊幼虫24h半致死浓度为2.31×10~4细胞/ml;其对淡色库蚊、中华按蚊、白纹伊蚊幼虫的毒效依次递减,这与球形芽孢杆菌相似。由于鱼腥藻易培养、生态适应性广等,可望成为蚊虫特效控制的新型武器。
- 徐旭东孔任秋胡玉祥
- 关键词：球形芽孢杆菌
- 用基因融合技术进行杀蚊幼毒蛋白基因的研究Ⅱ.蚊幼虫肠壁细胞膜抗体基因的克隆被引量：1
- 1999年
- 为了提高 Ｂ．ｓ．对蚊幼虫肠壁细胞膜的识别与结合力从而提高其杀蚊活性，本实验解剖了万余只中华按蚊幼虫肠道，制备了按蚊幼虫肠壁膜泡抗原及其鼠抗血清。抗原蛋白组分分析表明膜泡的纯度较高，而抗血清实验则显示出抗体组分与肠壁的结合作用。利用 Ｐ Ｃ Ｒ 技术成功扩增了小鼠抗体重链区基因，借助 Ｔ４ Ｄ Ｎ Ａ 聚合酶的修饰，使抗体基因得以成功克隆，为研制抗体基因与毒蛋白基因融合编码的“生物导弹”打下了基础。
- 刘相萍闫歌徐旭东孔任秋
- 关键词：中华按蚊抗体基因
- 中华按蚊幼虫肠壁膜泡的制备及其鼠抗血清对幼虫的作用
- 1998年
- 目的：搞清Ｂ．ｓ杀虫蛋白对蚊幼虫肠细胞膜的作用机理，从而改进杀虫蛋白活性。方法：差速离心制备肠细胞膜泡，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳分析其蛋白组分；测试其鼠抗血清对蚊幼虫的效应。结果：膜制备物蛋白组分分析显示了膜泡的纯度，而抗血清则对Ⅰ龄幼虫有明显的致死效应；日龄越小，致死率越高。
- 刘相萍张洪花孔任秋徐旭东
- 关键词：中华按蚊肠道膜泡
- 球形芽孢杆菌两毒蛋白基因的分别克隆及杀蚊幼活性的协同作用被引量：2
- 1997年
- 将球形芽孢杆菌两毒蛋白基因分别克隆并分别在大肠杆菌及鱼腥藻中表达，经对淡色库蚊幼虫毒性测试结果表明：只表达一种毒蛋白基因的大肠杆菌或鱼腥藻对蚊幼虫无毒效，而将分别表达这两种基因的大肠杆菌或鱼腥藻等浓度混合使用时则表现出高的杀蚊活性，从而证明球形芽孢杆菌两毒蛋白基因具有明显的协同作用，其杀蚊活性与同细胞表达两种毒蛋白基因的大肠杆菌或鱼腥藻相比，结果相似，无明显差异。
- 刘湘萍徐旭东孔任秋闫歌
- 关键词：球形芽孢杆菌克隆
- 3种基因工程藻对中华按蚊幼虫杀灭作用的实验研究被引量：3
- 1998年
- 本实验观察了３种基因工程杀蚊幼蓝藻对中华按蚊Ⅲ龄幼虫的杀灭作用。结果表明，当喷施工程藻浓度高于３．０×１０５ｃｅｌｓ／ｍｌ时，作用２４ｈ后，中华按蚊幼虫死亡数较低，而在４８ｈ、７２ｈ后蚊幼虫大部分（６７％以上）死亡；在喷施工程藻浓度低于３．０×１０４ｃｅｌｓ／ｍｌ时，２４ｈ、４８ｈ和７２ｈ的杀蚊幼效果均较差，此结果明显低于工程藻对淡色库蚊幼虫的作用效果。因此在应用基因工程藻进行现场控制蚊幼虫时，特别是在有较多按蚊幼虫的孳生地，应该考虑联合应用其它防治方法。
- 闫歌刘相萍张晓静孙传红甄天民孔任秋徐旭东
- 关键词：中华按蚊幼虫
- 基因工程灭蚊幼蓝藻的现场初步观察被引量：15
- 1996年
