裴建军
- 作品数:17 被引量:59H指数:5
- 供职机构:南京师范大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金无锡市自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学轻工技术与工程化学工程农业科学更多>>
- 草菇半纤维素酶系统的诱导、分布及初步定性被引量:15
- 2003年
- 以蔗糖、果胶、羧甲基纤维素或木聚糖为碳源培养草菇 (Volvariellavolvacea) ,对所产生的半纤维素酶进行初步研究发现 ,半纤维素酶系主要是由木聚糖诱导 .半纤维素酶中的木聚糖酶分布在胞外 ,木糖糖苷酶分布在胞内 ,阿拉伯糖苷酶胞内胞外都有分布 .木聚糖酶的最适反应温度为 6 0℃ ,最适反应 pH为 5 .8,在pH 5 .4~ 7.0时比较稳定 ,保温 1h酶活的半衰温度是 5 5℃ .木糖糖苷酶的最适反应温度为 5 5℃ ,最适反应 pH为 6 .6 ,在 pH 6 .6~ 7.4时比较稳定 ,保温 1h酶活的半衰温度是 5 2℃ .阿拉伯糖苷酶的最适反应温度为 6 0℃ ,最适反应pH为 5 .0 ,在 pH 4 .6~ 6 .2时比较稳定 ,保温 1h酶活的半衰温度为 6 0℃ .
- 裴建军胡沂淮邵蔚蓝
- 关键词:草菇半纤维素酶
- 使大体积发酵液快速升温的热激诱导方法
- 本发明公开了一种使大体积发酵液快速升温的热激诱导方法。其特征是:预备A、B两台发酵罐,测试出B罐将水从起始温度加热到目标温度的加热速度;在A、B罐中分别装入培养液,灭菌后将A罐的温度设置为起始温度,B罐的温度设置为目标温...
- 邵蔚蓝裴建军
- 文献传递
- 极耐热性β-葡萄糖醛酸酶的高效表达和酶学性质及其应用被引量:10
- 2008年
- 从海栖热袍菌克隆出编码热稳定性β-葡萄糖醛酸酶基因,以热激载体pHsh为表达质粒,在大肠杆菌中得到高效表达。基因表达产物通过一步热处理后,酶纯度达电泳均一。纯化重组酶酶学性质研究表明,β-葡萄糖醛酸酶的最适反应温度为80oC,最适反应pH为5.0,pH5.8~8.2之间酶的稳定性较好,80oC的半衰期为2h,SDS-PAGE结果显示分子量为65.9kD,与理论推算值相吻合。以对硝基苯-β-葡萄糖醛酸苷(pNPG)为底物时,其动力学参数Km值0.18mmol/L,Vmax值为312u/mg。初步的应用分析表明,该重组酶能催化甘草酸转化为甘草次酸。
- 王卓裴建军李华钟邵蔚蓝
- 关键词:Β-葡萄糖醛酸酶甘草酸甘草次酸
- 海栖热袍菌葡萄糖异构酶基因xylA的克隆、表达及酶学性质被引量:1
- 2008年
- 海栖热袍菌(Thermotoga maritima)是嗜极端高温的厌氧细菌,其产生的葡萄糖异构酶由于其出色的耐热性有着潜在的工业应用价值。由于海栖热袍菌苛刻的培养条件导致其葡萄糖异构酶产量较低。通过PCR方法克隆编码zmaritimaMSB8葡萄糖异构酶基因xylA,构建重组质粒pHsh—xylA,转入EscherichiacoliJMl09,通过热激诱导表达。通过热处理和离子交换层析纯化两步得到电泳纯的酶制品,纯化倍数和回收率分别为8.02和49.02。对酶学性质研究表明,该重组酶为金属离子激活性酶,Mg^2+,Co^2+对相对酶活有很强的激活作用,其最适pH为7.0,最适反应温度为95℃,且在pH6-8之间有着较好的稳定性,在95℃下半衰期长达5h以上。以葡萄糖为底物时的表观Km和Kmax、分别为105mmol/L和45.2mol/min·mg。
- 王一帆裴建军邵蔚蓝段作营李华钟
- 关键词:葡萄糖异构酶海栖热袍菌酶学性质
- 系列木聚糖降解酶基因同向串连表达的研究被引量:1
- 2006年
- 采用分子克隆操作方法,通过设计多个SD序列的多克隆位点,首次成功构建了一个木聚糖降解酶系列基因同向串连表达载体,经筛选鉴定获得具有极耐热性的α-阿拉伯呋喃糖苷酶基因(XarB)、葡萄糖醛酸酶基因(aguA)和木聚糖酶基因(XynB)同向串连的pHsh/XarB-aguA-XynB一株克隆菌.酶学分析表明重组菌株具有较好的阿拉伯糖苷酶、木糖苷酶、葡萄糖醛酸酶和木聚糖酶活性.酶活单位分别为:阿拉伯糖苷酶11.8 U/mL,β-木糖苷酶6.87 U/mL,α-葡萄糖醛酸酶1.53 U/mL,木聚糖酶6.58 U/mL.
