王凤龙 作品数:116 被引量:251 H指数:8 供职机构: 内蒙古农业大学兽医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 内蒙古自治区自然科学基金 北京市农林科学院青年基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 文化科学 更多>>
猪繁殖与呼吸综合征自然病例病理学研究 通过对内蒙古地区某猪场该病的发病情况调查和病理变化的观察研究,初步描述了该病自然病例的一些临床症状和病理组织学变化,并在此基础上对猪繁殖与呼吸综合征组织学变化加以研究和探讨,为猪繁殖与呼吸综合征的诊治与研究提供依据。方法... 赵素微 王凤龙 冯专照 刘永宏关键词:猪繁殖与呼吸综合征 自然病例 病理学研究 文献传递 TNF-α对培养奶牛乳腺上皮细胞凋亡的影响 【目的】研究肿瘤坏死因子-α对体外培养的奶牛乳腺上皮细胞凋亡的影响,从细胞凋亡的角度为乳房炎的防治提供可靠的理论根据和重要的实验依据。【方法】以0.1ng/mL、1ng/mL、5ng/mL、10ng/mL、50ng/mL... 吴娟 王申元 王凤龙关键词:肿瘤坏死因子-Α 凋亡 乳腺上皮细胞 文献传递 山西黄土高原地区羊消化道蠕虫感染现状与防治对策 2010年 对山西黄土高原地区羊消化道主要寄生虫进行了调查,调查结果表明:在该地区,消化道寄生虫感染率最高可达100%,且常为数种寄生虫混合感染,有的虫种感染强度最高达8 000条/只。依据此次寄生虫病调查结果有针对性地对寄生虫病流行特点和防治现状进行分析,提出了加强羊群寄生虫病控制的综合性防治措施。 王瑞 丁玉林 王仲兵 杜长春 王金玲 刘兴国 焦光月 郭彦 王凤龙 杨晓野关键词:寄生虫 消化道 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒BJBLZ株序列剖析 被引量:2 2011年 预测与分析HP-PRRSV BJBLZ株序列特点,为进一步该毒株的研究做准备。利用分子生物学软件及服务器,对HP-PRRSV BJBLZ株全序列及各结构蛋白的生化特性、溶解性和核定位信号等进行了分析,结果显示HP-PRRSV BJBLZ株至少可划分12个非结构蛋白和6个结构蛋白;同源性比较显示GP3和GP5蛋白变异性高,M和N蛋白保守。GP3、GP5和M蛋白糖基化位点与参考株有变化,GP2、GP4和N蛋白糖基化位点与所有参考株一致。服务器预测显示,N蛋白的碱性氨基酸比例明显高于其他蛋白,总平均亲水值明显低于其他蛋白;GP2、GP3和GP4蛋白不稳定,GP5、M和N蛋白稳定。6个结构蛋白预测不溶性概率均占66%以上,GP3不溶性概率最高。可以利用以上一些不同于以往各代表株的特点,为PRRS的诊断和防治进行进一步的研究。 刘永宏 赵丽 刘俊峰 王凤龙 刘月焕关键词:高致病性 猪繁殖与呼吸障碍综合征 鸡包涵体性肝炎肿瘤坏死因子α基因mRNA表达的研究 应用分子克隆获得的鸡肿瘤坏死因子α基因片段,通过地高辛标记制备DNA核酸探针,核酸原位杂交检测鸡包涵体肝炎病毒Hb株在感染鸡组织细胞的肿瘤坏死因子α mRNA的表达水平,结果表明,Hb株感染雏鸡后,在肝脏、脾脏、胸腺、法... 王凤龙 葛金英关键词:肿瘤坏死因子Α 包涵体肝炎 核酸探针 原位杂交 文献传递 马传染性贫血病毒强毒株gag和gp45基因的体内进化分析 2012年 为研究马传染性贫血病毒(EIAV)强毒株体内进化规律,将3匹马分别以1×105 TCID50/匹接种EIAVLN40强毒株后,在不同时间点采取外周血,分离单核白细胞。提取白细胞中的DNA,并以其为模板,应用套式PCR技术分别扩增EIAV前病毒DNA的p15,p9和gp45基因,经克隆后进行序列分析。结果显示,与接种前EIAVLN40相比较,p15基因核苷酸和氨基酸平均差异率分别为1.8%(0~2.9%)和1.7%(0~3.6%);p9分别为2.5%(0.3%~3.8%)和2.9%(0~4.8%);gp45-Ⅰ分别为1.3%(0.3%~2.1%)和1.8%(0~3.2%),gp45-Ⅱ分别为2.1%(0~3.4%)和2.6%(0~4.7%)。在EIA发热期,每个基因核苷酸和氨基酸差异率最小;在亚临床阶段,每个基因平均差异率总体上相对较高。氨基酸变异位点分析发现,发病期(2-2、3-1)各基因氨基酸序列回复到亲本株EIAVLN40,其余时期p15基因氨基酸稳定变异位点16N/S、88T/S和112M/E;p9基因115E/G和122K/M;gp45-Ⅰ基因9T/F/L;gp45-Ⅱ基因21E/K和29G/S。