曾芳
- 作品数：13 被引量：29H指数：4
- 供职机构：浙江省舟山医院更多>>
- 发文基金：浙江省医药卫生科学研究基金浙江省中医药管理局科研基金浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 泡膜蛋白1在非小细胞肺癌组织中的表达及其预后价值被引量：9
- 2011年
- 目的探讨泡膜蛋白1（VMP1）在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及其预后价值。方法收集NSCLC组织蜡块78例并进行随访，订制兔抗人VMP1抗体并通过免疫组化检测VMP1蛋白的表达，分析其与临床病理指标、术后生存率的关系。结果VMP1只表达于肿瘤细胞且定位于胞质，阳性率为35．9％（28／78），VMP1表达与临床分期关系密切，分期越晚，阳性率越高（χ^2=6．829，P〈0．05），但号陛别、年龄、组织类型、大体类型和分化程度等均无关（P〉0．05）。患者术后1年和3年的累积生存率分别为94．9％和66．3％，平均生存期为37．2个月（95％CI：33．7～40．8）。VMP1表达对生存曲线分布有影响，其中阳性者预后较差（χ^2=6．192，P〈0．05），平均生存期仅为29．0个月（95％CI：25．0～33．0）；VMP1表达和临床分期是影响患者术后生存的危险因素（P〈0．05）。结论NSCLC组织中VMP1的表达具有较好的预后价值，VMP1阳性提示预后不良。
- 周世权周吉航邓涛曾芳王晔恺刘晓光
- 关键词：膜蛋白质类自噬预后
- 高/低侵袭转移性肺癌干细胞模型的建立被引量：1
- 2012年
- 目的以人肺癌NCI-H446细胞为研究对象,建立一种高/低侵袭性肺癌干细胞(high/low invasion lung tumor stemcells,H/L-ILTSCs)模型,并鉴定其生物学特性。方法首先,利用transwell小室迁移实验分离高/低迁移性NCI-H446细胞。取高/低迁移性NCI-H446细胞采用transwell小室侵袭实验分离高/低侵袭转移性NCI-H446细胞。然后,以CD133、CD44为肺癌干细胞(lung tumor stem cells,LTSCs)表面标志,采用磁珠分选法分离NCI-H446细胞H/L-ILTSCs并进行纯度鉴定。最后,采用MTT法、transwell侵袭及免疫缺陷动物成瘤等实验,检测H-ILTSCs、L-ILTSCs及NCI-H446细胞的生长增殖,体外侵袭转移及体内成瘤能力。结果 H-ILTSCs生长增殖,体外侵袭转移及体内成瘤能力均高于L-ILTSCs及NCI-H446细胞,而L-ILTSCs与NCI-H446无显著差别。结论人肺癌细胞NCI-H446中可以分离和富集H/L-ILTSCs,且二者存在着干性差别。
- 曾芳刘晓光乐涵波
- 关键词：肺癌肺癌干细胞CD133CD44
- 肾康灵汤剂对IgA肾病患者外周血T淋巴细胞体外作用研究
- 2011年
- IgA肾病（IgA nephropathy,IgAN）是一类机体产生抗微生物抗原IgA抗体,继而大量IgA抗原和抗体形成免疫复合物在系膜区沉积,激活补体旁路途径,引起肾脏损伤的疾病[1]。有报道显示,IgAN患者通常存在T细胞亚群的明显失衡[2],进而造成免疫应答紊乱。肾康灵汤剂主要由黄芪、生地黄、太子参、丹参等成分组成,在临床应用中,
- 王晔恺周吉航曾芳周世权黄燕燕刘晓光
- 关键词：IGA肾病患者外周血T淋巴细胞肾康灵体外作用汤剂IGA抗体
- 非小细胞肺癌Stathmin mRNA的表达及临床意义
- 2011年
- 目的 探讨Stathmin mRNA在非小细胞肺癌中的表达及临床意义.方法 成对收集非小细胞肺癌手术切除的癌和癌旁组织,抽提总RNA,利用半定量RT-PCR技术检测Stathmin mRNA的表达,对其与临床病理指标的关系进行统计学分析.结果 共收集癌和癌旁组织43对,癌组织中Stathmin mRNA表达的阳性率为76.7%,癌旁组织中为60.5%,癌组织的Stathmin相对表达量明显高于癌旁组织（Z=5.359,P=0.000）;无论是癌还是癌旁组织,男性中Stathmin的相对表达量明显高于女性（χ^2=5.059、5.799,P=0.024、0.016）.癌组织中,鳞癌中Stathmin的相对表达量高于腺癌（χ^2=5.821,P=0.016）、中央型明显高于周围型（χ^2=4.308,P=0.038）.结论 非小细胞肺癌中Stathmin mRNA的表达具有较高的阳性率,其中鳞癌、中央型肺癌和男性患者中增高最明显.
