刘亚萍
- 作品数：13 被引量：31H指数：3
- 供职机构：首都医科大学附属北京安贞医院北京市心肺血管疾病研究所更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金首都医学发展科研基金北京市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 231培养液培养成人大隐静脉平滑肌细胞被引量：3
- 2006年
- 目的:应用231培养基培养成人大隐静脉平滑肌细胞探讨其有效方法。方法:实验于2004-11/2005-3在首都医科大学附属北京安贞医院北京心肺血管疾病研究所中心实验室完成。①平滑肌细胞分离:40例冠状动脉旁路移植术患者(年龄43～74岁)术中废弃的大隐静脉,经患者同意无菌取2.0～3.0cm。2.5g/L胰蛋白酶溶液吹打消化15min,去除内皮细胞,同时松动平滑肌细胞,便于细胞游离出组织块生长。将血管剪成2.0～3.0mm2的小块贴到培养瓶底,加入完全231培养液3mL,直立放入37℃、体积分数为0.05的CO2、饱和湿度的培养箱中,24h后将培养瓶放平使培养液浸没组织块继续培养。②平滑肌细胞传代:当细胞延组织块周围密集成片生长时,即可传代。③平滑肌细胞形态观察:应用倒置显微镜观察平滑肌细胞生长状况,记录生长曲线,观察各生长时期变化。④平滑肌细胞鉴定:应用透射电镜和免疫组织化学方法鉴定平滑肌细胞。结果:①大隐静脉平滑肌细胞形态观察结果:大隐静脉平滑肌细胞原代培养沿组织块长出时间为2～14d,经过7d潜伏期细胞进入对数生长期,细胞呈“峰谷”长势。原代细胞培养第(25±2.1)天传第1代,传代24h后进入对数生长期,细胞传10代以上仍保持良好的形态结构。培养成功率100%。培养过程中未见杂细胞或微生物污染。②大隐静脉平滑肌细胞鉴定结果:电镜下观察,胞浆内富含肌丝,纵向平行排列,胞内有密体,具有平滑肌细胞特征;抗α平滑肌肌动蛋白免疫组织化学染色后可见胞浆内染成褐色呈细丝网状,所有细胞均呈阳性染色。证实培养细胞为平滑肌细胞。结论:利用消化贴块方法分离人大隐静脉平滑肌细胞,应用231培养基进行培养,不仅培养成功率高,并且可产生高纯度及多数量的平滑肌细胞。技术具有操作简便,污染机会少,为心血管疾病研究和组织工程学研究及应用提供可�
- 赵莉敏温绍君刘雅刘洁琳刘亚萍陈新军王世奇
- 关键词：隐静脉肌细胞平滑肌细胞培养
- 正常高值血压患者血浆血管活性因子和抗氧化酶的变化及其意义被引量：6
- 2007年
- 目的正常高值血压具有较高的发展成为高血压的危险性。本研究的目的是观察正常高值血压患者血浆中血管活性因子和抗氧化酶的变化,以探讨其在高血压治疗和预防方面的意义。方法根据 JNC-7诊断标准筛选病例并分为三组:正常血压组(NT 组)为74例正常血压健康人,男性38例,女性36例,平均年龄(47.15±7.77)岁;正常高值血压组(PH 组)为51例正常高值血压患者,男性29例,女性22例,平均年龄(47.82±5.16)岁;高血压组(EH 组)为71例原发性高血压患者,男性37例,女性34例,平均年龄(48.25±7.97)岁。抽取静脉血,离心后分别采用放免法和酶联免疫法测定血中的血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、内皮素(ET)、血管加压素(AVP)、降钙素基因相关肽(CGRP)、一氧化氮合成酶(NOS)、超氧化物岐化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)等含量。