李翀
- 作品数:70 被引量:78H指数:5
- 供职机构:中国科学院生物物理研究所更多>>
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- 相关领域:医药卫生生物学农业科学政治法律更多>>
- 中华眼镜蛇毒膜毒素诱导膀胱癌细胞凋亡的检测被引量:5
- 2006年
- 目的研究中华眼镜蛇毒膜毒素(MT-12)诱导膀胱癌细胞的凋亡作用,比较检测凋亡的几种方法。方法MT-12作用于体外培养的人膀胱癌(BIU-87)细胞,HE染色、Hoechest33342荧光染色、透射电镜观察凋亡细胞的形态变化,DNA琼脂糖凝胶电泳观察DNA片段,AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞术定量检测凋亡率。结果3种形态学检测方法均能观察到细胞凋亡的形态学变化。3μg/mLMT作用2、4、8、12、24h和36h,双染法流式细胞术检测的细胞凋亡率分别是46.94%、51.2%、28.85%、20.43%、6.03%和5.19%,阴性对照组凋亡率为0.77%。DNA电泳未能检测到细胞凋亡的DNAladder。结论MT-12能诱导体外培养的BIU-87细胞凋亡,且具有时间依赖性。透射电镜观察凋亡细胞的形态特征最可靠。AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞术定量检测细胞凋亡,其特异性、敏感性、重复性和准确性高。
- 颜汝平王剑松李翀谢蜀生王婉瑜徐鸿毅
- 关键词:膀胱肿瘤凋亡
- 一种用于膀胱癌筛查的长链非编码RNA的检测及其应用
- 本发明涉及一种用于膀胱癌筛查的长链非编码RNA的检测及其应用,具体是利用长链非编码表达谱芯片技术,通过差异分析,筛选到一条在人膀胱癌组织中显著高表达的lncRNA,命名为lncRNA‑AC1。与正常组织相比,lncRNA...
- 范祖森李翀杜颖杨昭何璐云王彦英阎新龙朱平平
- 文献传递
- 抗人颗粒酶M的单克隆抗体和杂交瘤细胞株
- 本发明提供了一种产生抗人颗粒酶M单克隆抗体的杂交瘤细胞及其分泌的单克隆抗体,特别是M0428,该单克隆抗体与重组人颗粒酶M及表达人天然颗粒酶M的细胞呈强阳性反应,而与其它不表达颗粒酶M的细胞无交叉反应。本发明还提供了包含...
- 范祖森李翀吴连锋刘圣武唐海东王丽张红莲侯强王德朋
- 文献传递
- 重组腺病毒AdCTLA4-FasL联合供者骨髓细胞输注促进混合嵌合体形成和小鼠皮肤移植耐受被引量:2
- 2005年
- 在不对受体去髓处理的情况下,用重组腺病毒AdCTLA4-FasL结合供者骨髓移植诱导混合嵌合体和同种皮肤移植耐受,结果显示,获得了持久宏嵌合体(macrochimerism)(140d时,供体细胞>20%).同时,这种嵌合体促进了稳定的供体特异性耐受,BALB/c小鼠的皮肤移植物在B6受体小鼠中长期存活(平均存活时间(themeansurvivaltime,MST)大于200d),而来源于ICR小鼠的第三者皮肤移植物被该嵌合体小鼠正常排斥.用该方法处理的B6小鼠在接受皮肤移植14d后,辅助性T淋巴细胞前体(HTLp)和细胞毒T淋巴细胞前体(CTLp)的频数降低到很低的水平,表明AdCTLA4-FasL能够迅速促进全面的外周耐受,从而有利于供体骨髓细胞植入.接受皮肤移植140d后,供体皮肤仅在形成长期嵌合体的受体小鼠中继续存活,这些小鼠体内供体特异性的HTLp和CTLp的频数减少,提示长期的皮肤移植物耐受与稳定的混合嵌合体有关,中枢性T细胞删除可能是耐受维持的主要机制.
- 奉友刚王光明郝洁李爱玲袁国红李翀曾甫清谢蜀生
- 关键词:移植耐受混合嵌合体CTLA4-FASL重组腺病毒嵌合体耐受
- 一种早期诊断膀胱癌的试剂盒及其制备方法
- 本发明涉及生物医学免疫分析领域,本发明利用微孔板化学发光免疫分析法,通过检测人尿液中的膀胱癌肿瘤标志物——异常糖基化的整合素AG-α3β1建立一种快速、灵敏、高特异性的早期诊断膀胱癌的检测试剂盒。本发明的试剂盒具有简便、...
- 范祖森杜颖李翀张倩云王彦英杨昭周鹏
- 人免疫重建NOD/SCID小鼠模型的建立被引量:1
- 2011年
- 目的探讨NOD/SCID(nonobese diabetic/severe combined immunodeficien)t小鼠人免疫重建模型的建立方法和免疫特性.方法 16只NOD/SCID小鼠随机分成实验组和对照组,每组8只.Ficoll密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),通过腹腔注射移植给实验组小鼠,空白对照组小鼠每只腹腔注射无菌PBS,第4、8和12周时,流式细胞术检测小鼠外周血中人的CD3+T、CD19+B淋巴细胞,ELISA法测定小鼠血清中人IgG含量,免疫组织化学染色检测小鼠脾脏和肝脏中人CD3+T、CD19+B淋巴细胞浸润情况.结果移植PBMC 4周后,实验组NOD/SCID小鼠外周血中人CD3+T、CD19+B的细胞分别为85.6%、76.7%,并且在小鼠脾脏组织中也可以检测到人CD3 T、CD19 B淋巴细胞.移植4、8及12周后小鼠血清中人IgG含量分别达到(863±12.5)μg/mL、(1217±16.7)μg/mL、(958±13.1)μg/mL.结论用人外周血PBMC经腹腔注射可以成功建立人免疫重建NOD/SCID小鼠模型,方法简便可靠.
