余东山
- 作品数：10 被引量：23H指数：3
- 供职机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金上海市基础研究重大（重点）项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肝性脑病的评估被引量：3
- 2010年
- 余东山谢青
- 关键词：肝性脑病神经系统并发症运动功能障碍肝功能障碍慢性肝病
- 外周血循环miRNA在乙型肝炎肝衰竭患者中的表达
- 目的研究乙肝肝衰竭患者外周血循环miRNA的表达及其与疾病预后的关系。方法选取瑞金医院6名乙型肝炎肝衰竭患者及正常者的血清进行Exiqon LNA microRNA芯片分析。收集瑞金医院感染科58例乙型肝炎肝衰竭、10例...
- 王伟静谢青安方梅余东山赵钢德项晓刚赖荣陶桂红莲郭斯敏王晖
- 微小RNA-1187对半胱天冬氨酸蛋白酶-8介导的肝细胞凋亡调控的作用
- 2011年
- 目的 通过微小RNA-1187（miR-1187）靶向调节半胱天冬氨酸蛋白酶-8（caspase-8）mRNA的表达,观察miR-1187对肝细胞凋亡的调控作用.方法 应用D-氨基半乳糖联合脂多糖构建BALB/c小鼠急性肝功能衰竭模型,取肝组织进行锁核酸（LNA）-miRNA微阵列分析和miRNA靶基因功能分析.体外培养胚胎小鼠肝细胞株2（BNL-CL2细胞）,予以TNFα联合D-氨基半乳糖分别诱导转染miR-1187模拟物组及未转染组,以正常生长细胞为对照,应用实时（RT）-PCR、Western印迹等方法检测各组细胞miR-1187、caspase-8 mRNA及caspase-8蛋白的表达,并采用流式细胞技术测定细胞凋亡率.组间均数比较采用t检验.结果 miR-1187的信号值随急性肝功能衰竭进展明显下降.miR-1187与caspase-8 mRNA的3＇非编码端（3＇UTR）有直接的结合位点关系;miR-1187在未转染组表现为显著下调,在转染组下调减缓（t=6.371,P〈0.01）;caspase-8 mRNA 在未转染组表达显著增高.在转染组上升明显减少（t=4.539,P〈0.01）;转染组细胞凋亡率明显低于未转染组（t=3.365,P〈0.05）.结论 miR-1187为肝细胞凋亡的抑制因子之一;高表达miR-1187通过靶向调节caspase-8 mRNA的表达,阻抑肝细胞凋亡的发生.
- 余东山安方梅龚邦东赵钢德项晓刚林兰意俞红王晖谢青
- 关键词：细胞凋亡
- 慢性乙型肝炎抗病毒优化治疗策略——联合治疗被引量：8
- 2010年
- 余东山谢青
- 关键词：慢性乙型肝炎抗病毒治疗核苷类药物循证医学证据肝细胞肝癌
- 微小RNA在肿瘤坏死因子α介导的急性肝功能衰竭小鼠体内的表达谱及其作用被引量：4
- 2010年
- 目的了解微小RNA（miRNA）在急性肝功能衰竭小鼠模型中的表达谱及对其发病机制的调控作用。方法将BALB／c小鼠85只分为4组，模型组40只用D-氨基半乳糖（D-GalN）联合脂多糖（LPS）腹腔注射建立肝功能衰竭模型，D-GalN单药组20只、LPS单药组20只和对照组5只分别予D-GalN、LPS和0．9％NaCl溶液腹腔注射。在给药后0、5和7h观察小鼠肝脏组织学变化，0、1、3、5、7和9h留取小鼠血清和肝脏组织标本。采用实时定量PCR方法检测小鼠血清及肝组织中炎性细胞因子（TNF-α和IL一6）表达水平；采用mIRNA微阵列（microarray）检测小鼠肝脏中miRNA的表达谱，实时定量PCR验证其表达。体外LPS诱导小鼠巨噬细胞Raw264．7活化，诱导不同时间点收集细胞检测细胞miRNA的表达情况。组间均数比较用单因素方差分析，相关性分析采用Pearson和Spearman相关分析。结果miRNA微阵列发现小鼠急性肝功能衰竭发病过程中miRNA的表达谱发生了明显变化，与对照组相比，模型组有97个miRNA表达变化显著（P〈0．01），其中21个miRNA在给药后5h和7h均表达上调，27个miRNA均表达下调，进一步PCR验证得到miR-146a和miR-155随给药时间延长表现为持续性上调，且miR-155表达与TNF—α和IL-6表达均具有良好的相关性。体外实验进一步发现miR-146a和miR-155在活化的巨噬细胞中表达上调。结论在小鼠急性肝功能衰竭发病过程中，伴随着miRNA表达谱的变化，炎性反应相关miR-146a和miR-155明显上调，可能在急性肝功能衰竭的免疫发病机制中发挥重要的调控作用。
