王长晔
- 作品数：10 被引量：21H指数：3
- 供职机构：南开大学更多>>
- 发文基金：天津市科技发展战略研究计划项目国家自然科学基金天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 肝癌转移相关基因的分离及其基因疫苗的研究
- 叶丽虹张晓东吴莲英秦宵然刘新元王洪辉尤嘉琮吴晶辉王长晔徐少峰
- 采用SCID（Severe Combined Immunodeficiency，SCID）小鼠，建立了人肝癌SCID小鼠转移模型，从转移的肺组织中经原代培养获得了新的人肝癌高转移倾向的细胞系（M-H7402），并进行了生...
- 关键词：
- 关键词：肝癌转移相关基因基因疫苗
- 应用乳腺癌转移相关基因基因芯片建立筛选抗乳腺癌转移药物的方法
- 本发明公开了一种应用乳腺癌转移相关基因基因芯片建立筛选抗乳腺癌转移药物的方法，与以往筛选抗肿瘤转移药物的方法相比，该方法包括：首先在抗乳腺癌转移药物作用下，通过流式细胞仪观察候选抗癌药物抑制高转移倾向的乳腺癌LM－MCF...
- 张晓东叶丽虹王长晔吴莲英
- 文献传递
- 肌球蛋白轻链激酶基因调控在肿瘤细胞转移中的作用
- 叶丽虹张晓东王洪辉吴莲英刘新元尤嘉琮王长晔郭威蔡娜吴晶辉
- 该研究在建立严重联合免疫缺陷鼠（SCID）的肿瘤转移动物模型后，筛选、获得并鉴定了一株乳腺癌高转移细胞系，命名为LM-MCF-7，与其亲本的MCF-7细胞形成了“转移-高转移”的配对关系。然后，以LM-MCF-7细胞系和...
- 关键词：
- 关键词：肿瘤转移肌球蛋白轻链激酶反义核酸
- 建立并应用肿瘤转移相关基因芯片筛选抗肿瘤转移药物
- 王长晔
- 关键词：肿瘤转移肿瘤转移相关基因基因芯片药物筛选
- 与人乳腺癌转移相关基因的分离和分离方法
- 本发明公开了一种高精确度、高通量筛选筛选乳腺癌转移相关基因的分离方法。本发明方法通过建立具有高转移倾向的转移亚克隆LM－MCF－7细胞系与其亲本人乳腺癌细胞系MCF－7形成配对细胞系作为实验样本，不仅可随时无限量培养获得...
- 叶丽虹张晓东尤嘉琮王长晔
- 文献传递
- 人胎儿骨髓间充质干细胞的分离及生物学鉴定被引量：3
- 2006年
- 通过原代细胞培养,从引产胎儿骨髓组织中分离干细胞,然后进行生物学鉴定,旨在体外建立培养胎儿骨髓干细胞的有效方法,为进一步研究干细胞奠定基础．本研究对四个月的引产胎儿骨髓组织进行原代细胞培养,采用贴壁筛选法,在含有15％胎牛血清的L-DMEM／IMDM(1:1)混和培养液中培养,7 d后细胞可长满瓶底．显微镜下观察,细胞形态均一,呈长梭形．传代后,在8代以内的细胞贴壁能力较强,生长速度较快．将其命名为BMMS-03．在第3代时,对培养的细胞进行了于细胞标志物的生物学鉴定,采用流式细胞仪对经免疫荧光染色的细胞进行检测．结果显示:97．2％的细胞呈CD105阳性反应,66．0％的细胞呈CD106阳性反应, 9．2％的细胞呈CD34阳性反应．阴性对照组阳性反应为0．5％．生物学鉴定的初步结果提示,从胎儿骨髓组织中分离培养成功的细胞为骨髓间充质干细胞,其细胞形态学特征、CD105+、CD106+和CD34-的检测结果均符合间充质干细胞的特征．本研究成功地建立了体外培养胎儿骨髓间充质干细胞的有效方法,所获得的间充质干细胞纯度较高,增殖较快,适用于干细胞生物学和组织工程学的研究．
- 张晓东徐治立叶丽虹东楠赵春华蔡兵王洪辉吴晶辉王长晔蔡娜
- 关键词：骨髓间充质干细胞胎儿流式细胞术干细胞标志物
- 应用SCID鼠筛选肝癌转移性亚克隆及M-H7402亚细胞系的建立被引量：6
- 2004年
- 本研究应用人肝癌细胞SCID鼠转移模型,筛选和建立肝癌转移细胞系,旨在为肝癌转移研究提供实验材料.采用人肝癌细胞H7402,腋后背部皮下接种SCID鼠,接种后66天时,在荷瘤鼠羸弱时引颈处死,取其肺组织,进行原代细胞培养和传代培养,获得肝癌细胞H7402的亚细胞克隆,命名为M-H7402.然后,对M-H7402细胞进行了生物学鉴定,检测了细胞形态、染色体、细胞动力学、细胞周期、甲胎蛋白表达、癌基因表达和转移相关基因表达等指标.结果显示,M-H7402细胞的生长、增殖和形态等与亲本细胞H7402十分相近,其染色体形态仍为人类核型,众数维持在72～80之间,占75.0%.RT-PCR检测结果显示,M-H7402细胞甲胎蛋白表达为阳性.Western blot检测结果显示,与亲本细胞H-7402相比,癌基因C-myc表达水平较高,转移抑制基因nm23的表达水平明显下调.从肺组织中获得的肝癌转移细胞系M-H7402,在体外可连续传代培养,细胞形态不变.应用SCID鼠筛选获得的亚细胞克隆,与亲本细胞形成配对关系,可为肝癌细胞转移的研究提供新的实验材料.
