刘瑛
- 作品数：71 被引量：195H指数：9
- 供职机构：浙江省血液中心更多>>
- 发文基金：浙江省医药卫生科学研究基金浙江省卫生高层次创新人才培养工程项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学电子电信更多>>
- 人类血小板同种抗原相关的膜糖蛋白基因多态性研究
- 2011年
- 目的探讨人类血小板同种抗原（human platelet alloantigen，HPA）-1～17w相关的血小板膜糖蛋白基因多态性。方法以自行设计的PCR引物特异性扩增HPA-1～17w相关的血小板膜糖蛋白基因片段，PCR产物经酶切纯化后直接进行DNA序列分析，根据序列特征确定HPA基因型和相应膜糖蛋白基因多态性。结果通过对112名随机汉族个体的糖蛋白基因序列分析，发现13个新的单核苷酸多态性位点和1个微卫星重复序列。其中ITGB3基因上的2个变异位点1333G／A和1960G／A引起膜糖蛋白GPⅢa的V419M和E628K氨基酸改变。结论膜糖蛋白基因具有多态性位点，可能引起膜糖蛋白结构的改变，同时可能影响现有部分HPA基因分型方法的准确性。
- 蓝小飞应燕玲刘瑛许先国朱发明吕杭军严力行
- 关键词：遗传多态性膜糖蛋白血小板
- ABH变异型个体血小板表面ABO抗原强度分析
- 许先国洪小珍刘瑛陈舒马开荣蓝小飞何吉朱发明吕杭军
- α-1,3-N-乙酰半乳糖胺基转移酶基因742C>T突变导致A2亚型被引量：10
- 2011年
- 本研究探讨2例ABO亚型A2B的分子机制。利用单克隆抗体检测先证者红细胞ABO血型抗原,用标准A、B、O细胞检测先证者血清中的ABO抗体,采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术扩增先证者ABO基因的第5至7外显子序列,其PCR产物经酶切后直接测序分析。同时,PCR产物经TOPO TA克隆到质粒载体中获得单链,对所得克隆进行ABO基因第6、7外显子双向测序分析。结果表明,先证者红细胞有A、B抗原,同时其血清中存在抗A1抗体。直接测序分析发现,第261位无缺失,第297位A/G、467C/T、526C/G、657C/T、703G/A、742C/T、796C/A、803G/C、930G/A杂合。克隆测序得到B101和1个新的A等位基因。与A102相比,新A等位基因仅在第742位C→T突变,导致第248位精氨酸变成色氨酸,新等位基因已被正式命名为A213。结论 :α-1,3-N-乙酰半乳糖胺基转移酶基因第742位C→T突变导致产生A2表型,表型个体血清中可含有抗A1抗体。
- 洪小珍应燕玲许先国马开荣蓝小飞刘瑛朱发明吕杭军严力行
- 关键词：ABO基因
- 造血干细胞移植术后分子水平复发的研究及其临床应用
- 许先国陈舒应燕玲洪小珍刘瑛蓝小飞何吉朱发明吕杭军严力行
- 该项目从短串重复序列STR、红细胞血型和血小板血型等方面对造血干细胞移植术后复发进行分子水平的监测，取得了以下科研成果：1．优化了造血干细胞移植术后STR监测的荧光半定量技术，分析了各STR位点对受体特异性等位基因的检出...
