杨淑珂
- 作品数：59 被引量：90H指数：6
- 供职机构：山东省农业科学院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项转基因生物新品种培育专项国家自然科学基金更多>>
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- 转植酸酶基因(PhyA2)玉米对家蚕肠道微生物多样性的影响
- 2014年
- 以转植酸酶玉米10TPY005、非转植酸酶亲本玉米蠡玉35的花粉分别饲喂家蚕3个龄期,取3龄末期家蚕利用Biolog-Eco法分别从其肠道微生物群落多样性的平均颜色变化率(AWCD值)、四种碳源利用率、群落代谢功能多样性指数(Shannon、Simpson和Mc Intosh指数)及主成分分析四个方面进行指标测定,从而研究转植酸酶玉米对家蚕肠道环境菌群多样性的影响。结果表明:转植酸酶玉米花粉喂食的家蚕与亲本玉米花粉喂食和空白对照两组家蚕相比,上述各指标总体无显著性差异,即转植酸酶玉米对家蚕肠道微生物多样性未造成明显影响。
- 郭颖慧孙红炜李凡杨淑珂杨正友路兴波
- 关键词：家蚕
- 转cry1Ab/cry2Aj和G10evo-epsps基因玉米中Bt蛋白的时空表达及抗性评价被引量：9
- 2018年
- 【目的】探讨转cry1Ab/cry2Aj和G10evo-epsps基因玉米双抗505-12-5中外源Bt蛋白时空表达规律,对3种主要鳞翅目害虫亚洲玉米螟、黏虫和棉铃虫的抗性进行鉴定,为转基因玉米双抗505-12-5的商业化推广提供科学的数据支撑。【方法】Bt蛋白时空表达规律采用酶联免疫法(ELISA),田间抗虫性和室内抗虫性鉴定分别采用田间人工接虫和离体组织生测方法。【结果】在玉米6~8叶期,Bt含量表现为根>心叶>茎,分别为517.3、453.8和312.8 ng·g^(-1);大喇叭口期,Bt含量表现为心叶>根>茎,分别为353.3、281.3和232.9 ng·g^(-1);吐丝期,Bt含量表现为心叶>根>茎,分别为188.9、114.1和53.6 ng·g^(-1);乳熟期,根、茎和心叶含量相当,分别为178.0、160.3和185.4 ng·g^(-1);繁殖器官中Bt蛋白含量表现为籽粒>花丝>花粉>雄穗,分别为181.3、100.1、95.0和79.8 ng·g^(-1)。室内抗虫性鉴定表明,转基因玉米双抗505-12-5心叶饲喂黏虫24 h,幼虫死亡率低,但48 h后达98.21%;双抗505-12-5心叶、花丝和籽粒饲喂玉米螟,24 h幼虫死亡率分别为87.37%、100%、100%;双抗505-12-5花丝饲喂棉铃虫,24 h幼虫死亡率达80.18%,48 h死亡率为92.45%。田间鉴定结果显示,转基因玉米双抗505-12-5在心叶期和雌穗期对玉米螟、心叶期对黏虫、雌穗期对棉铃虫的抗性均达高抗水平。【结论】转基因玉米双抗505-12-5各器官在不同生育期中均能表达Bt蛋白,尤其在鳞翅目害虫为害的主要时期6~8叶期和吐丝期及乳熟期,易受害器官中Bt蛋白表达量较高。转基因玉米双抗505-12-5田间及室内对3种鳞翅目害虫均表现了显著的抗性效果,具有推广应用的潜力。
- 孙红炜李凡高瑞徐晓辉杨淑珂路兴波
- 关键词：BT蛋白抗性评价
- 用于检测转基因玉米MIR162的特异性引物、探针及其应用
- 本发明公开了一种用于检测转基因玉米MIR162的特异性引物，其序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。本发明还公开了一种用于检测转基因玉米MIR162的荧光标记探针，序列如SEQ ID NO.3所示，探...
- 路兴波张广远孙红炜李凡杨淑珂
- 文献传递
- 转基因大豆BPS-CV127-9转化事件外源插入载体旁侧基因及其应用
- 本发明公开了转基因大豆BPS-CV127-9转化事件外源插入载体旁侧基因，其序列如序列表中1所示。本发明的转基因大豆BPS-CV127-9转化事件外源插入载体旁侧基因可以用于特异性定性检测大豆及相关产品是否含有BPS-C...
