汪亚平
- 作品数:139 被引量:544H指数:14
- 供职机构:中国科学院水生生物研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学农业科学医药卫生文化科学更多>>
- 转反义sGnRH基因败育鲤鱼的性成熟诱导被引量:3
- 2005年
- 采用反义转基因技术已成功获得整合CAsGnRHpc-antisense基因的转基因鲤鱼,简称AS-sGnRH F0鲤鱼。通过挤压1年龄AS-sGnRH F0鲤鱼的腹部,发现该群体中有精液/无精液个体比例为33/69,与对照组鲤鱼中有精液/无精液个体比例接近1:1相比存在显著差异。通过注射鲤鱼垂体抽提物诱导无精液AS-sGnRH F0鲤鱼恢复繁殖功能,获得3尾育性被恢复的AS-sGnRH F0鲤鱼。进一步的解剖观察发现,在无精液AS-sGnRH F0鲤鱼群体中,完全无性腺的AS-sGnRH F0鲤鱼比例约31.3%。根据直观的挤精液和解剖学观察,推测在AS-sGnRH F0鲤鱼群体中,雄鱼:雌鱼:“脂肪型”性腺个体的比例大约为35:45:20%。受精卵发育12 h后,统计A、B、C系AS-sGnRH F0鲤鱼精子的受精率分别为73.94、59.45和64.05%。从A、B、C系杂交后代F1分别随机取样100尾,PCR检测的阳性率分别为0、78.1和87.8%。研究结果表明通过补充外源激素可以使促性腺激素分泌不足而不育的AS-sGnRH F0鲤鱼恢复具有产生成熟配子的能力。
- 黎双飞胡炜汤斌汪亚平朱作言
- 关键词:反义RNA鲤鱼性腺发育
- 应用雄性激素诱导异育银鲫性转化的研究被引量:10
- 2000年
- 用丙酸睾丸素溶液浸泡行雌核发育的异育银鲫(Allogynogeneticcruciancarp)胚胎10~14天 ,诱导出了11.0 %~13.6 %的雄性鱼和10.5 %~27.3 %的兼性鱼。对50日龄的异育银鲫幼鱼投喂甲基睾丸素4个月 ,再继续饲养182~335天 ,诱导出了20 %以上的雄性鱼。此外 ,部分实验鱼两侧卵巢的大小出现明显差异。
- 张甫英胡炜汪亚平朱作言
- 关键词:雄性激素
- 快速生长转基因鲤鱼中试
- 朱作言汪亚平胡炜张西瑞冯建新司开松张甫英崔宗斌陈尚萍甄建设叶新太曾志强孙永华李启金
- 在转基因鱼理论模型(朱作言等,1989)指导下,以本实验室构建的、具有自主知识产权的、全部由我国鲤科鱼类基因元件组成的“全鱼”GH基因重组体pCAgcGH和pCAgcGHc为基因工程定向育种转移基因,培育出快速生长的转“...