- 安方梅余东山龚邦东赵钢德王晖郭清俞红谢青
- 关键词：寡核苷酸序列分析微RNAS小鼠肝功能衰竭肿瘤坏死因子Α
- miR-122在D-氨基半乳糖联合脂多糖诱导急性肝衰竭小鼠体内的表达及其意义被引量：7
- 2010年
- 目的 通过监测急性肝功能衰竭小鼠体内miR-122的表达,探讨miR-122与小鼠急性肝衰竭疾病程度和进展之间的关系,为肝功能衰竭的早期诊断提供新的生物学标志物. 方法将BALB/C小鼠随机分为4组,实验组用D-氨基半乳糖（D-GalN,900 mg/kg）联合脂多糖（LPS,10 μg/kg）腹腔注射建立肝衰竭模型,对照组3组,分别予以D-GalN（900 mg/kg）,LPS（10 μg/kg）和等渗盐水腹腔注射,在不同时间点观察小鼠病死率、肝脏组织学变化,给药后0、1、3、5、7、9 h分别留取血清、肝脏组织标本,实时定量逆转录多聚酶链反应检测小鼠体内miRNA-122和炎症因子的表达,LNA（锁核酸）-Northern blot验证miRNA-122的表达,生化分析仪检测血清中ALT、AST水平,酶联免疫吸附法检测血清中炎症因子水平.组间均数比较用two-WayANOVA方差分析,相关性分析采用Pearson和Spearman相关分析.结果 D-GalN/LPS给药24 h,小鼠病死率率达80%以上,而3个对照组则无一只小鼠死亡;肝脏特异性miR-122在正常小鼠肝脏内含量丰富（ct≈14）,D-GalN/LPS诱导后1 h,miR-122即发生了明显的变化（P=0.013）,表现为上调,之后随疾病的进展,miR-122表达进行性下降,9 h下调最为明显（ct≈15,P=0.002）;ALT/AST于给药1 h无明显变化,3 h后呈明显上升趋势,7 h达高峰,之后ALT/AST急剧下降;对miR-122和ALT的表达对比,发现在该模型中miR-122比ALT变化快,且持久;肝衰竭相关炎症因子肿瘤坏死因子（TNF）α和白细胞介素（IL）-6在肝组织和血清中的变化一致,均上调（P〈0.05）; miR-122和ALT、TNFα和IL-6的相关性分析显示miR-122与以上三项指标均呈良好的相关性（相关系数分别为-0.505、0.493和0.674、）.结论 肝衰竭小鼠体内肝脏特异性miR-122和ALT呈负相关关系,但又较ALT更敏感,更持久地反映肝细胞损伤程度,且miR-122表达变化与肝脏炎症损伤相关因素TNF α、IL-6均具良好的相关性,推测miR-122有望成为�
- 安方梅余东山谢青龚邦东王晖郭清俞红
- 关键词：D-氨基半乳糖脂多糖小鼠
- 人脐带间充质干细胞对急性肝功能衰竭小鼠肝组织微小核糖核酸-155和肿瘤坏死因子表达的影响
- 2014年
- 目的探讨间充质干细胞（MSC）对急性肝功能衰竭（ALF）小鼠肝组织中miRNA-155和TNF表达的影响，以及与MSC疗效间的关系。方法采用随机数字表法和随机数余数分组法将BALB／c清洁级小鼠96只分为4组，即健康对照组、急性肝功能衰竭组、MSC治疗组和MSC预防组各24只。ALF组予以D—GaIN900mg／kg＋脂多糖10μg／kg腹腔注射建立模型；MSC治疗组在900mg／kg D—GalN＋10μg／kg脂多糖腹腔注射后2h，予以尾静脉注射MSC1×10^6；MSC预防组在900mg／kgDGalN＋10ug／kg脂多糖腹腔注射前予以尾静脉注射MSCl×10^6；健康对照组予以0．9％氯化钠溶液1mL腹腔注射。给药7h后每组处死小鼠12只，检测小鼠血清肝功能，ELISA法检测TNF水平，实时定量PCR检测肝组织miRNA-155、TNFmRNA。余下每组12只小鼠观察24h生存率。组间均数比较用单因素方差分析，相关性分析采用Pearson和Spearman相关分析。