周珠哈
- 作品数：8 被引量：12H指数：2
- 供职机构：温州医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人乳头瘤病毒16型次要结构蛋白家兔免疫血清的制备及其特性研究被引量：3
- 2010年
- 目的制备高效价人乳头瘤病毒(HPV)16型次要结构蛋白(L2)特异性兔血清抗体,并对其效价及其与HPV16 L2蛋白结合的特异性进行鉴定。方法将重组质粒PGEX-4T-1-HPV16 L2转化至E.coliBL21(DE3)中,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导蛋白表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定融合蛋白的抗原性;经镍螯合亲和层析柱(Ni-NTA Agarose)纯化HPV16 L2全长融合蛋白,纯化蛋白用佐剂乳化后经日本大耳白家兔背部皮下多点免疫注射,间隔2周后加强免疫,共2次,并分别于免疫前和每次免疫后1周取血,采用Western blot检测血清抗体的特异性,采用ELISA法检测血清抗体水平及变化趋势。结果家兔用HPV16 L2融合蛋白全程免疫后均产生了抗HPV16 L2抗体,ELISA法检测最高滴度达1∶256 000;Western blot检测显示,该抗体能识别HPV16 L2蛋白。结论用原核HPV16 L2全长蛋白免疫家兔,可获得高效价的血清抗体,该抗体具有与HPV L2蛋白结合的特异性。
- 李玲玲周珠哈朱珊丽薛向阳张丽芳
- 关键词：人乳头瘤病毒16型抗体
- 人乳头瘤病毒L2氨基端蛋白的同源性及其交叉反应特性研究
- 2010年
- 目的 研究人乳头瘤病毒（HPV）次要衣壳蛋白（L2）在临床常见HPV感染型别中的同源性及其交叉反应特性.方法 采用生物信息学方法对临床常见HPV感染型别中的L2氨基酸序列进行比对,发现其氨基端1～200序列具有高度同源性.采用PCR法从宫颈癌患者组织DNA中扩增HPV16 L2（1～200）肽段的碱基序列,将其克隆至原核表达载体PGEX-4T-1得到重组质粒PGEX-4T-1-HPV16 L2（1～200）.将测序鉴定正确的重组质粒转入E.coli BL21（DF3）中,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定;进一步通过Western blot检测HPV16L2（1～200）融合蛋白与HPV6、11、16和18型DNA检测阳性临床患者血清的特异性结合能力;以镍螯合亲和层析柱（Ni-NTA Agarose）纯化的HPV16 L2（1～200）融合蛋白作为包被抗原,采用间接ELISA法对98例尖锐湿疣患者、135例宫颈癌患者及96例健康对照者血清进行特异性血清IgG抗体检测.结果 在HPV6、11、18、35等14个临床常见型别中,与HPV16 L2的1～200间的氨基酸序列比较,同源性达到52.7%～74.3%;成功构建了含有HPV16 L2（1～200）的重组质粒PGEX-4T-1-HPV16 L2（1～200）,含有HPV16 L2（1～200）的融合蛋白在原核表达体系中呈高效表达,表达量占总蛋白的22.6%;表达产物的相对分子质量（Mr）约49×103,与预期Mr相符;以HPV6、11、16和18 DNA阳性患者血清为一抗进行Western blot分析,结果显示,在Mr约49×103处出现特异性条带.ELISA结果显示,尖锐湿疣组、宫颈癌组患者血清及健康对照者血清抗体均值分别为0.753±0.262、0.756±0.274和0.178±0.157,阳性率分别为89.8%、88.9%和9.4%.三组间血清抗体均值及阳性率比较差异均具有统计学意义（P均＜0.001）,而尖锐湿疣组和宫颈癌组间的血清抗体均值比较差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 HPV L2 N端1～200氨基酸序列具有高度同源性,并在HPV6、11、16和18型别间具有交�
- 李玲玲赵朋云王佳周珠哈朱珊丽薛向阳张丽芳
- 关键词：人乳头瘤病毒同源性
- 查尔酮衍生物H175促结肠癌细胞凋亡及其机制研究
- 2015年
- 目的 通过对经初步筛选证明具有生物活性的查尔酮类似物H175可能涉及的信号通道进行检测,进一步明确其抗肿瘤活性及作用机制.方法 对于以查尔酮为先导物设计合成类似物,用MTT法检测其对小鼠结肠癌细胞（CT26）的杀伤作用,筛选出具有较好生物活性的化合物H175.通过流式细胞技术检测H175诱导CT26细胞凋亡和抑制细胞周期的情况.Western blot法检测CT26细胞中H175对于活性转录因子4（activating transcriptional factor 4,ATF-4）及DNA损伤诱导基因（DNA damage-inducible gene 153,CHOP）表达的影响.利用siRNA技术敲除CHOP后,用免疫荧光和流式细胞技术检测H175对于细胞凋亡的影响.结果 通过对113个自行设计合成查尔酮类似物进行筛选,发现H175对CT26细胞具有较强的增殖抑制作用（IC50=1.9 μmol/L）.流式细胞技术检测发现H175通过诱导CT26细胞发生凋亡并抑制细胞周期发挥其生物活性.Western blot检测发现H175剂量依赖性激活内质网应激信号通路中的关键蛋白CHOP,并通过siRNA基因沉默技术进一步确证H175是通过刺激CHOP的过表达发挥促进细胞凋亡的作用.结论 查尔酮类似物H175通过激活内质网应激信号通道中的关键蛋白CHOP发挥对结肠癌CT26细胞的增殖抑制作用.