- 关键词：
- 关键词：造血干细胞移植红细胞血小板
- 中国人罕见的cisAB变异型分子机制分析被引量：41
- 2008年
- 为研究中国人群ABO血型系统中罕见的cisAB变异型的分子遗传背景,用血型血清学方法鉴定12例ABO血型疑难样本和116例随机无血缘关系样本,应用聚合酶链反应和DNA序列分析等方法对样本ABO基因酶活性编码区外显子6、7和侧翼内含子进行突变筛选和检测,并对不同基因型的扩增片段进行单倍体序列分析。血清学检测发现12个样本均为(A强B弱)或(A弱B强),PCR产物直接序列分析表明这些样本均为cisAB变异型,并存在4种基因型。通过单倍体序列分析,从中发现2种cisAB等位基因,其中cisAB01不仅存在外显子7的467C>T和803G>C变异,还在第6内含子存在未经报道的163T>C和179C>T变异;另一种等位基因是在B101基础上保留了A101的803G位点,编码一条176G、235S、266M和268G组合的多肽链。经检索,未发现该组合的ABO等位基因,该等位基因已被国际血型抗原基因突变数据库命名为cisAB05等位基因。文章系统研究了中国人群cisAB变异型分子机制,发现了一种新的cisAB05等位基因,同时根据内含子序列推测cisAB01等位基因可能是通过A101和B101等位基因间的同源交换而形成的。
- 许先国刘瑛洪小珍马开荣朱发明吕杭军严力行
- 关键词：分子机制ABO血型系统
- 人血小板膜糖蛋白ITGB3基因终止突变C．1476G〉A的体外表达研究
- 2016年
- 目的对ITGB3基因新的终止突变c．1476G〉A进行体外表达研究，以阐明其功能。方法应用体外定点诱变技术构建突变型ITGB3e．1476G〉AcDNA的真核表达载体，转化感受态细胞，提取质粒后测序验证。采用非脂质体介导重组质粒转染中国仓鼠卵巢癌细胞株（Chinesehamsterovariancancer，CHO）细胞，经G418筛选获取稳定表达细胞株。采用实时荧光定量PCR、Western印迹和流式细胞术分别检测CHO稳定表达株ITGB3基因的mRNA表达和血小板膜糖蛋白llIa（glycoproteinIIIa，GPⅢa）糖蛋白水平。结果成功构建野生型和突变型ITGB3cDNA的真核表达载体，转染筛选后分别获得了稳定表达的CHO细胞株。突变型细胞株中CD61抗原表达量仅为野生型的37％，而ITGB3mRNA转录水平为野生型的6％。Western印迹结果显示，野生型细胞株稳定表达完整的GPⅢa蛋白，而突变型CHO细胞株无完整的GPⅢa蛋白表达。结论ITGB3c．1476G〉A终止突变可导致ITGB3基因的转录水平降低，影响GPⅢa蛋白合成及CD61抗原的表达水平。
- 刘瑛许先国陈舒洪小珍陶苏丹何吉朱发明吕杭军
- 关键词：体外表达
- 血小板膜糖蛋白基因的新突变点体外表达及其功能研究
- 刘瑛洪小珍马开荣兰小飞徐健
- G突变先证者的血小板CD49抗原和携带GPⅡb c.2722 C＞T突变先证者的血小板CD41抗原表达水平与正常均值无显著差异。该报告为血小板血型研究开拓了新的方向，对于提高血小板抗原相关基因的基础理论、基因诊断以及临床...
- 关键词：
- 关键词：血小板膜糖蛋白血液免疫学输血医学
- GTB等位基因278C＞T导致的BW变异型
- 2006年
- B抗原是在α1,3半乳糖基转移酶(GTB酶)催化下,将供给底物UDP-Gal的半乳糖基转移到接受底物H糖链上形成的.目前确认的B变异型主要有B3、Bx、Bm、Bel和Bw等5类,Bw是一类频率相对较高的B变异型,共发现10种遗传性Bw等位基因,均由GTB等位基因错义突变引起[1～4],笔者在前期研究中报道了中国人群中因721C＞T突变导致的Bw03等位基因[3],在对1个B抗原弱表达的研究中发现,在GTB等位基因第6外显子存在一个新的碱基错义突变.……
- 许先国洪小珍刘瑛吴俊杰马开荣朱发明严力行
- 流式细胞术分析血小板表面CD36糖蛋白的表达研究
- 2012年
- 目的血小板表面CD36抗原缺乏可引起产生抗-CD36免疫反应的风险,是临床产生血小板输注无效的重要原因之一,本研究应用流式细胞术,对浙江地区的单采血小板供者进行血小板表面CD36抗原表达的筛查,并统计无偿献血者的血小板上CD36缺失表型的频率。方法留取献血者新鲜抗凝血样,经离心获取富血小板血浆,洗涤并进行血小板计数,再分别以CD36-FITC和CD41-PE单克隆抗体免疫荧光标记血小板,孵育后上机检测,分析血小板表面糖蛋白CD36的表达情况。结果1)在192名无偿献血者中,筛查出7名血小板表面CD36抗原阴性的献血者,CD36缺失型的表型频率为3.6%,
- 刘瑛许先国洪小珍陈舒蓝小飞马开荣朱发明吕杭军
- 关键词：流式细胞术CD36血小板输注无效抗原表达单采血小板
- Rh阴性育龄或妊娠期女性的血型血清学结果的回顾性研究
- 陈舒洪小珍许先国刘瑛马开荣蓝小飞朱发明吕杭军
