刘祖林
- 作品数：53 被引量：176H指数：8
- 供职机构：遵义医学院附属医院更多>>
- 发文基金：贵州省科技计划项目国家自然科学基金贵州省科学技术基金更多>>
- 相关领域：医药卫生政治法律生物学农业科学更多>>
- 兔动员外周血间充质干细胞集落形成能力与神经元诱导分化研究被引量：2
- 2014年
- 目的研究动员后兔外周血间充质干细胞(PBMSCs)的存在频率,并对PBMSCs进行神经元诱导分化鉴定。方法采用粒细胞集落刺激因子(G-CSF)皮下注射动员,结合密度梯度离心和贴壁培养法分离、培养兔外周血样品中的PBMSCs,利用集落形成率分析动员兔PBMSCs的存在频率,并对PBMSCs的神经元分化能力进行体外诱导鉴定。结果动员后的PBMSCs原代培养24h后,可见较多短梭形及多角形贴壁细胞,3～4d后出现集落样生长,传代培养的PBMSCs形态均一、呈长梭形漩涡状生长;未动员的外周血样品中的贴壁细胞少,集落形成少,且易老化,无法传代。集落形成率实验显示,动员后的PBMSCs在每百万外周血单个核细胞中有2.8～10.8个;而未动员组PBMSCs仅有0～3个。免疫细胞化学染色显示,PBMSCs经神经诱导7d后其神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经元特性核蛋白(NeuN)染色阳性。结论动员剂可提高兔外周血中的PBMSCs含量,所获取的PBMSCs具备神经元分化能力。
- 刘小慧章涛张潜刘金伟刘祖林汤宁宁
- 关键词：神经元诱导分化
- 罗格列酮经PPARγ受体介导HL-60细胞成熟分化被引量：1
- 2009年
- 目的:研究人过氧化物酶体增殖物激活受体γPPARγ)在白血病HL-60细胞分化中的作用.方法:采用Li-pofectamine2000脂质体进行HL-60细胞质粒转染.实验分单纯HL-60细胞培养组,空载体pIRES2-EGFP转染组,10μmol/L罗格列酮干预组和10μmol/L罗格列酮联用phPPARγ-IRES2-EGFP质粒转染组.荧光显微镜观察转染细胞绿色荧光蛋白(GFP)表达.流式细胞仪检测转染效率,并对转染细胞成熟粒-单细胞特异性标志CD11b和CD14的表达进行分析.结果:转染的HL-60细胞可见绿色荧光表达,phPPARγ-IRES2-EGFP质粒转染效率为55%.流式细胞仪检测结果表明,罗格列酮干预组和罗格列酮联用phPPARγ-IRES2-EGFP质粒转染组的CD11b+和CD14+细胞检出率均显著高于未转染细胞组与空载体转染组(P<0.05),且罗格列酮联用phPPARγ-IRES2-EGFP质粒转染具有协同效应;而未转染细胞组与空载体转染组2种表型细胞百分率差异均无统计学意义(P>0.05).结论:罗格列酮可通过激活PPARγ促进HL-60细胞向粒-单细胞成熟分化,有望成为治疗白血病的候选药物.
- 章涛方宁万卫红祁莹刘祖林刘金伟陈代雄
- 关键词：HL-60细胞过氧化物酶体增殖物激活受体Γ罗格列酮
- 人胎盘造血干/祖细胞及淋巴细胞亚群表型的研究被引量：13
- 2004年
- 目的 探讨人胎盘组织中是否含有造血干 祖细胞 (HSPC) ,并分析其淋巴细胞亚群的表型特征。方法 将新鲜胎盘制成单个细胞悬液 ,用流式细胞仪分析其有核细胞中HSPC、淋巴细胞及其亚群的表型特征 ,并用流式细胞术 (FCM)或MiniMACS分选胎盘CD34 + 细胞。结果 胎盘CD34 + 细胞百分率是脐带血的 8.8倍 ,CD34+ CD38- 细胞和CD34+ CD38+ 细胞百分率分别为脐带血的 4 .6倍和 11.9倍 ;FCM分选胎盘CD34+ 细胞的回收率和纯度分别为 (6 3.0 5± 10 .14 ) %和 (86 .39± 11.2 7) % ;胎盘中的淋巴细胞总数、T细胞 (CD3+ CD2+ )、B细胞 (CD1 9+ )、Th(CD3+ CD4+ )细胞及Th Ts比值均明显低于脐带血 ,而CD8+ CD2 8- T抑制细胞则明显高于脐带血。结论 人胎盘富含HSPC ,在胎儿期具有重要的造血功能 ,可望成为HSPC移植的重要资源。CD8+ CD2 8- T抑制细胞可能在胎 母免疫耐受中起重要作用。
