黄冬生
- 作品数:16 被引量:64H指数:5
- 供职机构:上海第二医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金上海市高等学校科学技术发展基金卫生部科学研究基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 超重症联合免疫缺陷小鼠血清免疫化学特性研究被引量:1
- 1993年
- 本文采用多项免疫化学技术对超重症联合免疫缺陷小鼠(B.C,B-17 scid-beige)血清免疫化学特征进行了分析。结果表明: 用免疫双扩散试验、SDS-PAGE和薄层凝胶扫描、以及免疫印迹法均未测出有免疫球蛋白存在,从而表明该品系小鼠血清免疫球蛋白缺失,该鼠体内已导入scid基因。该特征在人源单克隆抗体及其它蛋白质基因工程产品的生产等方面具有重要意义。
- 陈桦黄冬生马宝骊畅波李彦汪歌
- 关键词:免疫缺陷免疫化学小鼠
- 慢性空肠弯曲菌感染小鼠的局部和全身抗体应答被引量:2
- 1990年
- 空肠弯曲菌CJ-S131能粘附小鼠肠粘膜上皮细胞,在小鼠肠道内长期定居,形成慢性肠道感染,并发肠外组织慢性炎症,如肾小球肾炎等。慢性感染小鼠的血清中,有抗核抗体存在,可检出抗ds-DNA,ss-DNA和组蛋白抗体,提示慢性肠道感染能诱发自身免疫应答。本文报道慢性空肠弯曲菌感染小鼠的局部和全身抗体应答特征,并就特异性免疫应答和自身免疫应答的关系进行讨论。
- 高建新马宝骊谢雅莉黄冬生沈莉
- 关键词:空肠弯曲菌肠炎抗体应答
- 乙型肝炎病毒聚合酶链反应液相杂交酶免疫检测的定性判断值研究被引量:3
- 2001年
- 目的探讨乙型肝炎病毒 (HBV)聚合酶链反应 (PCR)液相杂交酶免疫检测的定性判断值设立和灰区范围的计算方法。方法以 HBV为目的靶 DNA,引物 P1 5’端标记 Bio,PCR扩增 35个循环。扩增产物与 5’端标记Dig的探针混合进行液相杂交 ,杂交后产物被 SA酶标板固定 ,经酶标记抗 Dig抗体结合、显色。结果实验结果显示 ,本试剂的检测敏感度在 3× 10 4拷贝 /m l。 3种参比品 A450 值的 95 %、99%分布范围之间不存在交叉区 ,其中临界阳性参比品 95 %分布范围下限值 (A450 )为 0 .182。 5 85例献血员血清标本的 A450 均值为 0 .0 37,P99上限值为 0 .12 3,灰区范围在 0 .12 3~ 0 .182。本试剂对“HBs Ag+/HBe Ag+/抗 - HBc+”标本的阳性检出率为 98.8% ,“HBs Ag+/抗 - HBe+/抗 - HBc+”标本的检出率为 5 4.8% ,阴性标本的检测有较高的特异性。结论本试剂设立的定性判断值(灰区计算方法 )具有很高的正确性。
- 李稻程新建施蓉杭勤黄冬生顾文莉姜节洪陶义训
- 关键词:乙型肝炎病毒聚合酶链反应酶免疫
- 慢性粘膜免疫应答诱导的小鼠自身免疫综合征被引量:12
- 1990年
- 空弯菌(CJ-S131)慢性感染小鼠具有SLE样自身免疫综合征。本文进一步用甲醛化空弯菌(CJ-S131菌苗)经口免疫BALB/c小鼠,每周两次,持续14周.模拟慢性感染时的慢性肠道粘膜免疫应答.发现免疫小鼠也具有SLE样自身免疫综合征,且较该菌慢性感染小鼠更显著。主要表现有:(1)全身免疫系统的淋巴组织显著增生;(2)B淋巴细胞多克隆激活;(3)多种自身抗体(包括抗ds-DNA.ss-DNA和组蛋白抗体)显著升高;(4)免疫复合物性肾小球肾炎;(5)多器官性(如肝、肠等组织)慢性炎症;(6)血管炎和血管周围炎。在体外自身免疫应答诱导实验中,免疫小鼠的脾细胞培养上清中,免疫球蛋白(总Ig)和抗DNA抗体显著高于非免疫小鼠。上述结果证实.空肠弯菌慢性感染所致的自身免疫综合征.和该菌抗原诱导的慢性肠道粘膜免疫应答有关。本实验为研究感染和自身免疫的关系提供了实用的动物模型。
- 高建新马宝骊谢雅莉张汉明黄冬生
- 关键词:综合征肾小球肾炎
- 改良ELISA测定腹水中单克隆抗体的亲和常数被引量:4
- 1991年
