徐瑛
- 作品数：4 被引量：7H指数：2
- 供职机构：福建医科大学基础医学院细胞与发育工程研究中心更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 神经系统条件性基因敲除研究进展被引量：1
- 2008年
- 近十几年来发展起来的条件性基因敲除技术,克服了传统基因敲除所导致的胚胎期致死等不足,为更精细的基因功能研究创造了条件。从1996年起该技术开始,应用于神经系统相关基因功能与疾病的研究,研究者以神经系统特异性表达Cre重组酶的转基因小鼠为基础,制备了许多条件性基因敲除小鼠,为神经系统疾病相关基因功能研究及疾病的发生、发展和治疗提供了重要线索。本文从条件性基因敲除原理,神经系统特异性Cre转基因小鼠的研究,及该技术在神经性疾病中的应用及进展做一简要综述。
- 徐瑛周常文
- 关键词：神经系统神经性疾病
- 实时荧光定量PCR检测转基因小鼠外源基因拷贝数方法的建立和应用被引量：4
- 2011年
- 目的建立实时荧光定量PCR方法检测CaMKⅡα-Cre转基因小鼠外源基因拷贝数的方法。方法以CaMKⅡα-Cre转基因首建鼠及其仔代阳性鼠为研究对象,利用绝对定量的实时荧光定量PCR法检测转基因小鼠的拷贝数,并筛选出纯合子小鼠再经遗传育种方法以确定为纯合子小鼠。结果绝对定量标准曲线公式为:△Ct=-2.402log5N(拷贝数)+8.654,相关系数为0.9999,扩增效率为95.4%。三只CaMKⅡα-Cre首建鼠的拷贝数分别为19、7、5;三个转基因小鼠品系均成功获得纯合子小鼠。结论成功建立了检测转基因小鼠外源基因拷贝数的实时荧光定量PCR方法,该方法可用于检测各种转基因小鼠中外源基因的拷贝数。
- 郑杰辉林炤华徐瑛刘军周常文
- 关键词：转基因小鼠拷贝数实时荧光定量PCRCT值
- CaMKⅡα基因启动子的克隆和神经细胞特异性Cre表达载体的构建被引量：2
- 2008年
- 目的克隆和鉴定CaMKⅡα基因启动子序列,构建神经细胞特异性Cre重组酶的真核表达载体。方法采用高保真PCR方法分步扩增CaMKⅡα基因5′端8.1kb的调控区DNA片段,该片段包括了CaMKⅡα基因5′端调控区的所有序列。经克隆和部分序列测定后,依次与pCre-IRES-EGFP质粒框架连接,构建载体。结果克隆的CaMKⅡα基因5′端侧翼区酶切图谱与公布的C57BL/6J小鼠相应序列的酶切位点相一致,其中文献报道的富含顺式调控元件的序列与公布的小鼠序列完全相同。CaMKⅡα基因启动子正确地连接于Cre基因的5′端,构建了目标载体。结论这一载体的构建为建立前脑神经细胞特异性表达Cre重组酶的转基因小鼠奠定了基础,有助于神经系统相关疾病的研究。
- 徐瑛周常文林炤华柯琦
- 关键词：克隆CRE重组酶
- 神经细胞特异性Cre重组酶表达载体的构建及其体外表达研究
- Cre-10xP系统介导的条件性基因敲除(conditional gene knockout)是基因功能研究最重要的技术之一，它克服了传统基因敲除导致小鼠胚胎死亡等诸多弊端。将该技术应用于神经系统，可使基因敲除仅发生于大...
- 徐瑛
- 关键词：神经细胞体外表达
- 文献传递
