蒙国基
- 作品数:3 被引量:11H指数:2
- 供职机构:中山大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 苏云金芽孢杆菌分子伴侣串联基因p19-p29的克隆和表达载体的构建被引量:6
- 2002年
- 根据已知序列设计一对PCR引物 (ORF 5S ,ORF 3N) ,可从cry2Aa或cry2Ac操纵子中扩增出包含串联分子伴侣基因p1 9 p2 9的DNA片段 ,预期大小分别为 1 6kb和 2 0kb。对 1 5 0株苏云金芽孢杆菌菌株进行PCR检测 ,从 2 6株中获得了大小为 1 6kb的扩增片段 ,但未获得2 0kb的片段。这表明cry2Aa型操纵子p1 9 p2 9基因存在较广泛 ,而cry2Ac型较罕见。将来自Y2 菌株的 1 6kb片段回收 ,通过一系列亚克隆 ,最终构建成一个含有p1 9 p2 9串联基因的Bt表达载体 ,为进一步研究p1 9 p2
- 余健秀曾少灵谢瑞瑜蒙国基庞义
- 关键词:苏云金芽孢杆菌分子伴侣串联基因克隆
- 苏云金芽孢杆菌cry3Aa启动子的克隆和营养期表达载体的构建被引量:5
- 2001年
- 苏云金芽孢杆菌 (Bacillusthuringiensis ,Bt)的绝大多数杀虫晶体蛋白 (insectici dalcrystalproteins,ICPs)基因是在芽孢形成期 (sporulationphase)表达的 ,而只有少数基因如cry3Aa是在营养期表达的。在本研究中 ,根据已知的cry3Aa基因启动子序列设计了一对引物 (Ep 5s和Ep 3n) ,利用这对引物从拟步虫甲亚种 (Btsubsp .tenebrions)中扩增出一个与预期大小 ( 1.1kb)一致的DNA片段。序列测定及分析结果表明 ,这个DNA片段含cry3Aa启动子全序列 ,包括上游AT富含区、两个启动子区、两个SD序列及两组反向重复序列。经过一系列的克隆之后将这个片段克隆到穿梭载体pHT310 1上 ,最后构建成一个Bt的营养期表达载体 pHPT。
- 余健秀蒙国基曾少灵谢瑞瑜谭乐庞义
- 关键词:苏云金芽孢杆菌启动子营养期生物杀虫剂