石丁波
- 作品数：4 被引量：17H指数：1
- 供职机构：中山大学肿瘤防治中心华南肿瘤学国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广州市科技计划项目国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 具有抗血管新生活性的K5突变体GST-K5M5基因的构建、表达及纯化被引量：1
- 2013年
- 目的构建可溶性的人纤溶酶原Kringle 5(K5)突变体GST-K5M5基因,并在单位体积的原核系统中获得高表达、高纯度、可水溶的融合GST-K5M5蛋白粉针剂。方法 K5M5突变体基因(模板已经对K5N端5个带负电的酸性氨基酸进行中性氨基酸丝氨酸的中性突变),通过PCR从本实验室保存的pET22b(+)/K5mut5 cDNA模板中扩增得到,再克隆到pGEX-4T-1/BL21(DE3)原核表达系统中。用自动诱导培养系统诱导其表达,提高产量。通过GST树脂亲和层析柱分离,双蒸水透析纯化,再制成冻干粉剂保存。结果该重组GST-K5M5蛋白的分子量为37000Mr,通过SDS-PAGE和Western-blot可以检测到其存在。冻干粉复溶的GST-K5M5呈剂量依赖抑制内皮细胞的增殖。结论在以前的研究基础上设计并用自动诱导培养的方法在大肠杆菌中表达纯化出了GST-K5M5融合蛋白,得到的GST-K5M5蛋白产量高、纯度高、可溶性好、生物学效应强,且方法简便、经济,为工业大规模发酵提供了基本参数。
- 黄莉钧石丁波姚亚超李磊戴智育张婷高国全杨霞
- 关键词：冻干粉
- 藏红花素诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡及其作用机制被引量：16
- 2009年
- 目的:研究藏红花素对HeLa细胞的促凋亡作用和机制。方法:设置0、0.2、0.4及0.8mmol/L4个浓度梯度,MTT法分析不同浓度藏红花素对HeLa细胞增殖的影响;设置空白阴性对照及秋水仙素(10μg/L)阳性对照,向HeLa细胞培养物分别加入0.4和0.8mmol/L的藏红花素,培养48h后用PI/AnnexinⅤ双染法分析其凋亡情况;1.6mmol/L藏红花素作用于HeLa细胞72h后,蛋白质印迹法检测Caspase-3的切割。结果:MTT实验分析显示,在0、0.2、0.4及0.8mmol/L浓度下HeLa细胞存活率分别为1、0.964、0.796和0.586。藏红花素显著地抑制HeLa细胞生长,P<0.05;各浓度组间均差异有统计学意义,P<0.05。PI/AnnexinⅤ双染法、流式细胞仪检测显示,阴性对照组、10μg/L秋水仙素阳性对照组、0.4及0.8mmol/L藏红花素处理组的细胞凋亡率分别为3.64%、15.99%、4.86%和9.28%,藏红花素促进HeLa细胞凋亡。蛋白质印迹法检测显示,藏红花素促进HeLa细胞Caspase-3切割。结论:藏红花素可明显地抑制HeLa细胞生长,并通过增加HeLa细胞Caspase-3切割促进其凋亡。
- 龚青石丁波蔡卫斌杨中汉谭维格廖彩韵彭超刘畅高国全杨霞
- 关键词：HELA细胞细胞凋亡半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶
- 去除外源氨基酸的K5突变体设计与功能研究
- 血管增生(angiogenesis)是指在原有血管网基础上形成新的毛细血管的过程。又被称作为血管新生(neovascularization)。在创伤、月经周期以及外周循环闭塞等情况下血管增生具有恢复血供和促进伤口愈合的积...
- 石丁波
- 关键词：血管增生肿瘤治疗细胞凋亡原核表达
- 文献传递
- S100A9蛋白表达与甲状腺乳头状癌细胞增殖、迁移和侵袭关系的研究
- 2021年
- 目的探究S100A9蛋白与甲状腺乳头状癌细胞增殖、迁移及侵袭的关系。方法采用Western blot检测S100A9在甲状腺乳头状癌细胞株与正常细胞中的表达。建立敲低S100A9模型,并采用MTS、细胞克隆形成、划痕实验、Transwell迁移实验及皮下成瘤实验检测敲低S100A9对甲状腺乳头状癌细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响。结果 S100A9在甲状腺乳头状癌细胞中的表达较正常细胞中表达高。MTS法、克隆形成实验及裸鼠皮下肿瘤种植表明,敲低S100A9抑制了甲状腺乳头状细胞的增殖(P<0.05)。划痕实验、Transwell实验表明敲低S100A9抑制了甲状腺乳头状细胞的迁移和侵袭(P<0.05)。结论敲降S100A9能够在体外抑制甲状腺乳头状癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力,在体内能够抑制皮下种植肿瘤的生长。
- 骆小华石丁波陈文宽
- 关键词：甲状腺乳头状癌S100A9增殖迁移