- 孙余省方军金劲激陶礼钧周珠哈朱冠保
- 关键词：结肠肿瘤细胞凋亡
- hsa_circ_0001322在胃癌组织中的表达及其临床意义
- 2022年
- 目的:探讨hsa_circ_0001322在胃癌组织中的表达情况及其临床意义。方法:收集2019年10月至2020年4月温州医科大学附属第一医院收治的54例胃癌患者肿瘤组织及其癌旁正常胃黏膜组织,采用实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测胃癌组织及其正常胃黏膜组织中hsa_circ_0001322的相对表达量并分析其与临床病理特征的关系。结果:胃癌组织hsa_circ_0001322相对表达量低于癌旁正常胃黏膜组织(0.309 vs.1.000,P<0.05)。临床病理特征关联分析发现淋巴结转移组患者胃癌组织中hsa_circ_0001322的相对表达量低于无淋巴结转移组(0.208 vs.0.391,P<0.05),偏相关分析结果表明排除患者年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤部位、肿瘤浸润深度和细胞分化程度的影响后,hsa_circ_0001322的表达量与胃癌的淋巴结转移存在负相关(r=-0.587,P<0.05)。ROC曲线分析结果显示hsa_circ_0001322的相对表达量判断胃癌发生淋巴结转移的曲线下面积(AUC)为0.808,以相对表达量0.254作为截断值时,其敏感度和特异度分别为90.0%和75.0%。结论:hsa_circ_0001322在胃癌组织中相对低表达,并且其表达变化与淋巴结转移显著相关,可能是胃癌诊断和预测淋巴结转移的潜在生物标志物。
- 武文一白永愉庄晓鹏蔡一奇周珠哈阮小蛟
- 关键词：胃癌分化淋巴结转移
- 人类表皮生长因子受体2的B细胞表位初步预测分析被引量：2
- 2010年
- 目的预测人类表皮生长因子受体2(HER2/neu)的B细胞表位,为肿瘤免疫治疗提供理论基础。方法以生物信息学软件综合预测筛选HER2/neu可能B细胞表位,以吴氏平均抗原性指数为标准,确定目的表位。结果HER2/neu为一跨膜蛋白,其二级结构中以无规则卷曲的区域出现较多。其N端第497～504,939～943,1 106～1 116,1 140～1 158,1 166～1 175,1 225～1 234,1 240～1 246区段,可能为HER2/neu的优势B细胞表位。结论应用多参数预测HER2/neu的B细胞表位,可进一步为HER2/neu相关肿瘤治疗性表位疫苗分子设计和研究提供理论依据。
- 周珠哈王安吴乐朱珊丽朱冠保张丽芳
- 关键词：人类表皮生长因子受体2B细胞表位预测肿瘤疫苗
- 黑色素瘤抗原-3的二级结构及B细胞表位的初步预测分析
- 目的对黑色素瘤抗原-3(MAGE-3)的二级结构及其B细胞表位进行初步预测分析。方法应用计算机软件,用SOPMA、HNN、GOR三种方案分析比较MAGE-3二级结构,并用亲水性、极性、柔韧性、表面可及性和抗原性等多参数分...
- 王安周珠哈朱冠保朱珊丽张丽芳
- 文献传递
- HER2/neu联合细胞表位的预测筛选、基因克隆、表达及鉴定
- 目的:
1.预测表皮生长因子受体2(HER2/neu)的CTL和B细胞联合表位,为其单克隆抗体的制备,表位疫苗设计和相关免疫效应等研究提供理论依据。
2.综和多参数表位预测分析,筛选出3个CTL和B细胞联合表...
- 周珠哈
- 关键词：表皮生长因子受体2基因克隆免疫效应
- 文献传递
- ω-3多不饱和脂肪酸对胃癌术后病人凝血功能和肠蠕动的影响被引量：7
- 2010年
- 目的:探讨ω-3多不饱和脂肪酸对胃癌术后病人凝血功能和肠蠕动的影响及其可能机制。方法:将64例胃癌术后病人分为3组:传统补液营养组(A组,n=20)、肠外营养(parenteral nutrition,PN)和肠内营养(enteral nutrition,EN)组(B组,n=21)、EN和PN加ω-3多不饱和脂肪酸组(C组,n=23)。监测各组病人术后第6天凝血功能和肛门排气时间及术后半小时、第4天和第6天的超氧化物歧化酶(SOD)。结果:术后第6天C组纤维蛋白原(Fbg)与A组、B组相比增高(分别为P<0.05,P<0.01);C组病人SOD数值与A、B组相比下降趋势趋缓;C组病人排气时间要比A组和B组病人短(分别为P<0.05,P<0.05)。结论:术后应用ω-3脂肪酸对凝血功能的作用机制可能是通过纤维蛋白原及抗氧化系统发挥作用;ω-3脂肪酸可能有助于保护胃癌术后病人的抗氧化系统,有利于促进肠蠕动恢复。
- 庄波刘纳新刘栋刘存丽陈震周珠哈余震施红旗
- 关键词：胃肿瘤Ω-3多不饱和脂肪酸凝血功能抗氧化系统肠蠕动
