周卫斌
- 作品数：18 被引量：30H指数：4
- 供职机构：中国科学院过程工程研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程理学更多>>
- 聚乙二醇伴随式离子交换层析分离重组乙肝病毒表面抗原被引量：3
- 2005年
- 针对由中国仓鼠卵巢细胞(CHO)表达的多聚亚基蛋白HBsAg在离子交换层析过程中容易因亚基解离而导致蛋白解聚和丧失生物活性的难题,实验中选择聚乙二醇(PEG)作为保护剂伴随式(Polyethylene Glycol-Accompanied)离子交换层析分离纯化HBsAg。实验表明,在流动相中加入1%PEG10000(WV)作为纯化伴侣,HBsAg的回收率由55%左右提高到80%以上,纯化倍数基本保持在12左右。对纯化产物进行SDS_PAGE分析表明,1%PEG10000的纯化伴侣伴随式离子交换层析能全部保留HBsAg的糖基化蛋白单体(27kD和30kD),高效液相色谱联用多角度激光散射(High Performance Size Exclusion Chromatography-Multiangle Laser Light Scattering,HPSEC-MALLS)进一步分析阐明了PEG能促使HBsAg颗粒尺寸分布更均一,结构更接近天然乙肝表面抗原。
- 闭静秀周卫斌李岩黄永东张焱董爱华苏志国
- 关键词：聚乙二醇乙肝表面抗原离子交换层析
- 一种分离纯化汉逊酵母表达的重组乙肝表面抗原的方法
- 本发明涉及一种分离纯化汉逊酵母表达的重组乙肝表面抗原的方法，其集成了细胞破碎、层析和膜分离等技术，具体包括：将常规工艺发酵培养得到的汉逊酵母表达的重组乙肝表面抗原培养液破碎至细胞破碎率达到50～90%；离心除去细胞碎片，...
- 闭静秀周卫斌苏志国李岩黄永东赵岚张焱
- 文献传递
- 分子排阻色谱-多角度激光散射仪联用在线检测重组乙肝表面抗原（HBsAg）的分子量和颗粒大小
- ＜正＞ 重组乙肝表面抗原（HBsAg）免疫原性的强弱与其分子量和颗粒大小密切相关。在HBsAg的分离纯化过程中在线检测HBsAg的分子量和颗粒大小对乙肝疫苗生产过程的质量控制具有重要意义。
- 周卫斌闭静秀李岩张焱苏志国
- 文献传递
- HBsAg和BSA的超滤行为研究
- 用截留分子量为50 万的超滤膜对HBsAg 纯品和BSA 纯品的混合物进行了分离。发现HBsAg 纯品和BSA 纯品在超滤过程中可以得到很好的分离，而细胞培养液上清中二者采用超滤并不能得到很好的分离。结合SDS-PAGE...
- 李岩周卫斌黄永东闭静秀苏志国
- 关键词：乙肝病毒表面抗原牛血清白蛋白
- 文献传递
- 一种琼脂糖疏水层析介质及其在纯化酵母表达HBsAg中的应用
- 本发明涉及一种琼脂糖疏水层析介质，结构式如式I所示，是以琼脂糖凝胶为基质，经环氧活化后与丁硫醇偶联，制得的以硫原子为基原子、以丁基为配基、配基密度为60～1250μmol/g干胶的琼脂糖疏水层析介质；式I其中：<Imag...
- 赵岚苏志国闭静秀周卫斌王阳木李岩黄永东
- 文献传递
- 一种分离纯化汉逊酵母表达的重组乙肝表面抗原的方法
- 本发明涉及一种分离纯化汉逊酵母表达的重组乙肝表面抗原的方法，其集成了细胞破碎、层析和膜分离等技术，具体包括：将常规工艺发酵培养得到的汉逊酵母表达的重组乙肝表面抗原培养液破碎至细胞破碎率达到50～90％；离心除去细胞碎片，...
- 闭静秀周卫斌苏志国李岩黄永东赵岚张焱
- 文献传递
- 纯化伴侣对重组乙肝病毒表面抗原在离子交换层析分离的影响
- ＜正＞ 我国乙肝病毒的感染者占世界被感染者的10%,根据我国免疫接种计划乙肝表面抗原（HBsAg）是我国需求量最大的重组蛋白。针对多聚亚基蛋白在离子交换层析过程容易解聚导致蛋白丧失其生物活性,实验中选择聚乙二醇（PEG）...
- 闭静秀周卫斌孙娟李岩张焱苏志国
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- 重组乙肝表面抗原分离纯化及其分子特性研究
- 作为多聚亚基蛋白，乙肝表面抗原(HBsAg)的纯化工艺均具有活性回收率偏低的缺点，限制了其作为乙肝疫苗推广应用。为提高HBsAg活性回收率，本文对分别由CHO细胞和汉逊酵母细胞表达的HBsAg的分离纯化过程进行了优化，并...
- 周卫斌
- 关键词：乙肝疫苗乙肝表面抗原分子特性
- 一种琼脂糖疏水层析介质及其在纯化酵母表达HBsAg中的应用
- 本发明涉及一种琼脂糖疏水层析介质，结构式如式I所示，是以琼脂糖凝胶为基质，经环氧活化后与丁硫醇偶联，制得的以硫原子为基原子、以丁基为配基、配基密度为60～1250μmol/g干胶的琼脂糖疏水层析介质；<Image fil...
- 赵岚苏志国闭静秀周卫斌王阳木李岩黄永东
- 文献传递
- PEG沉淀结合层析分离重组乙肝病毒表面抗原被引量：6
- 2006年
- 应用聚乙二醇(PEG)沉淀结合层析技术纯化乙肝病毒表面抗原(HBsAg),对PEG浓度、pH值、离子强度等影响PEG沉淀的因素进行了正交实验研究.结果表明,浓度为0.12g/mL的PEG6000在4℃,pH9.0条件下沉淀HBsAg纯化效果比较理想,纯化倍数达3.7,回收率96.8%,有效地去除了生物大分子杂质和牛血清白蛋白(BSA),PEG在后续的凝胶过滤中可以除去,整个工艺的回收率可提高到41%.
- 张焱闭静秀周卫斌李岩董爱华孙娟苏志国
- 关键词：分离纯化