- 关键词:
- 关键词:中试
- 草鱼生长激素在毕赤酵母中的高效分泌表达被引量:29
- 2003年
- 为大量获得具有生物学活性的草鱼生长激素 ,对草鱼生长激素cDNA在毕赤酵母中的表达进行了研究。将草鱼生长激素cDNA克隆入毕赤酵母表达载体pGAPZ α B ,构建表达载体pGAPZ α B GH。在三磷酸甘油醛脱氢酶 (GAP)启动子的调控作用下 ,一个类似于天然生长激素大小、分子量约 2 2kD的蛋白获得表达 ,其表达量约 5 0mg L。Western杂交表明 :表达的蛋白与兔抗草鱼生长激素的多克隆抗体特异结合 ,证实该表达蛋白为草鱼生长激素 ;受体夹心式ELISA检测表明 :表达的草鱼生长激素具生物学活性 。
- 王伟孙永华汪亚平朱作言
- 关键词:毕赤酵母ELISA
- Cu^(2+)、Zn^(2+)诱导稀有鮈鲫应激蛋白质的研究被引量:14
- 2001年
- 以稀有鲫为材料 ,研究了应激蛋白质作为生物学指标的敏感性。结果表明 ,在无可观察效应浓度下 ,经 5d亚慢性胁迫暴露 ,以Cu2 +为胁迫因子 ,稀有鲫被诱导出约 54KDa的应激蛋白质 ;以Zn2 +为胁迫因子 ,稀有鲫被诱导出约 94KDa ,67KDa和 40KDa的应激蛋白质。应激蛋白质有可能成为一种生物学指标运用于生态风险性早期预警。
- 胡炜汪亚平周永欣
- 关键词:生物指标敏感性
- 转生长激素基因三倍体鲤鱼的快速生长与不育特性被引量:13
- 2010年
- 将转草鱼生长激素基因黄河鲤(♂)与改良四倍体鲫鲤(♀)交配,获得100%三倍体子代"鲤鱼".通过特异引物PCR检测,子代鲤鱼包括转基因(简称阳性鱼)和非转基因(简称阴性鱼)两部分,其中阳性鱼占总检测鱼数的44.2%;染色体检测表明,子代转基因鲤鱼的染色体数目为3n=150;组织切片结果表明性腺不能发育成熟;在同龄的鲤鱼繁殖季节(24月龄),转基因三倍体鲤鱼仍不能产生成熟配子.阳性和阴性三倍体鲤鱼在形态上无明显差异,它们的体侧扁,近似纺锤形,体色青灰,有两对口须,大部分可测量性状和可数性状都介于父母本之间,表现出杂种特征.2年同塘养殖结果表明,阳性鱼的平均体重为阴性鱼的2.3倍;其中最大阳性鱼个体的体重为最大阴性鱼的2.91倍.因此,本研究不仅证实了转基因三倍体鲤鱼的生长快速特性,而且第一次用实验消除了转基因鲤鱼养殖应用上的生态安全之虑.
- 于凡肖俊梁向阳刘少军周工建罗凯坤刘筠胡炜汪亚平朱作言
- 关键词:鲤鱼二倍体三倍体不育性
- 一种壳聚糖甲基睾酮缓释药条的制备方法
- 本发明公开了一种壳聚糖甲基睾酮缓释药条的制备方法,其步骤是:A.将壳聚糖配成水溶液,过滤;B.将壳聚糖溶液与甲基睾酮按一定比例混匀;C.用注射器推入NaOH凝固液中,放置一定时间后,取出;D.连续用蒸馏水漂洗,烘烤,即成...
- 胡炜朱作言黎双飞汪亚平
- 文献传递
- 非同源重组方式在外源基因整合中起主要作用:转全鱼基因鲤鱼宿主基因组旁侧序列分离及其特征分析
- 将酶切去掉质粒骨架的转全鱼基因载体显微注射到鲤鱼受精卵中,获得转全鱼基因鲤鱼,剪取成鱼鳍条,提取基因组DNA,采用基因组步移方法分离到10个下游片段,序列分析表明,10个片段均是以串联体形式整合进宿主基因组。其中7个片段...
- 戴军胡炜黎双飞汪亚平朱作言
- 文献传递
- 转GH基因鲤鱼生殖生长特性及其调控机制初步研究
- 以转GH基因鲤鱼(转基因鲤)为研究对象,对其生殖生长特性及调控机制进行了初步研究。采用组织切片、Real-time PCR、western、ELISA等方法,对转基因鲤和对照鲤性腺发育、生殖生长相关因子的周年变化情况进行...
- 曹梦西汪亚平李勇明廖兰杰朱作言胡炜
- 关键词:生殖青春期启动
- 文献传递
- 两端包含LoxP位点的表达GFP蛋白的质粒及其构建方法和应用
- 本发明公开了两端包含LoxP位点的表达GFP蛋白的质粒及其构建方法和应用,该质粒的构建方法包括:S1:在GFP表达元件两侧设计两个不同类型的同向LoxP位点;S2:将两个不同LoxP位点分别连入正反向引物,以pEGFP‑...
- 黄容桂彬李勇明杨诚廖兰杰汪亚平