李运娜
- 作品数：10 被引量：32H指数：4
- 供职机构：吉林大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 鸡球虫ADF重组卡介苗及制备方法
- 本发明提供了一种鸡球虫<B>ADF</B>重组卡介苗，同时还提供了该疫苗的的制备方法，获得鸡柔嫩艾美耳球虫卵囊，提取RNA，反转录成cDNA，根据已克隆的柔嫩艾美耳球虫ADF基因序列的开放阅读框设计引物进行PCR，与PM...
- 张西臣李建华李运娜宫鹏涛程柏淇张国才杨举李赫陈玉江任文陟
- 文献传递
- 柔嫩艾美耳球虫ADF基因重组卡介苗的构建及其免疫保护性研究
- 柔嫰艾美尔球虫是一种寄生在细胞内的顶复门原虫，可引起鸡球虫病的发生。该病被认为是危害养禽业的主要疾病。柔嫰艾美尔球虫主要寄生在鸡的盲肠内，可引起鸡的体重下降，甚至可导致鸡的死亡，给养殖业带来严重的经济损失。目前，预防和治...
- 李运娜
- 关键词：重组卡介苗IL-2基因免疫保护性
- 文献传递
- 弓形虫亲环蛋白基因的克隆及原核表达被引量：3
- 2010年
- 目的克隆并原核表达刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)亲环蛋白(Cyclophilin,CyP)基因。方法收集、纯化Rh株弓形虫速殖子,提取总RNA,应用RT-PCR技术扩增TgCyP基因,插入原核表达载体pET-28a中,构建重组表达质粒pET-28a-TgCyP,转化E.coliBL21(DE3),经IPTG诱导后,进行SDS-PAGE和Western blot分析。结果测序结果与GenBank中登录的基因序列同源性为100%,重组表达质粒pET-28a-TgCyP经PCR及双酶切鉴定证明构建正确。SDS-PAGE分析表明,重组蛋白的相对分子质量约为26000,表达量约占菌体总蛋白的40%,Western blot显示其能被鼠抗弓形虫免疫血清识别。结论已在E.coliBL21(DE3)中表达了Rh株TgCyP,其有望作为弓形虫疫苗的候选抗原。
- 李运娜于钦磊李建华宫鹏涛李赫张西臣
- 关键词：刚地弓形虫亲环蛋白原核细胞基因表达
- 弓形虫亲环蛋白亚单位疫苗的免疫保护性研究被引量：6
- 2011年
- 目的研究弓形虫亲环蛋白(Cyclophilin,CyP)亚单位疫苗的免疫保护性。方法 30只BALB/c小鼠随机分为3组:实验组、佐剂组和PBS对照组,分别肌注pET-28a-TgCyP重组蛋白100μg/只、佐剂100 ul/只和PBS 100 ul/只,共免疫3次,每次间隔2周。末次免疫后2周,各组分别取4只小鼠处死,取脾脏,检测CD4+、CD8+及细胞因子。同时,采用阿尔玛蓝细胞增殖与细胞毒性检测试剂测定小鼠脾淋巴细胞的增殖应答。其余小鼠腹腔攻击感染Rh株弓形虫速殖子500个,观察其存活情况。结果 pET-28a-TgCyP重组蛋白亚单位疫苗能诱发小鼠产生细胞免疫和体液免疫反应,小鼠的CD4+T细胞(62.59±4.17)%、CD8+T细胞(8.53±0.46)%与PBS及佐剂对照组比较显著增殖(P<0.01),其脾细胞培养液白细胞介素-2(IL-2)、γ干扰素(IFN-γ)显著升高,小鼠脾淋巴细胞增殖应答显著增强(P<0.01)。弓形虫攻击感染216 h后,实验组小鼠免疫保护率为33.3%,佐剂对照组及PBS对照组小鼠均全部死亡。结论 pET-28a-TgCyP重组蛋白亚单位疫苗具有较强的免疫原性,能产生良好的免疫保护作用。
- 黄金贵李运娜宫鹏涛杨举李赫李淑红张国才张西臣李建华
- 关键词：刚地弓形虫亲环蛋白亚单位疫苗免疫保护
- 鸡球虫病疫苗的研究进展被引量：5
- 2011年
- 鸡球虫病是一种主要由艾美耳属球虫引起的细胞内寄生原虫病,给养禽业带来巨大的经济损失。鸡球虫病一直以药物防治为主,但耐药虫株以及药物残留等问题使药物防治受到很大限制,因此,研制安全有效的疫苗成为防治鸡球虫病的主要策略之一。鸡球虫病疫苗包括活疫苗、核酸疫苗、亚单位疫苗、重组卡介苗和佐剂疫苗,本文就鸡球虫病疫苗的研究现状作一综述。
- 黄金贵李运娜张西臣
- 关键词：球虫病疫苗
- 鸡球虫ADF重组卡介苗及制备方法
- 本发明提供了一种鸡球虫<B>ADF</B>重组卡介苗，同时还提供了该疫苗的制备方法，获得鸡柔嫩艾美耳球虫卵囊，提取RNA，反转录成cDNA，根据已克隆的柔嫩艾美耳球虫ADF基因序列的开放阅读框设计引物进行PCR，与PMD...
