李结
- 作品数：17 被引量：28H指数：3
- 供职机构：华南农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金家畜疫病病原生物学国家重点实验室开放基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 犬源贾第虫EF1α基因的克隆及序列分析
- 2012年
- 以广州某宠物医院临床犬源贾第虫为研究对象,根据GenBank TM中登录的贾第虫EF1α基因序列(AF069575),设计1对引物EF/ER,采用PCR方法从贾第虫基因组DNA中扩增出目的片段,纯化后克隆至pGEM-T Easy载体,重组质粒通过菌液PCR鉴定后,对其进行序列测定及分析,旨在对广州犬源贾第虫进行分子鉴定。结果显示,该犬源贾第虫EF1α序列长为288bp,与预期目的片段一致,该序列构建的分子进化树表明该犬源贾第虫分离株为蓝氏贾第虫D型。说明EF1α适合做分子标记,可准确地对贾第虫进行基因分型,为贾第虫分子分类学及分子遗传学研究奠定了基础。
- 李结王培园张萍刘远佳郭建超孟祥龙李国清
- 关键词：克隆PCR技术
- 环介导等温扩增技术及其在动物疫病检测中的应用被引量：1
- 2012年
- 环介导等温扩增技术(LAMP)是一种新型的体外等温扩增特异核酸片段的技术,具有灵敏度高、特异性强及快速检测等优点,现已经广泛应用于动物疫病的快速检测。文章对LAMP的反应原理、技术特点及其近年来在动物疫病检测中的应用作一综述,旨在为该技术的深入研究和应用提供参考。
- 李结王培园张萍李金平蔺智宾李国清
- 关键词：环介导等温扩增动物疫病
- 用于检测蓝氏贾第虫人畜共患基因型的HRM引物及其应用
- 本发明公开了一种用于检测蓝氏贾第虫人畜共患基因型的HRM引物及其应用。HRM引物的核苷酸序列为：TPI1：5'-CTTCATCGGYGGTAACTT-3'，TPI3：5'-GGCACGCTTMGCCTTCTT-3'；TP...
- 李国清张萍李结刘远佳李雅文朱海波米多
- 弓形虫基因工程疫苗研究的新进展被引量：6
- 2013年
- 弓形虫病是由刚地弓形虫（Toxoplasma gondii）引起的一种呈世界性分布且严重危害人类健康的人兽共患寄生虫病。弓形虫是一种专性细胞内寄生原虫，能够感染包括几乎所有哺乳动物和一些鸟类。据不完全统计，全世界约有三分之一成年人感染弓形虫。绝大多数弓形虫感染呈隐性感染，不表现临床症状，但对于器官移植、恶性肿瘤及艾滋病等免疫抑制及免疫功能缺陷者，弓形虫是重要的致命因子之一。孕妇感染弓形虫、不仅容易导致流产、早产、死胎和胎儿畸形，
- 王培园李结朱兴全袁子国
- 关键词：刚地弓形虫基因工程疫苗人兽共患寄生虫病弓形虫感染弓形虫病
- 猫源贾第虫16S rRNA与β-贾第素基因双位点的基因型鉴定被引量：2
- 2012年
- 为了对流浪猫粪便中分离的贾第虫滋养体进行基因型鉴定,提取虫体基因组DNA,以16SrRNA和β-贾第素基因为遗传标记,通过PCR扩增、克隆、测序、NCBI比对以及相关软件分析,建立系统进化树,确定了其基因型。结果显示,成功扩增出291bp的16SrRNA和511bp的β-贾第素基因片段,测定了2个基因片段的序列,并经NCBI比对以及DNAStar中MegAlign软件分析确定该株贾第虫为十二指肠贾第虫F型。本研究首次对我国猫源贾第虫进行了基因型鉴定,为猫源贾第虫分子生物学和分子流行病学研究奠定了基础。
- 刘远佳张萍李结郭建超孟祥龙LOUTOU H M李国清
- 关键词：基因型16SRRNA基因
- 两株犬源贾第虫tpi基因的基因型分析被引量：2
- 2011年
- 采用巢式PCR鉴定广东两株犬源贾第虫(GD1和GD2)的基因型。运用碘液染色对犬粪便中贾第虫进行鉴定,提取DNA后经巢式PCR扩增tpi基因,扩增产物测序后用BLAST和DNAStar软件进行同源性和系统发育分析。结果表明,通过tpi基因分析,GD1与L02120的同源性为100%,种系发育树上位于同一分支;GD2与DQ220289的同源性为99.1%,种系发育树上两者在同一分支。广东犬源贾第虫GD1为人畜共患的A1型,GD2为犬的D型。
- 张萍朱海波李结李金平刘远佳郭建超孟祥龙李国清
- 关键词：贾第虫巢式PCR
- 广州市犬贾第虫感染与基因型调查及LAMP检测方法研究
- 贾第鞭毛虫(简称贾第虫)是一类呈世界性分布的重要人兽共患寄生原虫，能广泛寄生于人、哺乳动物、鸟类、两栖类及啮齿类动物的肠道，引起腹痛、腹泻和消化不良等症状。该病已被列为全世界危害人类健康的10种主要寄生虫病之一。为了解广...