结果胁GalN／脂多糖诱导7h后，MSC预防和MSC治疗组小鼠ALT水平均较ALF组降低，差异均有统计学意义（q值分别为13．20和4．58，均P〈0．01）；MSC预防组和MSC治疗组AST水平均较ALF组降低，差异均有统计学意义（q值分别为18．90和9．83，均P〈0．01）。与ALF组相比，MSC预防组和MSC治疗组血清TNF水平均有所降低，差异均有统计学意义（q值分别为14．70和3．95，均P〈0．01）。健康对照组、ALF组、MSC治疗组和MSC预防组小鼠肝组织TNFmRNA表达水平分别为1．0±0．3、19．2±2．2、6．6±1．7和4．3±0．9，组间比较差异有统计学意义（F=72．24，P〈0．01）。与ALF组相比，MSC预防组和MSC治疗组小鼠肝组织TNFmRNA表达水平均有下调，差异均有统计学意义（q值分别为31．40和21．72，均P〈0．01）。与ALF组相比，MSC预防组和MSC治疗组小鼠肝组织miRNA-155水平均有下调，差异均有统计学意义（q值分别为19．40和9．58，均P〈0．01）。ALF组小鼠肝�
- 龚邦东安方梅景波余东山李婧房星星张晓宇程昉冯润谢青汤建平
- 关键词：微小核糖核酸肿瘤坏死因子类
- miR-1187靶向调节Caspase-8在干预细胞凋亡中的研究
- 目的通过miR-1187靶向调节Caspase-8的表达,进而干预细胞凋亡的发生。方法应用BALB/C小鼠构建重型肝炎模型,取肝组织进行LNA-miRNA微阵列分析。体外培养embryonic murine hepato...
- 余东山安方梅谢青
- 文献传递
- 旁路途径治疗肝衰竭高氨血症
- 2010年
- 余东山谢青
- 关键词：高氨血症肝衰竭旁路途径神经系统并发症病理生理机制大脑功能障碍
- D-氨基半乳糖联合脂多糖诱导急性肝功能衰竭小鼠血清微小核糖核酸的表达被引量：2
- 2013年
- 目的探讨D-氨基半乳糖联合脂多糖诱导急性肝功能衰竭小鼠血清微小核糖核酸（miRNA）的表达变化以及与肝组织miRNA的相关性。方法Balb／C清洁级小鼠40只分为两组，模型组32只，对照组8只。模型组应用D-氨基半乳糖联合脂多糖诱导Balb／C小鼠急性肝功能衰竭，对照组腹腔注射0．9％氯化钠溶液1mL。模型组给药后0、3、5和7h分别处死小鼠各8只，采集血清及肝组织，观察小鼠给药后肝功能生物化学指标及肝组织病理学变化。抽提血清及肝组织miRNA，取0、5和7h肝组织进行锁核酸（LNA）-miRNA微阵列分析，并用实时定量反转录PCR检测miRNA。组间均数比较用单因素方差分析，相关性分析采用Pearson和Spearman相关分析。结果随着小鼠急性肝功能衰竭的发生，肝组织miRNA的表达发生显著变化，共有21个miRNA明显上调，27个miRNA明显下调，其中miRNA-122和miRNA-1187表达下调，miRNA-146a、miRNA-155表达上调。经PCR验证发现小鼠肝组织miRNA-122和miRNA-1187表达逐渐下调，血清miRNA-122和miRNA-1187的表达则逐渐上调；炎性相关的miRNA-146a和miRNA-155在肝组织和血清中表达均明显增加。小鼠miRNA-122和miRNA-1187在组织与血清中的表达呈负相关（r值分别=-0．477和-0．420，P值分别=0．0089和0．0231），而miRNA-155在组织与血清中表达呈正相关（r=0．678，P=0．0001）。小鼠血清miRNA-122（r值分别=0．571和0．554）、miRNA-1187（r值分别=0．471和0．542）的相对表达量与ALT和AST水平均呈正相关（均P〈0．05）。血清miRNA-122和miRNA1187在给药5h上升显著，早于血清转氨酶的变化。结论急性肝功能衰竭小鼠肝组织和血清miRNA-122和miRNA-1187的表达呈负相关，血清中miRNA-122、miRNA-1187的变化早于血清转氨酶的变化，有可能成为早期预测肝损伤的血清标志物。
- 王伟静安方梅余东山赵钢德项晓刚赖荣陶桂红莲郭斯敏王晖谢青
- 关键词：微小核糖核酸半乳糖胺脂多糖类微阵列分析