此外,p15基因进化树结果显示,发热期(2-2、3-1)p15基因序列与EIAVLN40序列处于同一分支上,亚临床阶段大多数p15基因序列处于另一个大分支上;其他基因进化情况与p15基因类似。对EIAV p15、p9、gp45基因体内进化分析,有助于对EIAV在马体内感染进程的研究,为进一步研究EIAV持续感染和逃避免疫监视的机制提供参考。 刘强 王雪峰 王珊珊 韦华冕 杜承 林跃智 马建 周建华 王凤龙关键词:马传染性贫血病毒 P15基因 含有TNF-α的奶牛乳腺炎乳汁对奶牛乳腺上皮细胞凋亡影响 本研究探讨含有TNF-α的奶牛乳腺炎乳汁对奶牛乳腺上皮细胞凋亡的影响.经奶牛乳腺上皮细胞体外培养后,用含有不同浓度的TNF-α的奶牛乳腺炎乳汁作用,分别于不同时间用流式细胞仪检测细胞凋亡情况.结果表明,体外培养奶牛乳腺上... 杨磊 王凤龙关键词:肿瘤坏死因子 奶牛 上皮细胞 凋亡 文献传递 Location of Highly Pathogenic Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus in Tissues of Natural Cases 被引量:15 2009年 [ Objective] The aim of this study was to provide a theoretical basis for the prevention and treatment of highly pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome (HP-PRRS). [Method] Antigen location and histopathological observation in natural cases infected by highly pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome virus (HP-PRRSV) were analyzed by immunohistochemistry and H. E. staining. [Result] The virus antigen mainly existed in epithelial calls, and also a few in mecrophages, lymphocytes and brain nerve cells. [ Conclusion] The cell and tissue tropism of HP-PRRSV strain in natural cases is different from that of previous strains. 刘永宏 赵丽 韩春华 王凤龙 刘月焕 林健 杨汉春 郭鑫 李栋梁 韦海涛 祝俊杰 赵景义 赵振华 马明 杨龙峰 王金玲关键词:IMMUNOHISTOCHEMISTRY 奶牛乳腺上皮细胞和成纤维细胞的体外培养与鉴定 被引量:14 2012年 为体外培养纯化出稳定的奶牛乳腺上皮细胞和成纤维细胞,试验通过外科手术的方法取妊娠后期或泌乳期的荷斯坦奶牛乳腺组织,分离乳腺腺泡,用组织块法体外培养奶牛乳腺细胞,应用差时胰酶消化法和差速贴壁法将奶牛乳腺上皮细胞和成纤维细胞分别纯化出来,并用免疫组化的方法对细胞的纯度进行鉴定。结果表明:纯化的奶牛乳腺上皮细胞多为多角形,细胞核呈圆形或椭圆形,核仁清晰可见,多呈鹅卵石样或铺路石样生长,并可分泌乳滴,角蛋白-18反应阳性,波形蛋白反应阴性;纯化的奶牛乳腺成纤维细胞多为长梭形,呈旋涡状或放射状生长,角蛋白-18反应阴性,波形蛋白反应阳性;经纯化后2种细胞的纯度均可达95%以上,可满足后续试验的要求。 丁旭娜 王凤龙 丁玉林 杨磊 李瑜 尹景峰 赵占宽关键词:奶牛乳腺上皮细胞 成纤维细胞 原代培养 免疫组织化学 LA-PCR技术及其优势 被引量:3 2007年 上世纪90年代发展起来的LA-PCR (Long and accurate polymerase chain reaction)技术,以其扩增片段长,保真性(Fidelity)高的独特优势,被广泛地用于基因组测序、遗传多态性分析、病毒的遗传变异分析、病毒拯救、病理诊断等多个方面。本文将对LA-PCR技术的基本原理和其独特的优势作一综述。 王雪峰 王凤龙 周建华关键词:PCR技术 遗传变异分析 病毒拯救 基因组测序 多态性分析 病理诊断