- 陈代雄方宁刘祖林万卫红祁莹刘金伟肖建辉章涛
- 关键词：人胎盘组织淋巴细胞亚群造血祖细胞
- 无定形水凝胶敷料对大鼠皮肤烫伤及创伤模型的疗效分析被引量：3
- 2017年
- 目的:探讨无定形水凝胶敷料对大鼠深Ⅱ度烫伤及创伤模型的治疗应用效果。方法:分别制备大鼠深Ⅱ度烫伤及创伤模型,给予无定形水凝胶创面涂抹治疗,观察2类创面的完全脱痂时间、完全愈合时间及组织病理学特征;同时采用康惠尔水凝胶敷料(简称清创胶)作为平行对照。结果:对于深Ⅱ度烫伤和创伤创面,无定形水凝胶组和清创胶组的上皮化时间均短于相应的模型组,同一类型创面2种敷料治疗的愈合时间无明显差异,但无定形水凝胶组的完全脱痂时间短于清创胶组。病理结果显示,2种敷料使用后的皮肤烫伤创面上皮细胞、新生毛细血管及成纤维细胞数多于烫伤模型组,而炎症细胞数少于烫伤模型组;2种创面完全愈合后无定形水凝胶组的毛囊、汗腺均明显多于清创胶组。结论:无定形水凝胶主要通过促进创面上皮化缩短创面修复时间,在促进毛囊、汗腺形成上更胜一筹。
- 廖昭会付强王达利万卫红刘祖林余丽梅章涛
- 关键词：烫伤创伤创面修复水凝胶
- 人胎盘CD133^＋细胞体外扩增巨核系祖细胞的研究
- 2008年
- 目的探讨人胎盘组织CD133^＋（PT-CD133^＋）细胞体外扩增分化巨核系祖细胞（MPC）的能力。方法采用磁珠激活细胞分选系统（MACS）分选PT—CD133^＋细胞，接种于含TPO、IL-3和SCF的无血清液体培养体系中体外扩增MPC，于培养7、10和14d进行细胞计数，流式细胞术检测细胞扩增过程中CD133、CD34、CD41抗原表达的动态变化，并采用半固体培养法对不同扩增阶段的细胞进行巨核祖细胞集落（CFU-MK）培养。结果培养至7d时，PT—CD133^＋细胞扩增效果最佳，扩增了（13±2）倍，培养至14d，细胞总数扩增了160倍；随着扩增时间的延长，CD133、CD34表达逐渐下调，而CD41的表达逐渐增强，扩增后的巨核系细胞多呈幼稚状态，未见血小板形成；PT—CD133^＋细胞扩增前后均能形成CFU—MK，扩增10d的细胞形成的CFU—MK总数最多，扩增了（54±10）倍。结论人PT—CD133^＋细胞具有体外扩增分化为MPC的能力，培养10d的细胞形成的CFU—MK总数最多。
- 王丽陈代雄方宁章涛刘祖林刘金伟万卫红
- 关键词：CD133巨核细胞胎盘
- 亲子鉴定中男性个体Amelogenin基因座X片断缺失一例报道被引量：3
- 2010年
- 我鉴定中心对亲子鉴定案例进行鉴定分析时,检出1例男性个体Amelogenin基因座X片断缺失,其STR分型图上只存在Y染色体Amelogenin扩增产物,而无X染色体Amelogenin特异性扩增产物,出现AMELX等位基因缺失,现报道如下。
- 胡锡阶刘祖林万卫红
- 人胎盘CD133^＋细胞具有高增殖潜能集落形成细胞特性被引量：2
- 2008年
- 目的通过对人胎盘CD133+细胞群中高增殖潜能集落形成细胞(HPP-CFC)检测与生物学特性的分析,证明人胎盘存在早期造血干/祖细胞(HSPC)。方法采用机械法制备人胎盘组织(PT)单细胞悬液,用Histopaque-1007分离出单个核细胞(MNC),经磁式分选(MACS)富集CD133+细胞,培养28d后观察HPP-CFC集落形成能力,用流式细胞仪(FCM)对分选的细胞组份和HPP-CFC进行表型分析,实验全程用脐带血(UCB)作平行比较分析。结果培养28d后,PT-CD133+与UCB-CD133+细胞组份分别扩增了266和362倍,前者低于后者(P<0.01);PT-CD133+与UCB-CD133+细胞中HPP-CFC分别为(32.4±11.2)/5×103、(17.7±5.7)/5×103,前者形成的HPP-CFC数量明显高于后者(P<0.01);PT-CD133+、UCB-CD133+细胞培养至28d时,除UCB-CD133+组的CD133+CD34-亚群比例无明显改变外,CD133+CD34+、CD133-CD34+和CD133+CD34-(PT-CD133+组)亚型均比培养前减少。结论人胎盘组织CD133+细胞中存在HPP-CFC,说明胎盘CD133+细胞群中存在早期HSPC。