- 路兴波孙红炜李宁李凡杨淑珂
- 文献传递
- 转基因抗虫玉米的定量检测被引量：1
- 2014年
- 建立高效、快速、准确的抗虫转基因玉米MIRl62转化体特异性实时荧光PCR（real—timePCR）检测方法。采用SYBRGreenI和Taqman探针2种定量方法对抗虫转基因玉米MIRl62进行了检测研究。SYBRGreenI法MIRl62转化体特异性片段和内标基因zSSIlb的熔解曲线均表现为单一峰，扩增特异性强；二者的扩增效率均在90％100％之间，标准曲线相关系数帮均大于0．998。2种定量方法的检测限（LOD）均为24个拷贝，定量限旺D0为48个拷贝，灵敏度较高。重复测试结果表明，SYBRGreenI法的标准偏差（㈣变化范围为0．05～0．13，相对标准偏差（RSD）范围为0．17％～0．40％，Taqman探针法的SD变化范围为0．03～0．14，RSD范围为0．11％～0．44％，说明2种定量检测方法具有良好的重复性和精密度。对MIRl62含量为3％、1％和0．5％的混合样品的定量结果为：3．13％、1．09％、0．53％（SYBRGreenI法）和3．07％、1．02％、0．50％（Taqman探针法），RSD均小于10％，T检验分析表明2种定量方法定值结果差异不显著。本研究建立的2种实时荧光定量PCR均可有效对转基因玉米MIRl62进行定量检测，可根据不同实际需求及实验室条件进行选择相应的检测方法。
- 孙红炜李凡杨淑珂张广远路兴波
- 关键词：转基因抗虫玉米SYBRITAQMANREAL-TIMEPCR
- 特异性识别枣疯植原体的兔抗多克隆抗体的制备方法及其应用试剂盒
- 本发明属于枣疯植原体检测领域，尤其涉及特异性识别枣疯植原体的兔抗多克隆抗体的制备方法及其应用试剂盒。本发明所提供的特异性识别枣疯植原体的兔抗多克隆抗体主要应用于枣疯病的检测，其制备方法包括以下有效步骤：a、从感染枣疯植原...
- 高瑞王洁杨淑珂李凡路兴波
- 用于检测转基因玉米MIR162的特异性引物及荧光标记探针及其应用
- 本发明公开了一种用于检测转基因玉米MIR162的特异性引物，其序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。本发明还公开了一种用于检测转基因玉米MIR162的荧光标记探针，序列如SEQ ID NO.3所示，探...
- 孙红炜张广远李凡杨淑珂路兴波
- 文献传递
- 转基因玉米MIR162转化事件特异性检测方法及其标准化被引量：9
- 2013年
- 转基因玉米MIR162是美国先正达公司开发的新型抗鳞翅目昆虫的转基因玉米品种。本研究目的在于建立该品系转化事件特异性定性、定量检测方法并形成定性检测国家标准。定性PCR体系经实验室内部比对及实验室间循环验证结果表明,该体系特异性强,灵敏度较高(0.1%),具有良好的重复性和再现性。TaqMan探针实时荧光PCR检测结果表明,所设计的探针特异性强,检测低限(LOD)在0.01%以下;定量标准曲线R2均为0.999,扩增效率为98.622%和99.602%,SD范围为0.014～0.209,RSD的范围为0.049%～0.879%,稳定性好;对转基因含量为1.0%、0.5%、0.1%的样品定量结果相对偏差在8.0%以内,结果较为准确。本研究建立的方法完全可用于含转基因玉米MIR162成分样品的检测。
- 张广远孙红炜李凡杨淑珂路兴波赵蕾
- 巯基化单链DNA在聚合酶链式反应中的应用
- 本发明公开了巯基化单链DNA在增强聚合酶链式反应特异性扩增中的应用，即：利用巯基化单链DNA增强聚合酶链式反应特异性扩增的方法：将适量巯基化单链DNA加入PCR反应体系中进行PCR扩增；所述适量指在20μL反应体系中巯基...
- 路兴波张广远孙红炜李凡杨淑珂高瑞徐晓辉
- 文献传递
- 一种衰老控制microRNA530基因及其转基因植物和应用
- 本发明公开了一种衰老控制microRNA530基因及其转基因植物和应用。本发明的一种衰老控制microRNA530成熟体基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明的一种衰老控制microRNA530前体基因的核...
- 徐晓辉孙伟路兴波孙红炜李凡高瑞杨淑珂
- 文献传递