- 周世权周吉航刘晓光曾芳王晔恺陈冬冬乐涵波
- 关键词：非小细胞肺癌STATHMINMRNA
- 腺相关病毒载体在视网膜色素变性基因治疗中的应用研究进展被引量：4
- 2014年
- 基因治疗是视网膜色素变性（RP）治疗研究的热点之一.经动物实验及临床试验证实,腺相关病毒（AAV）载体因其无致病性、宿主范围广、转染和表达效率高、目的基因长期表达等优点成为视网膜疾病基因治疗的重要载体.但如何建立安全有效的基因治疗导入系统是目前临床需要首要解决的问题.此外,由于基因的导向性和表达的调控性较为局限,也限制了AAV载体介导的基因治疗在临床的广泛应用.进一步深入研究AAV的病毒生物学基础,设计更多的组织特异性启动子以提高AAV载体的转染效率、靶向能力和安全性将为RP基因治疗带来新的曙光.
- 李光辉曾芳王晔恺黎运呈宋毅果
- 关键词：基因疗法
- 地西他滨联合丙戊酸钠体外诱导1例AML-M_2复发患者原始细胞凋亡分化的作用研究
- 2012年
- 目的探讨地西他滨(decitabine,DCA)和丙戊酸钠(valproic acid,VPA)联用对1例复发性AML-M2患者原始细胞体外的影响。方法分选此例患者骨髓原始细胞,设立药物分组如下:对照组,DCA单药A组(1.0μmol/L),DCA单药B组(4.0μmol/L),VPA单药组(2.0mmol/L),联合用药A组(DCA 1.0μmol/L+VPA 2.0mmol/L),联合用药B组(DCA 4.0μmol/L+VPA 2.0mmol/L),作用48h。应用流式细胞术检测早期凋亡率和CD117、CD14表达率。结果相对于各自的单药组,联合用药A组和联合用药B组均能显著提高早期凋亡率和CD14表达,抑制CD117的表达(P<0.01)。结论体外DCA联合VPA能显著加强抗白血病效应。
- 陈琼娜王晔恺周吉航李翊卫曾芳刘晓光
- 关键词：急性粒细胞白血病丙戊酸钠地西他滨
- 退黄汤联合熊去氧胆酸对α-萘异硫氰酸酯诱导的大鼠急性肝损的保护作用被引量：2
- 2013年
- 目的:探讨退黄汤(THT)联合熊去氧胆酸(UDCA)对α-异硫氰酸萘酯(ANIT)诱导大鼠肝损过程保护作用及机制。方法:选取Sprague-Dawley(SD)大鼠84只,设立空白组6只,对剩余78只在0 h时间点均以ANIT 100 mg/kg予以灌胃造成急性肝损伤,在肝损后24 h取6只处死留取标本(肝损24 h组),然后分为生理盐水组(18只,9 mL/kg体重的生理盐水灌胃)、UDCA组(18只,20 mg/kg体重的UDCA溶液灌胃)、THT组(18只,20 mL/kg体重的THT灌胃)、UDCA/THT组(18只,20 mg/kg体重的UDCA和20 mL/kg体重的THT联合灌胃),各组分别在肝损造模后48 h、72 h、96 h处死6只大鼠。所有大鼠处死留取血清和肝组织,生化仪检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBI)、总胆汁酸(TBA),酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清白介素-10(IL-10)白介素-6(IL-6)肿瘤坏死因子-α(TNF-α),实时荧光定量PCR检测肝组织多药耐药相关蛋白2(Mrp2)mRNA,苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织炎症活动度。结果:UDCA和THT在降低血清ALT、AST、TBI、TBA、IL-6、TNF-α和提升血清IL-10及肝组织Mrp2 mRNA均存在明显的主效应(P<0.01),两药在调控血清TBI、IL-6、TNF-α、IL-10及肝脏Mrp2 mRNA均存在明显交互协同作用(P<0.01或P<0.05)。HE染色显示联合用药组96 h肝组织炎性程度轻于单药组及生理盐水组。结论:UDCA和THT联合降低了ANIT诱导的肝损作用可能和两药联合作用调控血清细胞因子及肝脏Mrp2表达有关。
- 薛川李绍民徐方明丁贤君黎运呈张国梁林志益李绍佐张浙恩曾芳李世波
- 关键词：熊去氧胆酸退黄汤细胞因子多药耐药相关蛋白2
- 非小细胞肺癌组织中ZO-1的表达及其临床意义被引量：5
- 2011年