结果与 NT组相比,EH 组和 PH 组血中甘油三酯、总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇水平明显升高(P<0.05);高密度脂蛋白胆固醇在 PH 组中降低,EH 组明显降低(P<0.05);AngⅡ、AVP 和 ET 在 EH 组和 PH 组均增高(P<0.05);CGRP 在 PH 组和 EH 组均下降(P<0.05;P>0.05);NOS 在三组之间无明显的差异;SOD 在 PH 和 EH 组明显下降(P<0.05;P<0.01)而 GPX 明显增高(P<0.05;P<0.01)。结论 PH 患者血中脂类物质、血管活性物质、抗氧化酶出现了异常变化,这会增加患高血压的可能性。为尽可能减少和防止其进展为高血压,应该对 PH 患者进行相应的治疗和控制。
- 王佐广刘洁琳刘雅温绍君文杰刘亚萍陈新军吴兆苏
- 关键词：血管活性肽抗氧化药
- 心血管疾病的基因治疗进展被引量：3
- 2007年
- 刘亚萍陈新军温绍君
- 关键词：人类基因治疗心血管疾病家族性高胆固醇血症低密度脂蛋白受体腺苷脱氨酶基因产物
- 增殖抑制基因在原发性高血压患者血管平滑肌细胞增殖中的作用被引量：9
- 2007年
- 目的探讨增殖抑制基因(HSG)在原发性高血压患者血管平滑肌细胞增殖中的作用。方法选取2006年4月至9月在北京安贞医院行冠状动脉旁路移植术的患者54例,分为高血压冠状动脉旁路移植组(n=28)和正常血压冠状动脉旁路移植组(n=26)。术前留取两组患者静脉血,测定血液生化指标,用放射免疫测定法测定内皮素(ET)和肾素-血管紧张素-醛固酮系统等血管活性多肽;用 Trizol 一步法提取白细胞、组织和培养血管平滑肌细胞(VSMC)的总 RNA,行半定量 RT-PCR 扩增反应,观察两组患者 HSG 的表达情况。结果两组指标的血压和体质指数(BMI)的差异具有统计学意义(P<0.01)。BMI 与血糖、BMI 与收缩压、BMI 与舒张压、血糖与甘油三酯、收缩压与舒张压之间存在着明显的正相关(P<0.05)。五种血管活性物质均存在高血压搭桥组患者高于正常血压搭桥组患者的趋势,差异没有统计学意义。白细胞、血管组织和 VSMC 中 HSG 的表达在高血压搭桥组较正常血压搭桥组低(P<0.05)。相关性分析表明:血管 HSG 表达与 BMI、收缩压、舒张压之间存在着明显的负相关(P<0.05)。结论在高血压冠心病患者和正常血压冠心病患者之间,无论在白细胞、VSMC 还是在血管组织,都存在 HSG 表达差别,高血压组的 HSG 表达水平均低于正常血压组。在血管组织中,HSG 的表达与 BMI、收缩压和舒张压呈负相关。说明 HSG 是一种新型的抑制血管平滑肌细胞增殖的基因,其在血管平滑肌中的表达与血压呈负相关。
- 刘亚萍温绍君刘雅赵莉敏郭艳红陈新军王佐广刘洁琳文杰王世奇汤健
- 关键词：高血压基因血管
- 血管平滑肌细胞增殖抑制基因的研究近况被引量：6
- 2007年
- 刘亚萍刘雅王佐广温绍君
- 关键词：血管平滑肌细胞增殖抑制基因细胞增殖作用CELL
- 血管增殖抑制基因在原发性高血压患者血管平滑肌细胞增殖中的作用
- [研究背景]
据WHO 2003年最新统计由于高血压所造成的死亡占总死亡人数的18％，每年有710万人死于与高血压相关的疾病，而且62％的中风与49％的心血管疾病与高血压相关。据估计目前中国有近2亿患者。其患病...
- 刘亚萍
- 关键词：高血压冠状动脉旁路移植术HSG细胞培养反转录
- 文献传递
- M-200培养液培养成人大隐静脉内皮细胞
- 本文对应用M-200培养基培养成人大隐静脉内皮细胞进行了研究。文章选取28例冠脉搭桥患者(年龄45-70岁)术中废弃大隐静脉,采用酶消化法分离血管内皮细胞,用M-200培养基按1x104/cm2接种细胞进行原代培养,观察...
