商正玲 作品数:62 被引量:43 H指数:3 供职机构: 贵州医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 贵州省优秀科技教育人才省长资金项目 国家教育部博士点基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 更多>>
DEN-2 NGC株感染Balb/c小鼠TH1/TH2类细胞因子产生的差异 2007年 陈文捷 左丽 潘宇 商正玲关键词:TH1/TH2类细胞因子 BALB/C小鼠 NGC株 间接ELISA法 2型登革病毒 小鼠血浆 结核杆菌CFP-10/ESAT-6融合基因在耻垢分枝杆菌中的表达及其抗原性的初步研究 被引量:2 2006年 目的构建表达结核分枝杆菌CFP-10/ESAT-6融合蛋白的重组耻垢分枝杆菌,并观察其对巨噬细胞的作用。方法采用SOE法构建CFP-10/ESAT-6融合基因,克隆人大肠杆菌-分枝杆菌穿梭载体pMV261中,将重组质粒电转化耻垢分枝杆菌,SDS-PAGE检测CFP-10/ESAT-6融合蛋白在重组耻垢分枝杆菌中的表达。以重组耻垢分枝杆菌感染小鼠巨噬细胞ANA-1,半定量RT-PCR检测ANA-1细胞一氧化氮合成酶的表达水平。结果经DNA测序证实CFP-10/ESAT-6融合基因序列正确。重组耻垢分枝杆菌经热诱导后可以表达相对分子质量(Mr)约为18×103的融合蛋白,与预期值一致。重组耻垢分枝杆菌能够诱导小鼠巨噬细胞表达一氧化氮合成酶。结论表达CFP-10/ESAT-6融合蛋白的重组耻垢分枝杆菌构建成功,该重组耻垢分枝杆菌能够活化巨噬细胞,具有抗原性,为研制结核疫苗提供一定参考。 李岩 鲍朗 张会东 商正玲 钟琪 李娅莎关键词:CFP-10 ESAT-6 融合基因 重组耻垢分枝杆菌 结核分枝杆菌Rv0901基因重组耻垢分枝杆菌的构建及其细胞作用 被引量:1 2007年 目的 对结核分枝杆菌Rv0901基因的功能进行研究。方法 以PCR扩增Rv0901基因编码序列,定向克隆人穿梭表达质粒pMV261获得重组穿梭表达质粒,将重组质粒电穿孔进入耻垢分枝杆菌,构建重组Rv0901基因的耻垢分枝杆菌,对重组耻垢分枝杆菌进行诱导表达,用SDS-PAGE检测表达结果。比较耻垢分枝杆菌和重组耻垢分枝杆菌对THP-1细胞的不同作用。结果 成功构建重组穿梭表达质粒及重组Rv0901基因的耻垢分枝杆菌,重组菌诱导THP-1细胞的凋亡率高于耻垢分枝杆菌,其感染THP-1细胞后细胞的存活率低于耻垢分枝杆菌的感染,重组菌感染THP-1细胞后细胞培养液中NO(一氧化氮)的产生高于耻垢分枝杆菌的感染。结论 Rv0901基因可能与结核毒力存在一定关系。 钟琪 鲍朗 吴悦涵 李岩 王晓樱 商正玲 张会东关键词:结核分枝杆菌 重组耻垢分枝杆菌 嗜肺军团菌PAL抗原基因的克隆及原核表达 被引量:3 2016年 军团菌病( Legionella disease)是由军团菌( Legionella)引起的以非典型肺炎为主要表现的多系统损害的急性细菌性传染病。此菌及其代谢产物可损害人体的多个脏器,严重影响肺、脾、肾、消化道和中枢神经系统功能。在迄今为止的40年间,此病发病率逐年上升,对人类健康的威胁日趋严重。在军团菌病的临床治疗过程中,早期治疗使用喹诺酮类或大环内酯类药物,疗效非常显著,但如若未能及时治疗,则死亡率可高达50%。目前已确认的军团菌就有近60个种,70多个血清型,其中能引起人类致病的约30种。在早期诊断时,通常采用生化和血清学检验方法,但由于只能检测军团菌中的嗜肺军团菌( Legionella pneumophila, Lp),极易出现漏诊,延误治疗时间。因此,研究探索军团菌病的广谱抗原并实现其基因的克隆及原核表达,是实现军团菌病早期快速、有效诊断的关键。 单阁 姜小华 商正玲 左丽关键词:嗜肺军团菌 抗原基因 原核表达 PAL 中枢神经系统功能 大环内酯类药物 埃及伊蚊腺苷脱氨酶相关基因的鉴定和表达分析 2017年 为了筛选和鉴定埃及伊蚊全基因组中腺苷脱氨酶相关基因,并分析其在蚊虫不同发育时期、雌蚊不同组织中的表达差异,本文运用模式昆虫黑腹果蝇Dm-ADA基因的ADA结构域序列在NCBI埃及伊蚊全基因组数据库中筛选并鉴定埃及伊蚊ADA相关基因,采用ExPASy在线相关工具包分析其理化性质和结构域,运用SignalP4.0预测信号肽,结合使用GeneDoc和Mega6.0软件包进行同源性比对和构建系统进化树构建。