杨亦桦
- 作品数：55 被引量：281H指数：11
- 供职机构：南京农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划公益性行业(农业)科研专项更多>>
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- 棉铃虫细胞色素P450 CYP9A12基因5′-上游区的克隆及序列分析被引量：9
- 2008年
- 细胞色素P450基因CYP9A12的过量表达已被证实与棉铃虫Heliocverpa armigera对拟除虫菊酯的抗性相关。为探明棉铃虫CYP9A12基因的表达调控机理,根据棉铃虫CYP9A12基因cDNA全长的5′-末端核苷酸序列,采用基因组步移方法,获得CYP9 A12的5′-上游区序列(总长为3575bp)。与cDNA序列进行比对,表明在起始密码子上游3bp处有一长为2124bp的内含子。利用NNPP分析软件预测出转录起始位点,与根据CYP9A12全长cDNA序列推测的结果是一致的。TFSEARCH 1.3软件分析转录因子结合位点的结果显示,该序列不仅包含启动子的核心结构序列——TATA-box和CAAT-box,亦包含多个转录因子结合位点,如GATA-1,CdxA,Dfd等。本研究结果为深入研究棉铃虫CYP9A12的表达调控机制及其参与杀虫剂抗性的分子机理奠定了一定基础。
- 周颖君杨亦桦武淑文吴益东
- 关键词：棉铃虫细胞色素P450基因组步移
- 甜菜夜蛾田间种群对甲氨基阿维菌素苯甲酸盐和高效氯氰菊酯的代谢抗性机制被引量：9
- 2012年
- 甜菜夜蛾Spodoptera exigua(Hübner)云南晋宁、上海奉贤和江苏六合种群对甲氨基阿维菌素苯甲酸盐抗性为45～437倍,对高效氯氰菊酯抗性为211～555倍,对其它药剂抗性不明显。这3个田间种群3龄幼虫多功能氧化酶、谷胱甘肽S-转移酶和酯酶的活力分别为室内敏感种群的2.7～8.4倍、1.9～8.6倍和1.6～5.7倍。多功能氧化酶抑制剂PBO和酯酶抑制剂DEF对甲氨基阿维菌素苯甲酸盐的增效比为1.2～4.3和1.3～7.7;PBO和DEF对高效氯氰菊酯的增效比为1.8～58和3.6～245;谷胱甘肽S-转移酶抑制剂DEM对这2种药剂均无增效作用。上述结果表明,解毒代谢增强可能是甜菜夜蛾田间种群对甲氨基阿维菌素苯甲酸盐和高效氯氰菊酯的重要抗性机理,与酯酶和多功能氧化酶活性升高有关,与谷胱甘肽S-转移酶活性升高无关。本文的研究结果还表明,对于代谢抗性机理复杂的多抗性田间种群,根据不同解毒酶抑制剂对药剂的增效作用判断不同解毒代谢酶在抗性形成中的作用更加可靠。
- 侍甜车午男吴益东杨亦桦
- 关键词：甜菜夜蛾甲氨基阿维菌素苯甲酸盐高效氯氰菊酯多功能氧化酶谷胱甘肽S-转移酶
- 棉铃虫田间种群Bt毒素Cry1Ac抗性基因频率的估算被引量：22
- 2007年
- 采用改进的F1筛查法检测了2005年采自华北地区的棉铃虫Helicoverpaarmigera(H櫣bner)田间种群对Bt毒素Cry1Ac的抗性基因频率。2005年从河南安阳和河北沧县转Bt基因抗虫棉上采集二代棉铃虫卵,在室内用人工饲料饲养至2龄幼虫,用1μg/cm2的Cry1Ac活化毒素进行初筛,将初筛存活成虫与室内筛选的GYBT抗性品系成虫进行单对杂交,并用区分剂量(2·5μg/cm2)对F1代进行检测。经检测,2005年河南安阳棉铃虫种群和河北沧县棉铃虫种群对Cry1Ac抗性基因频率基本一致,分别为1·4×10-3和1·5×10-3。用毒素涂表法测定了2004、2005年采自河南安阳、河北高阳、河北沧县、新疆阿克苏和新疆沙湾棉铃虫田间种群对Cry1Ac活化毒素的敏感性水平,结果表明华北棉区与新疆内陆棉区棉铃虫种群对Cry1Ac的敏感性存在一定的地区性差异(<8倍)。总体上,我国华北棉区棉铃虫种群对Cry1Ac还未产生明显抗性,抗性基因频率处于正常水平。棉铃虫对转Bt基因抗虫棉的抗性风险依然存在,需要尽快启动全国性的早期抗性检测和预警工作。
