- 播娘蒿与甘蓝型油菜的原生质体融合与植株再生被引量：14
- 2005年
- 以播娘蒿叶片和甘蓝型油菜子叶为材料提取原生质体。采用PEG—高pH、高钙附加DMSO融合方法,液体浅层静置培养,研究影响播娘蒿与甘蓝型油菜原生质体融合的因素,获得了再生植株。结果表明:4%纤维素酶+0.5%离析酶+5mmol/L MES酶解10h可获得高产率播娘蒿原生质体,1%纤维素酶+0.2%离析酶+3mmol/LMES酶解14h可获得高产率油菜原生质体;30%PEG+0.3mol/L葡萄糖+50mmol/L CaC l2.2H2O+15%DMSO可获得10%的融合率;改良B5培养基的原生质体培养效果最好;最佳分化培养基为MS+4.0mg/L 6-BA+0.3mg/LNAA+5.0mg/L AgNO3;最佳生根培养基为MS+0.1mg/L IBA+0.1mg/L NAA。
- 姜淑慧管荣展董海滨杜文明
- 关键词：播娘蒿双低油菜
- 一种蛋白酶抑制剂基因及其编码的蛋白质
- 本发明公开了蛋白酶抑制剂基因cDNA序列及其编码蛋白质序列，属于基因工程领域和蛋白工程领域。播娘蒿蛋白酶抑制剂基因DsTI－1的cDNA序列SEQ ID NO.1及其编码的氨基酸序列SEQ ID NO.2。本发明基因为双...
- 管荣展董海滨张红生王建飞
- 文献传递
- 用播娘蒿蛋白酶抑制剂基因转化油菜的研究(英文)
- 对从播娘蒿角果cDNA文库大量测序,筛选到一个编码蛋白酶抑制剂基因的cDNA序列,命名为DsTI1,全长512bp,含有一个309bp组成的开放阅读框。列比对表明,DsTI1与拟南芥ATTI2、油菜RTI、白芥MTI-2...
- 杜文明黄骥张红生管荣展董海滨
- 文献传递
- 播娘蒿蛋白酶抑制剂基因DsTI2转化油菜的研究被引量：3
- 2007年
- 通过播娘蒿角果的cDNA文库克隆测序,得到1个蛋白酶抑制剂基因序列,命名为DsTI2。该基因编码一个含有100个氨基酸残基肽链,含有保守活性位点环"CAPRIFPSFC"。利用农杆菌介导,将DsTI2导入甘蓝型油菜品系NJ5424中。PCR和RT-PCR检测证明外源基因已导入到油菜基因组中,且能正常表达。酶活性分析表明,转基因油菜叶片蛋白酶抑制剂对胰蛋白酶和糜蛋白酶的抑制活性明显高于对照。初步抗虫实验表明,喂食转基因油菜叶片的菜青虫幼虫生长缓慢、死亡率升高。
- 杜文明管荣展王建飞张红生唐三元董海滨
- 关键词：播娘蒿抗虫油菜
- 一种甜菜碱醛脱氢酶基因及其编码的蛋白质
- 本发明公开了一种甜菜碱醛脱氢酶基因及其所编码的蛋白质，属于基因工程领域。播娘蒿甜菜碱醛脱氢酶基因(DsBADH)的cDNA序列SEQ ID NO.1及其编码的氨基酸序列SEQ ID NO.2。本发明基因为双子叶植物播娘蒿...
- 管荣展董海滨张红生王建飞王庆亚
- 文献传递
- 一种甜菜碱醛脱氢酶基因及其编码的蛋白质
- 本发明公开了一种甜菜碱醛脱氢酶基因及其所编码的蛋白质，属于基因工程领域。播娘蒿甜菜碱醛脱氢酶基因DsBADH的cDNA序列SEQ ID NO.1及其编码的氨基酸序列SEQ ID NO.2。本发明基因为双子叶植物播娘蒿的首...
- 管荣展董海滨张红生王建飞王庆亚
- 文献传递
- 双低油菜品种华双3号幼叶全长cDNA文库的构建
- 本文以甘蓝型双低油菜为材料,构建了全长cDNA文库,为油菜基因克隆和苗期发育的分子生物学研究打基础,具有重要意义.
- 董海滨管荣展
- 关键词：油菜CDNA文库油料作物
- 文献传递
- 播娘蒿角果全长cDNA文库的构建与分析被引量：5
- 2005年
- 以播娘蒿成熟期角果为材料,采用SMART技术构建了其全长cDNA文库。该文库的原始滴度为1.49×106pfu/ml,重组率为91.42%,扩增后文库滴度为1.15×109pfu/ml,随机挑取10个噬菌斑,PCR扩增插入片段,其长度为800～2000bp,表明所构建的文库达到了目的基因分离和克隆的要求。
- 董海滨管荣展姜淑慧张红生
- 关键词：全长CDNA文库播娘蒿角果SMART技术基因分离重组率
- 一种蛋白酶抑制剂基因及其编码的蛋白质
- 本发明公开了蛋白酶抑制剂基因DNA序列及其编码蛋白质序列，属于基因工程领域和蛋白工程领域。播娘蒿蛋白酶抑制剂基因DsTI-1的cDNA序列SEQ ID NO.1及其编码的氨基酸序列SEQ ID NO.2。本发明基因为双子...
- 管荣展董海滨张红生王建飞
- 文献传递
- 播娘蒿甜菜碱醛脱氢酶基因的克隆和表达分析被引量：9
- 2006年
- 采用RT-PCR技术克隆了播娘蒿的甜菜碱醛脱氢酶基因全长cDNA序列(DsBADH)。DsBADHcD-NA序列全长1653bp,其中开放阅读框长1503bp,编码一个由501个氨基酸残基组成的蛋白质,推测的蛋白质相对分子质量为54kD,pI为5.5。序列比对结果表明DsBADH与其它物种的BADHs无论在核酸水平还是在蛋白质水平上都表现较高的同源性,表明BADH基因家族具有较高的保守性。DsBADH基因的氨基酸序列在进化上与同属十字花科植物BADH基因距离较近。蛋白质序列存在一个编码十肽的高度保守序列,该结构在醛脱氢酶中是高度保守的,这些残基可能包含NAD+结合位点及酶催化位点,而且含有与酶功能有关的醛脱氢酶高度保守的氨基酸残基Cys,表明DsBADH可编码活性蛋白。N端存在信号肽,初步将该酶定位于叶绿体。半定量RT-PCR分析表明,DsBADH在根、茎、叶以及角果中均表达,但在角果中的表达显著高于其它组织,而且表明DsBADH受盐诱导正调节表达。
- 董海滨管荣展张红生黄骥
- 关键词：播娘蒿克隆