- 将转入球形芽孢杆菌毒蛋白基因表达质粒的工程藻Ａｎａｂａｅｎａｓｕｂｔｒｏｐｉｃ（ｐＤＣ２６）大量培养后，应用于山东省平阴县进行现场观察。结果表明：工程藻在９．４１×１０５ｃｅｌｌｓ／ｍｌ浓度以上时，４８ｈ可杀死９９～１００％蚊幼虫；在９．１３×１０４ｃｅｌｌｓ／ｍｌ浓度时，４ｄ可杀死９９％以上蚊幼虫，连续观察２个多月，工程藻仍有明显杀蚊效果，实验组最多１４条／勺幼虫，而对照组２１０条／勺左右。观察还发现，工程藻对库蚊幼虫杀灭效果最好，其次为伊蚊，但高浓度时，对伊蚊仍有明显杀灭效果；由于按蚊幼虫密度太低，未能观察。此结果比单独使用球形芽孢杆菌杀灭蚊幼虫有明显提高，持续时间也延长，这将为蚊虫的持续控制提供一个新的有力武器。
- 阎歌刘相萍张晓静江洪涛甄天民王怀位孔任秋徐旭东郝延玉程义亮
- 关键词：灭蚊球形芽孢杆菌
- 高效灭蚊幼转基因蓝藻的研究——Ⅰ.蚊虫孳生地蓝藻的分离及对蚊幼虫适口性的观察被引量：7
- 1992年
- 本文报告了两种蚊虫孳生地分布的蓝藻Synechocystks sp和Oscillatoria sp.的分离,并发现Anabaena sp.7120株可在城市污水中生长。以上三种蓝藻在自然水和培养条件下生活状态各不相同,但皆可作为蚊幼虫食物。其中,Oscillatoria sp.藻丝长而交织生长,藻体集结成块,仍然可为中华按蚊(Anopheles sinensis)幼虫取食。以含有大量固体悬浮颗粒及细菌、有机质的生活污水直接培养Anabaena sp. 7120,可为淡色库蚊(Culex pipien pallenns)幼虫有效取食,初步证明蓝藻在自然水中作为蚊幼虫食物的可能性。
- 孔任秋徐旭东胡玉祥
- 关键词：蓝藻蚊幼虫适口性灭蚊
- 中华按蚊幼虫肠细胞膜级分的制备及其鼠抗血清对幼虫的效应 (英文)
- 1994年
- 已知芽孢杆卤杀虫蛋白的毒效依赖于它们与幼虫肠细胞膜的亲合力。对于其机理的研究和应用蛋白质工程手段改造杀蚊蛋白来说,蚊幼虫肠细胞膜的制备是必不可少的。本研究收集了万余只中华按蚊幼虫肠道,用于分离其细胞膜级分,进行蛋白组分分析,鼠抗血清的制备以及该抗血清对幼虫的作用的观察。仅在一龄幼虫观察到致死效应。
- 刘相萍张洪花孔任秋徐旭东刘仑华胡玉祥
- 关键词：中华按蚊幼虫
- 转基因蓝藻对不同龄期淡色库蚊幼虫杀灭作用的实验研究被引量：1
- 1998年
- 目的：观察３种基因工程杀蚊幼蓝藻对不同龄期淡色库蚊幼虫的杀灭效果。方法：利用不同浓度基因工程藻，分别作用于不同龄期淡色库蚊幼虫，计算死亡率。结果：３种基因工程藻对不同龄期淡色库蚊幼虫杀灭作用相似；在藻细胞浓度低于１０４ｃｅｌｓ／ｍｌ时，杀灭作用由强到弱依次为Ⅰ龄、Ⅱ龄、Ⅲ龄末Ⅳ龄初幼虫；而当藻细胞浓度高于１０５ｃｅｌｓ／ｍｌ时，对该蚊不同龄期幼虫的杀灭作用均高效。结论：应用基因工程藻现场控制蚊幼虫宜尽早喷施，可提高杀灭效果。
- 阎歌张晓静刘相萍赵玉强孔任秋徐旭东
- 关键词：蓝藻淡色库蚊转基因