- 刘佳云陈代雄方宁章涛刘祖林祁莹万卫红刘金伟
- 关键词：CD133^+细胞胎盘
- 羊膜间充质干细胞移植改善百草枯中毒肺纤维化大鼠肺组织病理学变化被引量：2
- 2017年
- 目的探讨人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)移植对百草枯中毒肺纤维化大鼠模型肺组织病理学变化的影响。方法将46只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和hAMSCs移植组。2%百草枯灌胃[100 mg/(kg·只)]制备肺纤维化模型,尾静脉移植hAMSCs[2×10~6个细胞/(mL·只)],HE和免疫组化染色后,显微镜下观察肺组织病理学变化。结果与模型组比较,hAMSCs移植组大鼠一般状况较好。肉眼观发现,模型组大鼠两肺叶出现较多大面积白色纤维化病灶,hAMSCs移植组则为较少、散在的点片状病灶。显微镜下可见,模型组大鼠肺组织结构紊乱,肺泡壁增厚,有大面积间质增生和大量炎细胞浸润,而hAMSCs移植组肺组织结构明显改善,肺泡壁多为单层细胞,仅有少量、小面积间质增生,炎细胞浸润显著地减少,且有较多抗人细胞核特异性抗体阳性hAMSCs定植、存活于肺间质,少见于肺泡壁。结论移植的hAMSCs可定植、存活于肺组织,发挥治疗百草枯中毒肺纤维化的作用。
- 李玉香何方王钰莹徐尚福刘祖林万雪余丽梅
- 关键词：肺纤维化百草枯
- 脐血CD133^＋细胞体外扩增巨核系祖细胞的研究
- 2008年
- 本研究探讨脐血CD133+(UCB-CD133+)细胞体外扩增巨核系祖细胞的能力和最佳收获时间。采用免疫磁珠激活细胞分选系统(MACS)分选UCB-CD133+细胞,将纯化的UCB-CD133+细胞接种于含TPO、IL-3和SCF的无血清液体培养体系中体外扩增巨核系祖细胞,在培养第7、10和14天进行细胞计数,流式细胞仪检测扩增过程中CD133、CD34、CD41抗原表达的动态变化,并采用半固体法对不同扩增阶段的细胞进行巨核祖细胞集落形成单位(CFU-MK)培养。结果表明:培养至第7天时,UCB-CD133+细胞扩增效果最佳,扩增了8.2±2.2倍;培养至第14天,细胞总数扩增了116倍;培养至10天时,平均1个CD133+细胞所产生的CD133+CD41+和CD34+CD41+细胞数最多,分别为2.5±0.9和2.6±0.5个,所产生的CD41+细胞为20.3±5.9个;扩增前后的UCB-CD133+细胞均能形成CFU-MK,扩增第10天的UCB-CD133+细胞所形成的CFU-MK总数最多,CFU-MK扩增倍数为59.5±11.8倍。巨核细胞免疫组织化学染色显示,扩增后的巨核系细胞多呈幼稚状态,未见血小板形成。结论:UCB-CD133+细胞具有较强的体外扩增巨核系祖细胞的能力,培养第10天扩增效能最佳。
- 王丽陈代雄方宁刘祖林章涛万卫红祁莹刘金伟
- 关键词：CD133^+细胞巨核系祖细胞体外扩增脐血
- 人胎盘造血干／祖细胞的增殖分化能力被引量：6
- 2006年
- 近年来有研究表明，人胎盘组织富含造血干细胞，而且其CD34^＋CD38^-、CD34^＋CD38^＋造血干／祖细胞（HSPC）的百分率明显高于脐血。但有关人胎盘组织CD34^＋HSPC亚群的增殖分化能力的研究却未见报道。我们采用免疫磁珠分选人胎盘组织CD34^＋CD38^-和CD34^＋CD38^＋HSPC亚群，并用不同培养体系进行血细胞集落培养，以评价其增殖分化能力。
- 章涛陈代雄方宁刘祖林祁莹刘金伟万卫红肖建辉肖瑜
- 关键词：人胎盘组织分化能力百分率