- 张西臣李建华李运娜宫鹏涛程柏淇张国才杨举李赫陈玉江任文陟
- ADF-IL-2基因重组卡介苗的构建及免疫保护效果被引量：4
- 2013年
- 构建柔嫩艾美尔球虫ADF基因和鸡IL-2基因的重组卡介苗,并研究其免疫保护性。将柔嫩艾美尔球虫的ADF基因和鸡的IL-2基因串联后连接到至穿梭表达载体pMV261和整合表达载体pMV361中,电转化卡介苗,制备重组卡介苗pMV261-ADF-IL-2和pMV361-ADF-IL-2,将构建的基因重组卡介苗分别以不同免疫途径接种雏鸡,研究其对柔嫩艾美耳球虫的攻毒的免疫保护效果。结果显示,成功构建重组rBCG pMV261-ADF-IL-2和pMV361-ADF-IL-2,且rBCG滴鼻免疫组的免疫效果较好,其抗球虫指数分别为176.08和172.89。结果表明,构建的基因重组卡介苗pMV261-ADF-IL-2和pMV361-ADF-IL-2对柔嫩艾美尔球虫卵囊的攻击具有一定的保护作用。
- 侯洪烈张许科李运娜孙进忠李建华宫鹏涛李赫杨举张西臣
- 关键词：柔嫩艾美耳球虫ADF基因重组卡介苗免疫保护
- 柔嫩艾美耳球虫ADF基因重组卡介苗的构建及其免疫保护性研究被引量：8
- 2012年
- 目的构建鸡柔嫩艾美耳球虫ADF基因重组卡介苗并研究其免疫保护性。方法应用RT-PCR技术扩增柔嫩艾美耳球虫ADF基因完整开放阅读框,克隆至pMD18-T载体中;分别用限制性内切酶PstⅠ/ClaⅠ和PvuⅡ/ClaⅠ进行双酶切,ADF目的基因克隆至大肠埃希菌-分枝杆菌穿梭表达载体pMV261和整合表达载体pMV361中,获得重组质粒pMV261-ADF和pMV361-ADF,重组质粒电穿孔转化卡介苗。将构建的重组卡介苗pMV261-ADF和pMV361-ADF疫苗通过滴鼻、口服、颈部皮下注射3种途径接种雏鸡,BCG免疫组作为对照。免疫后经口接种柔嫩艾美耳球虫卵囊,通过抗球虫指数(ACI)评价重组卡介苗疫苗的保护效果。结果重组卡介苗pMV261-ADF和pMV361-ADF采用滴鼻方式免疫保护效果较好,ACI值分别为161.47和169.21。结论构建的重组卡介苗pMV261-ADF和pMV361-ADF对柔嫩艾美耳球虫卵囊的攻击具有一定的免疫保护作用。
- 李运娜黄金贵李建华宫鹏涛田甜李赫杨举张国才陈玉江张西臣
- 关键词：柔嫩艾美耳球虫
- 弓形虫病疫苗研究进展概述被引量：7
- 2011年
- 弓形虫是一种专性细胞内寄生原虫,能引起人畜共患弓形虫病,严重威胁着人类健康且对畜牧业的发展造成巨大的经济损失。研制安全有效的疫苗是防制弓形虫病的策略之一。目前,弓形虫病疫苗包括灭活疫苗、减毒活疫苗、核酸疫苗、亚单位疫苗和卡介苗。本文对弓形虫病疫苗的研究现状进行了综述。
- 李运娜黄金贵张西臣
- 关键词：弓形虫疫苗
- 刚地弓形虫亲环蛋白基因TgCyP真核表达质粒的构建及其在Hela细胞内的表达被引量：2
- 2011年
- 亲环蛋白(cyclophilin,CyP)是一类广泛存在于原核和真核生物体内的胞溶性蛋白,是刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)速殖子的主要成分,能够诱导产生IL-12和IFN-γ,在控制弓形虫急性感染过程中起重要作用。本研究根据GenBank发表的TgCyP基因序列,设计并合成一对包含BamHⅠ和EcoRⅠ酶切位点的引物,以cDNA为模板,应用PCR技术扩增TgCyP基因。PCR产物连接到pMD18-T克隆载体。用限制性内切酶BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切克隆载体,将TgCyP目的基因克隆到载体pVAX1,构建真核表达质粒pVAX1-TgCyP。将真核表达质粒转染Hela细胞,利用间接免疫荧光检测其在Hela细胞内的表达情况。结果表明扩增的TgCyP基因与GenBank上相应基因序列(U04633.1)的一致性达100%,构建的真核表达质粒pVAX1-TgCyP能在转染的Hela细胞中表达,其表达产物与刚地弓形虫阳性血清具有免疫反应性。本研究表明Tg-CyP有望作为弓形虫疫苗的候选抗原,将为进一步研究该质粒的动物免疫试验奠定基础。
- 李运娜黄金贵李建华宫鹏涛杨举李赫李淑红张西臣
- 关键词：刚地弓形虫真核表达