- 抗体亲和力对体内外免疫反应有重要影响,为阐明抗体亲和力在免疫学检测及疾病发生发展机理中的作用,需要建立简单准确的测定抗体亲和力的方法。本实验参照Friguet氏利用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定抗体亲和力的基本原理,建立了改良测定法,能准确且方便地直接测得腹水中单克隆抗体的亲和力常数。
- 王禧马宝骊沈彩霞陈树军黄冬生
- 关键词:ELISA单克隆抗体
- 重组寻常型天疱疮抗原抗血清的制备与纯化被引量:6
- 2002年
- 寻常型天疱疮抗原 (pemphigusvulgarisantigen ,PVA )是桥粒中相对分子质量为 130 0 0 0的糖蛋白 ,其分子由细胞外区(extracellulardomain ,EC )、跨膜区和细胞内区三部分组成 ,主要发挥作用的区域在细胞外区。为了了解PVA细胞外区的致病性位点及其相应抗体的致病作用 ,制备抗血清是必需环节。本文在已重组表达的PVAEC1 2融合蛋白的基础上进行蛋白纯化 ,并免疫家兔 ,使之产生针对融合蛋白的特异性抗血清 ,经双向免疫扩散实验 ,其效价为 1:16~ 1:32。采用辛酸沉淀法和DEAE 5 2 纤维素阴离子交换层析进行抗血清IgG抗体成分的提纯 ,总量为 12 5~ 2 2 0mg ,经间接免疫荧光检测 ,其滴度为 1:40。从而获得高滴度、高特异性的兔抗PVAEC1 2融合蛋白抗血清IgG抗体成分。
- 潘萌郑捷李卫平薛峰黄冬生
- 关键词:寻常型天疱疮抗原抗血清纯化
- 影响空弯菌抗原诱导自身免疫应答的因素被引量:1
- 1991年
- 利用慢性粘膜免疫应答小鼠模型,研究在空弯菌抗原(CJ-S131菌苗)诱导下,不同品系、性别的小鼠的自身免疫应答。经肠道,持续用CJ-S131菌苗免疫16周后,用ELISA或CELISA检测小鼠体内的抗ds-DNA,ss-DNA,组蛋白,ENA和胸腺细胞抗体。在五个品系小鼠中,四个品系小鼠(BALB/C,ICR,KM和SMMC/B)均有一种或多种被测的自身抗体升高。其中SMMC/B和KM小鼠的EI值较高,BALB/C和ICR小鼠次之。C57BL/6和对照组无显著性差异,提示对空弯菌抗原诱导的自身免疫应答不敏感。在遗传背景的制约下,性别也影响自身抗体的产生,有三种可能:(1)自身抗体升高主要见于雌性小鼠,如雌性KM小鼠被测的各种自身抗体均有升高;(2)雌性,雄性小鼠均有一种以上自身抗体升高,如SMMC/B和BALB/C小鼠;(3)雌、雄性小鼠的自身抗体均无升高,如C 57BL/6。本文结果表明,空弯菌苗诱导的自身抗体种类和水平,受小鼠的遗传背景和性别两个因素的相互制约和影响。
- 高建新马宝骊张汉明谢雅莉黄冬生
- 关键词:菌苗
- 空肠弯曲菌蛋白抗原分析被引量:10
- 1995年
- 超声粉碎和高速离心获得C.j-S131lysate,SDS-PAGE显示位于10-92KD间24条蛋白条带,薄层扫描发现43KD蛋白是菌体最主要成份,其次是15KD和17KD蛋白。Westernblotting发现C。j-S131lysate中43KD蛋白抗原性最强,也最早诱导相应抗体产生。用凝胶过滤和液相制备型等电聚焦分离获得了纯化的92KD、43KD、15KD三种蛋白。本文结果为进一步研究空弯菌诱致自身免疫综合征的分子机理打下了基础。
- 臧星星马宝骊曹鹤年黄冬生柏峻王利谢雅莉
- 关键词:空肠弯曲菌蛋白抗原
- 一种简便的心肌肌钙蛋白T提纯方法被引量:4
- 1998年
- 介绍一种简便的牛心肌肌钙蛋白T提取方法。所得肌钙蛋白T经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳和EIA鉴定。为进一步建立血清肌钙蛋白T免疫测定方法创造了条件。
- 郑佐娅朱鼎宏黄冬生陶义训
- 关键词:肌钙蛋白T提纯免疫测定
- 抗组蛋白亚单位抗体检测方法的初步探索
- 1989年
- 本文采用Western Blotting方法初步探索了一种检测抗组蛋白亚单位抗体的方法。首先从大白鼠肝脏中提取组蛋白抗原,经SDS薄板凝胶电泳将抗原分离成六条区带,H_(1a),H_(1b),H_3,H_(2b),H_(2a),H_4,共4个亚单位,然后将已分离的抗原从凝胶板上通过转移电泳转移至国产混合纤维膜上,再用此膜通过免疫印迹,酶标抗体显色,检测抗组蛋白的总抗体阳性的病人血清,发现他们的抗组蛋白亚单位抗体的特异性各有差异。
- 黄志基林良黄冬生陈树军马宝骊