- 背景与目的已有的研究表明紧密连接蛋白-1(zonula occluden-1,ZO-1)表达和肿瘤细胞的生长和转移存在密切联系。本研究旨在探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中ZO-1表达的临床意义。方法应用实时荧光定量PCR、Western blot和免疫组化检测101例NSCLC癌组织及癌旁组织中ZO-1mRNA和蛋白表达,以61例肺部良性病变患者作为对照。结果 ZO-1mRNA在癌组织和肺良性病变组织间差异具有统计学意义(P<0.01)。Western blot显示:ZO-1蛋白在癌组织、癌旁组织、肺良性病变组织的相对表达量之间均存在明显差异(P<0.01或P<0.05)。免疫组化显示:ZO-1平均光密度在癌组织、癌旁组织和肺良性病变组织中分别为69.55±17.13、246.39±83.15、330.93±72.44,组间差异均具有统计学意义(P<0.01)。伴有淋巴结转移与不伴淋巴结转移肺癌组织ZO-1mRNA表达水平比较有显著性差异(t=-5.07,P<0.01),肺癌患者术后2年内生存组和2年内死亡组间ZO-1mRNA表达水平比较差异具有统计学意义(t=5.61,P<0.01)。结论 ZO-1mRNA和蛋白在NSCLC癌组织中表达降低,并与淋巴结转移的术后生存有密切关系。
- 王晔恺周吉航曾芳黄燕燕周世权刘晓光
- 关键词：ZO-1蛋白肺肿瘤免疫组织化学
- 从兔外周血直接克隆B细胞κ轻链的可变区被引量：1
- 2012年
- 目的从兔外周血总RNA中直接扩增出B细胞κ轻链的可变区序列。方法首先从IMGT/GENE-DB数据库中获取大耳白兔Ig胚系基因Vκ(IGKV)、Jκ(IGKJ)和Cκ(IGKC)的cDNA序列、设计引物,然后以非免疫兔外周血总RNA为模板进行RT-PCR扩增,回收产物并克隆到T载体,随机挑选单克隆测序,最终将序列提交到IMGT/V-QUEST,分析出每个克隆的Vκ-Jκ组合,并利用BioEdit的本地Blast程序比较出Cκ的基因型。结果共设计出4对引物,其中引物对RK.C1[4-5-9]无产物,引物对RK.C1[1-2-7]、RK.C1[3-6-8]和RK.C2[1-2-3-4]有产物,分别回收、克隆到T载体后各挑取20个克隆,共获得51个克隆的插入子序列。没有任何2个克隆的插入子序列完全相同,每个克隆均包含完整的兔Vκ、Jκ及Cκ的5’端序列,其中Vκ-Jκ-IGKC1组合的克隆33个,Vκ-Jκ-IGKC2组合的克隆18个;68个Vκ胚系基因中有22个出现,其中频率最高的是IGKV1S10*01(12次),其次是IGKV1S36*01、IGKV1S37*01和IGKV1S4*01(各5次),其余均为3次以下;8个Jκ胚系基因中只有1个出现,为IGKJ1-2*01;2个Cκ基因的等位基因分别为IGKC1*01和IGKC2*03。33个Vκ-[IGKJ1-2*01]-[IGKC1*01]克隆中有17种不同的组合方式,其中频率最高的为[IGKV1S10*01]-[IGKJ1-2*01]-[IGKC1*01](7次)。18个Vκ-[IGKJ1-2*01]-[IGKC2*03]克隆中有11种不同的组合方式,频率最高的为[IGKV1S10*01]-[IGKJ1-2*01]-[IGKC2*03](5次)。Vκ-Jκ-Cκ组合方式相同的克隆,序列仍具有明显的差异。结论利用自行设计的兼并引物,成功并特异地从兔外周血总RNA中直接扩增出了κ轻链的可变区,且产物具有良好的多样性,但所有Vκ-Jκ-Cκ组合中只出现了1种Jκ基因。
- 周吉航周世权王晔恺曾芳马利娜刘晓光
- 关键词：外周血轻链可变区反转录聚合酶链式反应
- 人肺癌NCI-H446细胞生成肿瘤干细胞球被引量：2
- 2012年
- 目的探索人肺癌NCI-H446细胞系干细胞球体的培养,并鉴定其生物学特性。方法用无血清培养基培养人肺癌NCI-H446细胞得到肿瘤细胞球。将肿瘤细胞球传代扩增,并用含血清培养基培养促使其分化;四甲基偶氮唑盐(MTT)比色检测肿瘤球和普通NCI-H446细胞的增殖能力,并将肿瘤球和普通NCI-H446细胞分别植入裸鼠皮下,观察肿瘤形成;Transwell侵袭实验检测肿瘤球和普通NCI-H446细胞的侵袭能力的不同;流式细胞术检测CD133、CD44在肿瘤球和普通NCI-H446细胞中的表达,并筛选细胞表面标志物。结果在无血清培养基中,人肺癌NCI-H446细胞可以形成少量的肿瘤细胞球,并显示很强的自我更新和增殖能力,在含血清环境中能够诱导肿瘤球分化而贴壁生长;在动物实验中,接种5×105个细胞时,肿瘤球细胞较普通NCI-H446细胞显示更强的致瘤能力;在侵袭实验中,肿瘤球细胞的侵袭能力高于普通NCI-H446细胞;干细胞标志物CD133及CD44在肿瘤球细胞的表达较普通NCI-H446细胞明显增高。结论人肺癌细胞NCI-H446中存在癌干细胞,且可以通过无血清培养、分离和富集。
- 乐涵波刘晓光曾芳
- 关键词：肺癌无血清培养癌干细胞细胞表面标志