- 陈海燕杨亦桦武淑文杨亚军吴益东
- 关键词：棉铃虫转BT基因棉CRY1AC抗性检测
- 用HPLC测定稻褐飞虱体内的保幼激素被引量：17
- 1997年
- 用反相高效液相色谱法检测了稻褐飞虱３－５龄若虫和雌成虫体内的保幼激素滴度。３－５龄若虫体内检出ＪＨ２含量为１．８３×１０－３μｇ／ｍｇ、ＪＨ３含量为７．５５×１０－５μｇ／ｍｇ，短翅型雌成虫中检出ＪＨ３含量为１．４８×１０－４μｇ／ｍｇ。本方法测定的全过程标准回收率ＪＨ１、ＪＨ２、ＪＨ３分别是８０％、９３．７％、８５％。
- 杨亦桦戴华国韩航如王鸣华
- 关键词：稻褐飞虱若虫虫体保幼激素雌成虫
- 有机磷/拟除虫菊酯混剂筛选棉铃虫品系的交互抗性和生化机理(英文)被引量：5
- 2008年
- 用辛硫磷/氟氯氰菊酯(25:1,有效成分)混剂对棉铃虫田间种群(HN)进行33代筛选获得抗性品系(HN-R)。筛选获得的HN-R抗性品系对辛硫磷和氟氯氰菊酯的抗性分别达17.4倍和144.7倍。HN-R品系对两种拟除虫菊酯产生了高水平交互抗性(对氯氰菊酯和氰戊菊酯分别为86.2和23.4倍),对久效磷产生了中等水平交互抗性(5.2倍),对甲基对硫磷(1.6倍)、丙溴磷(1.8倍)和灭多威(2.4倍)产生了低水平交互抗性。酯酶抑制剂DEF能有效抑制HN-R品系对辛硫磷的抗性(增效比为15.3倍),而多功能氧化酶抑制剂PBO则对辛硫磷没有任何增效作用;PBO则使HN-R品系对3种拟除虫菊酯的抗性显著降低(对氟氯氰菊酯、溴氰菊酯和氰戊菊酯的增效比分别为21.9、19.1和21.4倍)。DEF和PBO都能使HN-R对久效磷的抗性下降一半(增效比分别为2.2和2.5倍)。HN-R抗性品系多功能氧化酶活性(以pNA为底物)和酯酶活性(以a-NA为底物)分别为HN品系的6.5倍和1.6倍。因此,在HN-R抗性品系中至少存在2种代谢抗性机理,即增强的酯酶解毒代谢(对辛硫磷、久效磷)和多功能氧化酶介导的氧化解毒代谢(对3种拟除虫菊酯、久效磷)。本研究表明,在田间使用有机磷/拟除虫菊酯混剂可能同时选择出多种代谢抗性机理,从而导致广谱的交互抗性。
- 杨亦桦陈松吴益东
- 关键词：棉铃虫交互抗性抗性机理多功能氧化酶
- 小菜蛾糖基转移酶基因的克隆、序列分析及在不同发育阶段的表达
- 2010年
- 根据秀丽小杆线虫Caenorhabditis elegans及其他昆虫中糖基转移酶基因的同源序列,采用逆转录PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)和cDNA末端快速扩增PCR(rapid amplification of cDNA ends PCR,RACE-PCR)技术从小菜蛾Plutella xylostella4龄幼虫中肠组织中获得了3个基因的全长序列,其开放阅读框长度分别为1383bp,1230bp和1041bp,分别编码460,409和346个氨基酸,将其分别命名为Pxbre-3,Pxbre-4和Pxbre-5(GenBank登录号分别是GU321343,GU321344和GU321345)。同源序列比对发现,这些基因和线虫中相应的糖基转移酶基因具有较高相似度,且具有对糖基转移酶活性起关键作用的氨基酸保守模块,也包含类似的跨膜区。由此推测,这3个基因为小菜蛾糖基转移酶基因,参与小菜蛾鞘糖脂的合成。实时定量PCR检测结果表明,这3个基因以及Pxbre-2在小菜蛾4龄幼虫、蛹和成虫以及4龄幼虫中肠组织均有表达,在蛹和成虫阶段表达量较高。本实验结果为今后研究鞘糖脂是否参与小菜蛾对Bt毒素的抗性奠定了基础。
