乔瑞洁
- 作品数：30 被引量：57H指数：4
- 供职机构：兰州生物制品研究所有限责任公司更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划甘肃省科技重大专项计划甘肃省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 百日咳、白喉、破伤风、乙型肝炎联合疫苗的实验研究被引量：2
- 1997年
- 对制备无细胞百日咳菌苗、白喉、破伤风、乙型肝炎联合疫苗的实验室条件进行了初步探索，实验结果表明，联合疫苗的配方以每毫升无细胞百日咳组分１５－１８μｇ．ＰＮ、白喉类毒素３０ｌｆ、破伤风类毒素７－１０ｌｆ和基因工程乙肝表面抗原２０μｇ为宜，稀释缓冲液选用０．８５％ＮａＣｌ溶液吸附效果较好，动物实验证明联合疫苗中各组分均安全有效。
- 孙述学乔瑞洁陈爱荣刘志源杨晓明何长民任魁李玉张昀孟秀园郑菊梅
- 关键词：百日咳白喉破伤风乙型肝炎联合疫苗
- A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗对5～59岁健康人群的免疫原性再评价被引量：4
- 2014年
- 目的：对A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗在5～59岁健康人群中的免疫原性进行再评价。方法对2005年在广西河池市进行的临床试验中采集的血清，采用国际标准化的酶联免疫吸附试验（ELISA）和血清体外杀菌试验（SBA）方法检测血清中抗A群C群脑膜炎球菌荚膜多糖的特异性IgG抗体含量和对A群C群脑膜炎球菌的抗体杀菌功能。结果免疫前、后，A群血清中抗荚膜多糖特异性IgG抗体平均几何浓度（GMC）分别为23．66μg/ml和78．83μg/ml （P＜0．05），C群分别为1．23μg/ml和51．25μg/ml （P＜0．05）；免疫前、后血清中抗荚膜多糖IgG抗体浓度≥2μg/ml的比例，A群分别为99％和100％（P＞0．05），C群为20％和99％（P＜0．05）；免疫后较免疫前抗荚膜多糖IgG抗体浓度≥4倍升高的比例，A群为34％和C群为100％。免疫前、后血清中针对脑膜炎球菌的杀菌抗体平均几何滴度（GMT），A群分别为1164和5530（P＜0．05），C群分别为4和6225（P＜0．05）；免疫前、后血清杀菌抗体GMT≥128的比例，A群分别为91％和99％（P＞0．05），C群分别为14％和96％（ P＜0．05）；免疫后较免疫前血清杀菌抗体滴度≥4倍升高的比例分别为A群53％和C群100％。免疫前、后血清中抗荚膜多糖IgG抗体浓度和杀菌抗体滴度之间的Pearson相关系数，A群分别为r＝0．15和r＝0．23，C群r＝-0．14和r＝0．58（P＜0．05）。结论本研究以标准化检测方法产生的具体免疫原性数据，证明A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗良好的免疫原性。
- 赵志强乔瑞洁王欣茹王浩杨进权怡史晓玲刘佳林纪胜谢贵林
- 关键词：免疫原性酶联免疫吸附试验
- 白喉毒素无毒突变体H21G蛋白的分泌性表达及纯化
- 2016年
- 目的原核分泌性表达白喉毒素无毒突变体H21G蛋白并进行纯化,为下一步开发以重组H21G蛋白为基础的疫苗奠定基础。方法以p ET16a-H21G质粒为模板,PCR扩增H21G基因,亚克隆至p ET22b载体中,构建重组原核表达质粒p ET22b-H21G,转化感受态大肠埃希菌BL21（DE3）,IPTG诱导重组H21G蛋白分泌性表达。