- 赵莉敏温绍君刘洁琳刘雅刘亚萍陈新军王世奇
- 关键词：细胞培养大隐静脉内皮细胞生物医学
- 文献传递
- 血管紧张素Ⅱ与血管紧张素-(1-7)对人血管平滑肌细胞内游离钙浓度的影响
- 2005年
- 目的：观察血管紧张素Ⅱ与血管紧张素-(1-7)分别刺激后，培养的人血管平滑肌细胞内游离Ca^(2+)浓度的变化情况。 方法：实验于2004-06／2004-12在首都医科大学附属北京安贞医院高血压研究室完成。①收集2004-06／2004-09安贞医院心脏外科进行冠状动脉旁路移植术患者术中剩余大隐静脉，进行体外人血管平滑肌细胞培养，并分为高血压搭桥组(n=23，男22例，女1例)和正常血压搭桥组(n=17，男16例，女1例)。②用钙荧光探针Fluo-3／AM作为钙指示 剂，利用激光共聚焦显微镜观察不同浓度的血管紧张素Ⅱ和血管紧张素-(1-7)分别刺激后的平滑肌细胞内游离钙浓度的变化情况。 结果：①在分别加入血管紧张素Ⅱ和血管紧张素-(1-7)前，细胞内的Ca^(2+)也具有一定的荧光光密度，但是相对较低。②经血管紧张素Ⅱ和血管紧张素-(1-7)刺激后人平滑肌细胞内Ca^(2+)均迅速升高。③高血压搭桥组血管紧张素Ⅱ刺激后平滑肌细胞胞内Ca^(2+)荧光光密度明显高于正常血压搭桥组，而经血管紧张素-(1-7)刺激后，高血压搭桥组平滑肌细胞胞内Ca^(2+)荧光光密度明显低于正常血压搭桥组。 结论：①血管紧张素Ⅱ和血管紧张素-(1-7)刺激后人血管平滑肌细胞存在胞内Ca^(2+)的变化。②抑制血管紧张素Ⅱ介导的平滑肌细胞内游离Ca^(2+)浓度增加可能是血管紧张素-(1-7)的舒血管机制之一。
- 刘雅温绍君赵莉敏刘洁琳文杰王佐广刘亚萍陈新军
- 心脏病患者心包组织分泌内皮素的研究被引量：1
- 2008年
- 目的探讨人心包间皮细胞能否分泌内皮素（ET）。方法利用放射免疫分析方法分别检测行心内直视术的51例心脏病患者心包液、血浆和心包组织的ET含量，利用原位杂交方法观察患者心包组织是否存在ETmRNA的表达。结果心脏病患者心包液中ET浓度显著高于血浆中ET浓度[分别为（128．8±44．0）ng／L及（93．7±28．6）ng／L，P〈0．001]；心脏病患者心包组织中含有高浓度的ET[（510．3±156．7）ng/kg]；心脏病患者心包组织浆膜层间皮细胞的胞浆中存在ETmRNA的表达。结论心脏病患者心包液和心包组织中含有高浓度的ET；人心包组织问皮细胞可以分泌ET．
- 刘洁琳刘雅王佐广文杰王世奇陈新军刘亚萍张维君温绍君
- 关键词：心包内皮缩血管肽类
- 高血压冠状动脉旁路术患者血管紧张素Ⅱ1型受体基因表达水平与血压正常患者的比较被引量：2
- 2006年
- 目的从受体角度,探讨人血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)基因表达与原发性高血压关系。方法收集2004年6月至2004年9月北京安贞医院心脏外科行冠状动脉旁路移植术患者术中剩余大隐静脉约2cm。经筛选,入选患者40例,分为高血压搭桥组23例,男性22例,女性1例,平均年龄(60.00±10.03)岁,和正常血压搭桥组17例,男性16例,女性1例,平均年龄(60.13±9.18)岁。用Trizol一步法提取组织和细胞总RNA。应用Blast程序及PrimerPremier5.0软件,设计AT1R引物,半定量PCR扩增反应,观察2组患者血管紧张素受体的表达情况。结果正常血压搭桥组和高血压搭桥组除血压外(P<0.01),其他指标的差异没有统计学意义。AT1R在平滑肌细胞和血管组织都存在表达,高血压搭桥组AT1R表达水平略高于正常血压搭桥组(P<0.05)。结论平滑肌细胞在基础状态下也存在AT1R的表达;高血压冠心病患者和正常血压冠心病患者之间,平滑肌细胞或血管组织,都存在AT1R表达差别。
- 刘雅温绍君刘洁琳文杰赵莉敏王佐广刘亚萍陈新军
- 关键词：反转录聚合酶链反应基因表达受体血管紧张素高血压