- 刘思园邵蔚蓝裴建军吴华伟
- 关键词:基因工程
- 海栖热袍菌葡萄糖异构酶基因xylA的克隆、表达及酶学性质
- 海栖热袍菌(Thermotoga maritima)是嗜极端高温的厌氧细菌,其产生的葡萄糖异构酶由于其出色的耐热性有着潜在的工业应用价值。由于海栖热袍菌苛刻的培养条件导致其葡萄糖异构酶产量较低。通过PCR方法克隆编码T....
- 王一帆裴建军邵蔚蓝段作营李华钟
- 文献传递
- 嗜热厌氧乙醇杆菌调控因子P_(adhE)-1的分离、重组表达及其与adhE基因启动子的结合
- 2010年
- 嗜热厌氧乙醇杆菌发酵是生产纤维素乙醇的有效途径,而嗜热厌氧乙醇杆菌醛/醇脱氢酶(AdhE)是其乙醇代谢途径中的关键酶。以adhE启动子区域的DNA序列(TRRadhE)作为诱饵,通过制备核酸亲和层析柱,利用调控因子与DNA特异性结合的特点,得到调控因子PadhE-1。经过蛋白测序和NCBI数据库的比对,发现其N端序列与Thermoanaerobacter pseudethanolicus39E的LacI家族转录调控因子(GenBank accession No.YP_001665770)有90%的同源性。根据同源性设计引物,从嗜热厌氧乙醇杆菌JW200基因组中通过PCR扩增得到调控因子PadhE-1的基因,并克隆到表达载体pET-28a得到重组质粒pET-PadhE。转化大肠杆菌JM109(DE3),经IPTG诱导表达,Ni2+亲和柱纯化,得到重组表达的调控因子PadhE-1。体外凝胶阻滞实验证实PadhE-1能与TRRadhE特异性结合。这将有助于我们了解嗜热厌氧乙醇杆菌的乙醇代谢调控机理。
- 裴建军周庆曲威邵蔚蓝
- 分子生物学技术在担子菌中的研究进展被引量:17
- 2003年
- 担子菌有较高的经济价值和研究价值,近年来,随着分子生物学在担子菌中的深入研究,担子菌的品质、产量、栽培效率和利用价值得到进一步提高。本文从分子标记技术和转化系统两个方面重点阐述讨论担子菌在分子生物技术的研究进展及应用前景。
- 李迅胡沂淮裴建军邵蔚蓝
- 关键词:分子生物学技术担子菌
- 一种制备重组耐热β-葡萄糖醛酸酶的方法
- 一种制备重组极耐热性β-葡萄糖醛酸酶的方法,其制法是:将耐热β-葡萄糖醛酸酶基因插入表达载体pHsh,转化大肠杆菌获得耐热β-葡萄糖醛酸酶表达质粒;其次是对基因进行诱变,改变mRNA的二级结构,得到优化的耐热β-葡萄糖醛...
- 邵蔚蓝裴建军王卓
- 文献传递
- 一株具木聚糖酶活链霉菌的鉴定及其木聚糖降解酶系分析
- 2006年
- 分离得到一株具木聚糖酶活性的放线菌菌株pp2,该菌株具有典型链霉菌属的形态学特征.通过对其进行形态学、生理生化特性以及16SrRNA基因序列等方面的分类学研究,菌株pp2初步鉴定为链霉菌属的一个潜在新种.通过对菌株pp2的酶系研究发现该菌株胞外发酵液具木聚糖酶活性,细胞破碎液中具α-L-阿拉伯糖苷酶活性和β-D-木糖苷酶活性.其中木聚糖酶酶活力为30·3U/mg,酶反应最适温度为65℃,最适pH为5·4;37℃下稳定性很好,60℃下酶活性衰减很快.α-L-阿拉伯糖苷酶酶活力为1·81U/mg,酶反应最适温度为55℃,最适pH为6·0,55℃下稳定性能很好.β-D-木糖苷酶酶活力为0·04U/mg.
- 彭汀汀董宏平彭惠裴建军邵蔚蓝
- 关键词:链霉菌RRNA基因