重组蛋白经渗透压休克,DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析和Phenyl Sepharose 6FF（high sub）疏水层析纯化后,使用还原/非还原SDS-PAGE和HPLC法分析纯化蛋白的纯度,窄范围等电聚焦分析其等电点,MALDI-TOF质谱法分析其相对分子质量,N-末端测序法鉴定N-末端氨基酸序列。结果重组原核分泌性表达质粒p ET22b-H21G经双酶切（NcoⅠ和XhoⅠ）和测序证明构建正确;目标蛋白以可溶形式存在于宿主菌周质间隙,表达量为10%-15%;经纯化后,重组蛋白纯度达95%以上,等电点在4.55-6.20之间,相对分子质量和N-末端氨基酸序列均与白喉毒素相符合。结论成功分泌性表达并纯化了重组白喉毒素无毒突变体H21G蛋白,为下一步开发以重组H21G蛋白为基础的疫苗奠定了基础。
- 范锋锋李燕婷金鑫刘月萍吴朝今冯宜扬乔瑞洁许博赵志强谭小梅谢贵林
- 关键词：白喉毒素分泌性表达纯化
- 不同减毒方法对无细胞百日咳菌苗减毒效果的比较研究
- 1997年
- 采用５种不同的化学减毒方法对无细胞百日咳菌苗的ＰＴ组分减毒效果进行了比较研究，选择出对菌苗的抗原性破坏小、减毒效果确切、减毒时不产生变性蛋白凝块的改进的甲醛减毒方法。
- 杨晓明秦力乔瑞洁刘方蕾何长民
- 关键词：无细胞菌苗百日咳菌苗减毒
- 国产b型流感嗜血杆菌PRP-TT疫苗第四剂加强免疫效果评价
- 目的：评价兰州生物制品研究所生产的流感嗜血杆菌（Haemophilus influenzae type b，Hib）结合疫苗PRP-TT（Polyribosyl ribitol phosphate-tetanus tox...
- 李亚南乔瑞洁李红刘佳王浩史晓玲叶强谢贵林
- 关键词：HIB结合疫苗加强免疫
- 结核分枝杆菌核酸疫苗的构建及其小鼠免疫效果观察被引量：2
- 1999年
- 将结核杆菌ＥＳＡＴ－６ 和ＭＰＴ－６４ 的编码基因分别插入真核表达载体ＪＷ ４３０３ 构建重组质粒，用重组质粒对４ 周龄的ＢＡＬＢ／Ｃ和Ｆ１ 代小鼠进行肌肉和皮内免疫，于末次免疫后１０ 天采血并分离血清，进行ＥＬＩＳＡ 检测。结果表明，小鼠能产生较强的体液免疫，特异性ＩｇＧ 平均水平分别为参考血清的２．２０ 倍和３．１９ 倍，且对两种品系小鼠进行的相同途径的免疫，其抗体水平差异不显著；而不同途径的重组质粒免疫，抗体水平略有差异。
- 秦力刘方蕾乔瑞洁罗广李忠明
- 关键词：结核分枝杆菌重组质粒核酸疫苗免疫
- 国产b型流感嗜血杆菌结合疫苗PRP-TT加强免疫效果评价被引量：1
- 2011年
- 目的评价国产b型流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae type b,Hib)结合疫苗PRP-TT的加强免疫效果。方法分别用安儿宝和呵儿贝两种Hib结合疫苗,对在广西柳州市常住儿童进行3、4、5月龄3针免疫,1年后,进行第4剂加强免疫。分别于3针免疫1年后和加强免疫1个月后采血,分离血清,采用ELISA和体外杀菌实验(Serum bactericidal assay,SBA)分别检测免疫前后血清IgG抗体浓度和加强免疫后SBA抗体滴度。结果安儿宝和呵儿贝疫苗3针免疫1年后,血清IgG抗体几何平均数浓度(Geometric mean concentrations,GMCs)分别为3.17μg/ml和3.00μg/ml,二者差异无统计学意义(P>0.05);其中,IgG抗体浓度在1.00μg/ml以上的血清所占的比例分别为79%(62/78)和76%(115/152),二者差异无统计学意义(P>0.05)。加强免疫后1个月,两种疫苗免疫血清中IgG抗体GMCs分别为71.33μg/ml和65.35μg/ml,二者差异无统计学意义(P>0.05);IgG抗体浓度均能100%达1.00μg/ml以上。两种疫苗加强免疫后的血清IgG抗体浓度与各自加强免疫前比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。加强免疫后,两种疫苗免疫血清的SBA抗体滴度分别为5 263和4 637,二者差异无统计学意义(P>0.05)。两种疫苗免疫后血清IgG抗体浓度和SBA抗体滴度均具有相关性(r值分别为0.696和0.689,P<0.05)。结论 3针免疫1年后,两种疫苗免疫血清中IgG抗体仍保持较高的水平,第4剂加强免疫后,抗体水平迅速显著升高,100%达1.00μg/ml以上,且具有有效的体外杀菌功能。