- 包宏伟吴益东杨亦桦
- 关键词：小菜蛾鞘糖脂糖基转移酶MRNA表达
- RNAi介导的棉铃虫氨肽酶N基因Haapn1和钙粘蛋白基因Ha_BtR沉默对Cry1Ac毒力的影响被引量：5
- 2010年
- 氨肽酶N(aminopeptidase N,APN)和钙粘蛋白(cadherin)是存在于鳞翅目昆虫中肠刷状缘膜囊(brush bordermembrane vesicles,BBMV)上Bt毒素Cry1A的受体。本实验将棉铃虫Helicoverpa armigera氨肽酶N1基因Haapn1和钙粘蛋白基因Ha_BtR双链RNA(dsRNA)注入棉铃虫4龄幼虫体内,以研究这两种受体基因沉默后对Cry1Ac毒力的影响。结果表明:注射dsRNA(1μg/头)进行基因沉默后,Haapn1mRNA表达量比注射缓冲液(elution solution,ES)的对照下降了30%～49%,Ha_BtRmRNA表达量下降了30%～37%。注射Haapn1dsRNA的幼虫在40和70μg/cm2Cry1Ac活化毒素下的死亡率显著低于注射ES的幼虫,而在100和170μg/cm2Cry1Ac原毒素处理下两者死亡率无显著差异;Cry1Ac活化毒素以及原毒素对注射Ha_BtRdsRNA幼虫与注射ES幼虫的毒力均无显著差异。当同时注射Haapn1及Ha_BtRdsRNA后,干扰后的幼虫对Cry1Ac活化毒素和原毒素的敏感性均显著下降。本研究进一步证明了棉铃虫Haapn1和Ha_BtR均是Bt毒素Cry1Ac的功能受体,这两种受体蛋白共同参与Cry1Ac的毒杀作用过程。该结果也提示,Haapn1或Ha_BtR基因产生突变都可能导致棉铃虫对Cry1Ac产生抗性。
- 周慧丹杨亦桦吴益东
- 关键词：棉铃虫原毒素氨肽酶N钙粘蛋白
- 棉铃虫(Helicoverpa armigera H bner)对溴氰菊酯抗药性研究
- 杨亦桦
- 草地贪夜蛾抗药性概况及其治理对策被引量：53
- 2019年
- 草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda(J.E.Smith)是一种原产于美洲热带和亚热带地区的世界性害虫,主要为害玉米、高粱、花生和大豆等作物。多食性、高繁殖力、迁飞能力强和易产生抗药性等生物学特性强化了草地贪夜蛾的害虫地位。草地贪夜蛾于2019年1月入侵中国云南等地后迅速蔓延扩散至十多个省份。喷施化学杀虫剂是我国当前有效防控草地贪夜蛾的重要手段,但入侵我国的草地贪夜蛾已携带对有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂的抗性基因,因此需要加强抗药性监测工作,并依据抗药性水平进行精准选药。本文对草地贪夜蛾抗药性测定方法、抗药性发生概况以及抗药性机制进行了综述,并对我国草地贪夜蛾抗药性测定方法和治理策略提出建议。
- 吴益东沈慧雯张正王兴亮施雨武淑文杨亦桦
- 关键词：抗药性监测抗药性机制抗药性治理
- 绿盲蝽乙酰胆碱酯酶A216S突变快速分子检测方法
- 本发明公开了一种基于环介导恒温扩增技术LAMP建立一种对绿盲蝽乙酰胆碱酯酶A216S突变的快速检测方法，属于害虫抗药性分子检测和害虫综合防治范畴。本技术旨在解决绿盲蝽乙酰胆碱酯酶A216S突变的快速分子检测，并由此判断绿...
- 武淑文沈慧雯梁常安杨亦桦王兴亮
- 文献传递