- 颜汝平李翀周海滨王剑松袁国红赵献
- 关键词:NOD/SCID小鼠动物模型人外周血单核细胞
- 五味清浊散对3T3-L1细胞TNF-α浓度和基因表达的影响被引量:2
- 2008年
- 目的:观察五味清浊散(WQS)对脂肪细胞血糖浓度和TNF-α水平及其mRNA其表达的影响。方法:药物处理48h后,采用GOD-POD法检测3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗(IR)模型培养液中葡萄糖浓度,ELISA法检测TNF-α浓度,RT-PCR法检测TNF-α基因mRNA的表达。结果:WQS使脂肪细胞IR模型培养液葡萄糖、TNF-α浓度降低,并下调TNF-α基因mRNA的表达。结论:WQS有显著的降糖作用,并下调TNF-α水平。
- 包照日格图却翎万春平宋娜丽唐志国李翀
- 关键词:五味清浊散
- 荷人膀胱癌原位移植瘤裸小鼠动物模型的建立被引量:6
- 2006年
- 目的建立模拟人的原位裸小鼠模型,评价抗人膀胱癌免疫毒素临床前的疗效。方法将体外培养的人移行细胞癌细胞系(BIU-87)原位移植于经酸处理的裸小鼠膀胱内,定期用核磁共振成像(MRI)检查,并进行解剖、组织学检查和免疫细胞化学的检测。结果在第7~36天内,成瘤率为92.9%(52/56);其中第12~13天处死的裸小鼠中,95.2%(40/42)发展成移行细胞癌,以浅表性为主。组织学检查证实为Ⅱ~Ⅲ级;免疫细胞化学证实,该模型具有BIU-87细胞的特征。在肿瘤的发生发展中,MRI检查的结果与组织学检查的结果密切相关。接种后第7~9天可以检测出原位癌(CIS),其后发展成乳头状瘤或浸润性疾病。结论模拟人的原位裸小鼠模型重复性好,是临床前研究膀胱灌注治疗的理想模型。
- 李翀颜汝平袁国红奉友刚王剑松高翔黄岩山周金宝谢蜀生
- CELL-SELEX筛选膀胱癌核酸适配体的细胞学研究
- 2020年
- 目的基于膀胱癌标志物的早期诊断和术后复发监测方法是目前的研究热点。文中利用CELL-SELEX技术筛选出可特异性识别膀胱癌细胞系(EJ、T24、BIU87)的核酸适配体。方法以人膀胱癌细胞系EJ、T24和BIU87为阳性质控细胞,以HCV29(人正常尿路上皮细胞系)、293T(人胚肾细胞系)、huh7(人肝癌细胞系)为阴性质控细胞,进行CELL-SELEX筛选。PCR上游引物5’端标记FITC,下游引物5’端标记Biotin,将每一轮次筛选得到的ssDNA作为模板进行PCR扩增、纯化。利用生物素-链亲和素磁珠分离法将PCR纯化产物进行分离后获得次级FITC-ssDNA用于下一轮次的筛选,流式细胞仪监测CELL-SELEX筛选进程。选取与膀胱癌细胞系EJ、T24和BIU87结合率最高轮次的ssDNA文库进行PCR扩增、产物纯化、分子克隆和测序;根据测序结果,利用Dnaman软件模拟核酸适配体的二级结构。体外合成FITC标记的适配体,流式细胞仪检测适配体与EJ、T24和BIU87的结合率。结果随着CELL-SELEX流程的推进,FITC-ssDNA与EJ、T24和BIU87细胞的结合率逐渐增加;第15轮FITC-ssDNA与EJ结合率最高,文库中apt1富集度最高;第18轮FITC-ssDNA与T24、BIU87结合率最高,文库中apt2和apt3富集度最高。DNA结构预测分析显示apt1、apt2和apt3的二级结构主要为茎环结构。流式细胞仪检测:FITC-apt1可特异性识别EJ细胞,阳性率达71.5%。FITC-apt2与T24细胞的结率明显高于BIU87细胞。FITC-apt3与BIU87细胞的结合率明显高于T24细胞。FITC-apt2可特异性识别T24细胞,阳性率达63.9%。FITC-apt3可特异性识别BIU87细胞,阳性率达74.7%。结论利用CELL-SELEX技术筛选出可识别膀胱癌细胞系的适配体。其中适配体apt1可特异性识别EJ细胞,适配体apt2可特异性识别T24细胞,适配体apt3可特异性识别BIU87细胞,为膀胱癌早期诊断和靶向治疗技术的研发提供了实验依据。
- 平秦榕李翀梁剑伟刘杨文易雷容王剑松颜汝平
- 关键词:膀胱癌适配体
- 一种抗2‑溴苯丙酮的单克隆抗体及其应用
- 本发明涉及一种抗2‑溴苯丙酮的单克隆抗体及其应用,具体地,本发明所提供杂交瘤细胞株MabBP1,其产生的抗2‑溴苯丙酮单克隆抗体及所述抗体在检测2‑溴苯丙酮中的用途。
- 李翀范祖森乐加昌杜颖徐倩杨昭何璐云朱虹
- 文献传递