- 李亚南乔瑞洁李红刘佳王浩史晓玲叶强谢贵林
- 关键词：免疫效果
- 百日咳毒素S1亚单位的表达及其免疫原性研究被引量：7
- 2003年
- 目的 研究百日咳毒素S1(Pertussis toxin s1 subunit)亚单位在大肠杆菌中的表达及其免疫学特性。方法 采用PCR法从百日咳杆菌染色体中获得S1亚单位的结构基因并克隆到质粒pCR2.1-TOPO中,转化宿主菌DH5α和TOPO10。用抗S1的单抗1B7检测表达产物。用粗制的重组S1(rS1)免疫小鼠,做主动免疫保护实验。rS1免疫家兔,检测rS1的免疫原性。并以家兔免疫血清在小鼠进行被动免疫保护实验。结果 rS1可在大肠杆菌中稳定高效表达,表达量分别占细胞总蛋白量的14％(DH5α)和24.2％(TOPO10)。rS1能被1B7识别,在小鼠主动免疫实验中,保护率可达56.3％。家兔免疫血清ELISA效价为1:32 000。抗rS1血清对小鼠被动的免疫保护率为100％。结论 rS1具有良好免疫原性,为百日咳基因工程疫苗或亚单位疫苗研制及百日咳免疫机理研究提供了依据。
- 乔瑞洁杨晓明
- 关键词：百日咳毒素免疫原性
- A、C、Y、W135群脑膜炎奈瑟菌血清抗体特异性体外杀菌试验方法的建立及其验证被引量：1
- 2014年
- 目的建立A、C、W135和Y群脑膜炎奈瑟菌血清抗体特异性体外杀菌试验方法 (serum bactericidal assay,SBA),并进行验证。方法对SBA中活菌收获时间、靶菌的制备、反应时间及补体进行优化,并确定质控血清Men10的质控范围。对优化后的方法进行特异性、线性、精密度验证。结果确定A600值为0.5~0.8时为收获细菌最佳收获时间;冻存菌种可替代新鲜制备菌种作为靶菌;最佳杀菌反应时间为60 min;17830和84321N批补体均可用于试验。质控血清Men10的质控范围A群为521~4 689,C群为1 047~9 423,W135群为1 779~16 008,Y群为1 416~12 741。A、C、W135和Y同群多糖吸收血清样品后能够抑制≥80%的同群SBA滴度,而异群多糖则<20%;血清样品稀释倍数与对应的SBA滴度呈显著负相关,斜率在-0.90^-1.10之间,Pearson相关系数在0.90~1.0之间,P均<0.001;同一实验内相同样品检测结果 CV≤25%,实验间相同样品的95%的检测结果落在检测值中位数3倍(一个稀释度)的范围内,CV≤40%,不同实验室间相同样品的检测结果至少有70%落在美国CDC公布结果的3倍(一个稀释度)范围内。结论建立了标准化的具国际间可比性的A、C、W135和Y群脑膜炎奈瑟菌SBA,该方法特异性、线性和精密度良好。
- 乔瑞洁赵志强王浩王欣茹刘佳刘方蕾吴兵于旭博林纪胜李亚南叶强谢贵林
- 关键词：脑膜炎奈瑟菌
- 国产b型流感嗜血杆菌PRP-TT疫苗第四剂加强免疫效果评价
- 目的评价兰州生物制品研究所生产的流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae typeb,Hib)结合疫苗PRP-TT(Polyribosyl ribitol phosphate-tetanus toxoi...
- 李亚南乔瑞洁李红刘佳王浩史晓玲叶强谢贵林
- 关键词：HIB结合疫苗加强免疫
- 文献传递