- 李结
- 猴源环孢子虫巢式PCR检测方法的建立被引量：3
- 2010年
- 环孢子虫是一类可引起人和动物腹泻的重要寄生性原虫。为建立猴源环孢子虫的巢式PCR检测方法,根据该环孢子虫18S rDNA基因序列,设计一对保守引物N18SA/N18SS和一对特异性引物CYJS/CYJA,通过阳性质粒摸索该检测方法的最佳反应条件,进行特异性和敏感性试验,并应用该方法对87份猴粪样本进行了临床检测。结果显示该巢式PCR能特异性地扩增出猴源环孢子虫目的片段,与微小隐孢子虫、阿米巴原虫等8种DNA无交叉反应,最低能检测0.2 fg的阳性质粒DNA,对临床样本的检出率比传统方法（饱和蔗糖漂浮法和改良抗酸染色法）提高2.3%~3.4%。可见,该巢式PCR方法具有较高的特异性和敏感性,对于环孢子虫病的诊断和分子流行病学调查具有重要的应用价值。
- 高振永李国清岳彩玲程家林朱海波李结
- 关键词：巢式PCR
- 犬源环孢子虫的ITS-1序列鉴定被引量：1
- 2011年
- 目的对犬粪中新发现的环孢子虫进行分子鉴定。方法在GenBank中登录的环孢子虫18S和5.8S rDNA序列的保守区设计一对引物ITS-1+F/ITS-1+B,扩增犬源环孢子虫ITS-1+序列;将扩增产物纯化并连接到质粒载体pMD19-T,克隆转入感受态细胞JM109,挑选阳性克隆测序并进行相似性比较和种类鉴定。结果犬源环孢子虫ITS-1+序列长为547bp,包含58bp的18S rDNA序列,333bp的ITS-1序列和156bp的5.8S rDNA序列。其中的18S rDNA和5.8S rDNA与艾美耳科原虫的相似性最大;其中的ITS-1序列与人源环孢子虫、牛源环孢子虫、狒狒源环孢子虫均不相同。结论该犬源环孢子虫可能为环孢子虫属的一个新种。
- 岳彩玲李国清程家林高振永朱海波李结
- 关键词：PCR分子鉴定
- 猪圆环病毒2型诊断方法的研究进展
- 2012年
- 猪圆环病毒2型是断奶仔猪多系统衰竭综合征(PWMS)的主要致病因子,此外,猪皮炎肾病综合征(PDNS)、仔猪先天性震颤(CT)等疾病也证实与PCV-2有关。在临床上PCV-2相关疾病也严重地制约着全世界养猪业的发展,现已成为国内外学者研究的热点。根据实验室的具体情况采取合适的诊断方法是诊断该病的关键,本文就其近年来诊断方法的研究进展进行了简要综述。
- 李结
- 关键词：猪圆环病毒2型