首先提取埃及伊蚊不同发育时期(卵、I~Ⅳ龄幼虫、蛹、未吸血雌蚊、雄蚊)、雌蚊不同组织(唾液腺、中肠、脂肪体和卵巢)RNA并逆转录为cDNA,利用荧光实时定量PCR(qRT—PCR)方法对埃及伊蚊不同发育时期和雌蚊不同组织表达谱进行相对定量分析。结果显示,从埃及伊蚊全基因组中获得3条具有完整开放阅读码框的ADA相关基因(Aa-ADAL、Aa-ADGF-A、Aa-ADGF-B);尽管不同物种ADA基因家族成员间相似性较低,但8个酶活性位点高度保守。Aa-ADAL在2龄幼虫期(7.88)、卵巢(8.05)高表达;Aa-ADGF-A在3龄幼虫期(7.25)高表达;Aa-ADGF-B在雌蚊唾液腺(10.07)显著高表达。经分析,2条属于ADA2/ADGF亚家族,1条属于ADAL亚家族。 吕清巧 翟慧 颜凤 程金芝 吴家红 商正玲关键词:埃及伊蚊 QRT-PCR 表达谱 钩端螺旋体LAg42膜蛋白基因的克隆及原核表达 2007年 分别以问号状赖型钩体017株,56601株及双曲钩体PatocI株基因组为模板,PCR扩增目的基因lag42与质粒pET32a(+)构建重组原核表达质粒,在大肠杆菌BL21中诱导表达.结果显示不同毒力赖型钩体均能扩增出约1100 bp的片段,而PatocI株则未能扩增出目的片段;不同赖型钩体的lag42基因的同源性很高.融合表达质粒pET-lag42转化大肠杆菌BL21后,经IPTG诱导,表达出约62kDa的重组融合蛋白,用Western blotting证实其有良好的抗原性,纯化蛋白免疫新西兰大白兔,获得了高效价的抗体. 刘鱼 鲍朗 商正玲 钟琪关键词:钩端螺旋体 克隆 白纹伊蚊唾液34K2重组蛋白在DENV2感染HaCaT细胞中的应用 本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种白纹伊蚊唾液34K2重组蛋白促进登革病毒增殖的作用,其制备方法包括rAb‑34K2蛋白能促进DENV2在HaCaT细胞中增殖。其机制是抑制感染DENV2的HaCaT细胞表达Ⅰ型干扰素I... 吴家红 商正玲 程金芝 马亚萍rAlb-34k2蛋白对DENV-2感染靶细胞的影响初探 目的 :蚊唾液在虫媒病毒致病中发挥重要的作用,本文通过原核重组表达白蚊伊蚊唾液特异性34k2蛋白(rAlb-34k2),探讨重组白纹伊蚊唾液rAlb-34k2蛋白对DENV-2的易感性影响及其对Raw264.7细胞产生I... 宋航 田炎珅 徐倩 金芮 吴家红 商正玲关键词:登革2型病毒 BHK细胞 RAW264.7细胞 文献传递 登革病毒临床分离株感染小鼠模型建立、免疫机制和部分基因序列变异的研究 左丽 商正玲 潘宇 陈文捷 郝牧 该研究通过特异性IgG、IgM垤抗体及中和抗体的动态观察并结合动物发病情况,证实不同毒株感染后动物体内病毒血症的维持、临床表现除与两毒株存在毒力变异有关外,也与不同毒株诱导特异性抗体的类别不同有关。系统地观察比较了B株和...关键词:关键词:登革病毒 感染性疾病 两株登革2型病毒感染BALB/C小鼠特异性抗体产生动态的比较 2004年 目的:两株登革2型病毒(Dengue Type 2 virus,DV2)初次和再次感染BALB/C小鼠建立动物感染模型,对其产生特异性抗体进行动态观察,探讨感染DV2NGG株和DV2临床分离株(B株)引起的体液免疫应答的差异.方法:两株DV2毒株摸拟自然感染途径,经皮下多点注射建立BALB/C小鼠感染动物模型;采用间接ELISA法检测感染动物血浆中抗DV2特异性IgM类抗体、IgC类抗体,并同时分离病毒观察病毒血症期的变化.结果:不同DV2毒株初次、再次感染BALB/C小鼠后诱导特异性Ig产生的类别存在差异,且DV2B株再次感染动物后表现为病毒血症期相对延长.结论:两株DV2诱导性抗体产生的动态与病毒血症期不同. 商正玲 左丽 陈文捷 潘宇关键词:BALB/C小鼠 特异性抗体 动物模型 体液免疫