- 叶丽虹秦宵然张晓东王洪辉蒋斯明王长晔吴晶辉朱惠芳赵轼轩蔡兵
- 关键词：肝癌肿瘤转移SCID鼠细胞系癌基因
- 花生四烯酸诱导肌球蛋白磷酸化被抑制的平滑肌细胞迁移的信号传导途径
- 2006年
- 在应用肌球蛋白轻链激酶特异抑制剂ML-7抑制了肌球蛋白轻链磷酸化后,花生四烯酸(arachidonicacid,AA)仍可诱导兔血管平滑肌细胞(SM3)发生迁移.为了进一步阐明其信号传导途径,应用多种信号抑制剂,采用免疫印迹、Boyden小室和提取细胞膜蛋白等实验方法,对上述迁移作用的信号传导途径进行了深入的研究.结果显示,PTX(Gi蛋白抑制剂)、U73122(PLC抑制剂)、staurosporine(PKC抑制剂)、PD98059(ERK1/2抑制剂)和SB203580(p38抑制剂)分别可拮抗上述AA诱导的SM3细胞迁移作用,而SP600125(JNK抑制剂)的作用较弱.免疫印迹结果显示,AA可提高SM3细胞中PKC(ε)、ERK1/2、p38和JNK信号的磷酸化水平,呈时间依赖性,PTX或U73122可抑制上述作用;staurosporine可抑制由AA引起的ERK1/2和JNK的磷酸化水平增强,但对p38的磷酸化水平无影响.还发现AA可促进PLCβ2的细胞膜移位,PTX可抑制其作用.上述结果表明,当肌球蛋白轻链的磷酸化被抑制后,AA可通过Gi蛋白的活化促进PLCβ2向细胞膜移位,进而通过激活PKC(ε)、ERK1/2、p38和JNK等信号转导途径而诱导SM3细胞发生迁移.
- 吴晶辉叶婷婷王洪辉周晓雷米达吴莲英王长晔郭威张伟英张晓东叶丽虹
- 关键词：花生四烯酸平滑肌细胞细胞迁移信号传导途径
- 应用基因表达谱芯片从不同转移能力的乳腺癌细胞中筛选转移相关基因被引量：12
- 2005年
- 人乳腺癌细胞系MCF-7及其转移亚克隆LM-MCF-7为肿瘤转移分子机制的研究提供了细胞模型.应用基因芯片技术比较两种具有不同转移能力细胞系基因表达谱的差异,寻找乳腺癌转移相关基因.提取两种细胞总RNA,分别用Cy5-dCTP、Cy3-dCTP标记LM-MCF-7和MCF-7的cDNA,并与含有21329个基因的芯片进行杂交并扫描,利用GenePixPro4.0图像分析软件处理数据判断基因是否在两个细胞中存在表达差异.经互换荧光标记物重复两次实验,共筛选出差异表达基因67个,其中41个在LM-MCF-7细胞中表达上调,26个在LM-MCF-7细胞中表达下调.应用实时定量RT-PCR对7个表达差异明显的基因进行了验证.生物信息学分析结果提示,上述发现的差异基因编码产物与细胞内信号转导、转录调节、应激反应、新陈代谢、发育、细胞运动、细胞凋亡和细胞粘连等功能有关.据文献报道,这些差异表达的基因中有35个与肿瘤有关,其中9个与乳腺癌转移有关,6个可能参与肿瘤浸润和转移过程.根据基因芯片检测的结果,从功能上对LM-MCF-7细胞和MCF-7细胞与细胞凋亡的关系进行了研究,发现具有高转移倾向的LM-MCF-7细胞与MCF-7细胞相比,抗凋亡能力较强.上述与肿瘤转移相关基因在肿瘤转移中的作用及其分子机理有待深入研究.
- 叶丽虹尤嘉琮乔玲蔡娜王长晔刘毅吴晶辉吴莲英王洪辉张晓东
- 关键词：基因芯片基因表达谱乳腺癌
- 乳腺癌转移相关基因基因芯片的建立及其建立方法
- 本发明公开了一种乳腺癌转移相关基因基因芯片的建立及其建立方法，该方法制备的基因芯片中包含的基因共有218个，其中有应用我们建立的高转移倾向的人乳腺癌细胞系LM－MCF－7细胞系(获国家发明专利，ZL 03130264.5...
- 叶丽虹张晓东王长晔
- 文献传递
