孙健
- 作品数：5 被引量：20H指数：3
- 供职机构：北京联合大学功能食品科学技术研究院更多>>
- 发文基金：北京市教育委员会科技发展计划北京市教委科技发展计划北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学轻工技术与工程更多>>
- 四种植物活性单体毒性剂量下对CHO细胞线粒体功能的影响
- 目的 研究竹叶黄酮中的代表性单体物质荭草苷、异荭草苷、绿原酸和阿魏酸对CHO细胞线粒体功能的影响,以了解四种单体都对线粒体的损伤作用及作用差别,并从中找出早期细胞损伤指标,为生物活性物质的毒理学研究及单体活性物质的开发提...
- 赵晓红孙健刘涛郭辰栾娜
- 关键词：CHO酚酸类细胞色素C线粒体膜电位
- 植物活性成分对细胞存活率的影响及其测定方法的比较研究被引量：7
- 2012年
- 选用植物活性物质单体白藜芦醇和绿原酸作用于中国仓鼠卵巢(CHO)细胞,采用MTS法、WST-1法、CCK-8法、XTT法和MTT法测定细胞存活率,并将MTS法、WST-1法、CCK-8法、XTT法这4种方法与传统的MTT法进行比较分析,从中选出最佳的检测方法;通过IC50值比较白藜芦醇和绿原酸毒性大小。结果显示:CCK-8法所得结果稳定,且与MTT法所测得的IC50值最接近,为最佳选择;WST-1法的实验可重复性较差,结果偏小;XTT法是4种方法中最不稳定的,作用时间、检测波长最难确定,且实验重复性差。CCK-8法、MTS法、WST-1法、XTT法和MTT法测定所得白藜芦醇的IC50值分别是116.86、124.68、64.90、162.86、86.30μmol/L;绿原酸的IC50值分别为2808.60、1119.96、1029.72、1325.43、2852.63μmol/L,同种方法下绿原酸的IC50值均高于白藜芦醇的IC50值。结论是测定植物活性成分对细胞存活率影响的方法以CCK-8为最好。白藜芦醇对CHO细胞的毒性比绿原酸大。
- 孙健梅晶赵晓红刘涛阮研硕
- 关键词：MTSCCK-8XTT细胞存活率白黎芦醇
- 不同黄酮类单体对CHO细胞早期损伤作用的比较研究被引量：4
- 2014年
- 选用竹叶中4种黄酮单体荭草苷、异荭草苷、绿原酸和阿魏酸,在各毒性剂量下作用于中国仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary,CHO)细胞,通过检测其对细胞早期损伤指标——线粒体功能变化的影响,以评估其细胞损伤作用。CCK-8检测法测得4种单体物质对CHO细胞的IC50值分别是:绿原酸2 726.11μmol/L、阿魏酸1 680.28μmol/L、荭草苷1 889.15μmol/L、异荭草苷2 358.56μmol/L。在各单体IC50、1/2 IC50值、1/4 IC50值、1/8IC50值剂量下,线粒体膜电位变化具有剂量依赖性,其中以阿魏酸降低幅度最明显,绿原酸次之,荭草苷和异荭草苷变化较小;三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)生成量与作用剂量成负相关,阿魏酸致ATP生成量降低最多,荭草苷次之,绿原酸和异荭草苷影响较小;细胞色素C的释放量,以阿魏酸最大,荭草苷和异荭草苷次之,绿原酸的最小。研究表明4种单体物质都对线粒体产生了一定的损伤,其中阿魏酸对线粒体影响最大,荭草苷和异荭草苷次之,绿原酸最小。
- 刘涛孙健郭辰赵晓红
- 关键词：细胞色素C线粒体膜电位三磷酸腺苷线粒体损伤荭草苷
- 北京早园竹叶不同提取组分对CHO细胞Akt信号通路的影响被引量：3
- 2012年
- 通过比较北京早园竹叶提取物中的主要活性组分黄酮苷类、酚酸类及总提取物3个组分对中国仓鼠卵巢细胞(CHO)的增殖、凋亡及Akt信号通路作用差别,考察竹叶提取物对正常细胞可能产生有害作用的活性组分。采用MTT法检测细胞增殖作用、Annexin V-FITC/PI双染流式法测细胞凋亡、In Cell Analyzer 1000活细胞图像分析系统测定Akt信号通路的活化。结果显示:1)50～400μg/mL范围内3种组分对细胞存活率的影响无明显变化,当质量浓度≥800μg/mL时细胞增殖率明显下降(P<0.05),细胞毒性作用明显,且以酚酸类组分作用最强;2)不同组分的竹叶提取物在200～800μg/mL范围内与空白组比较均可降低细胞凋亡率(P<0.05),但总提取物和黄酮苷类在质量浓度为1600μg/mL时本身可诱导CHO细胞的凋亡增加,差异显著(P<0.05),且以黄酮苷类诱导的细胞凋亡率最高,达14.21%;3)与对照组比较,黄酮苷类在100～800μg/mL剂量条件下,对Akt的活性无明显影响,总提取物在400、800μg/mL时Akt的激活率明显增加(P<0.01),而酚酸类在100～800μg/mL范围内,随剂量增加,激活率增高,呈明显的剂量-反应关系(r=0.996,P<0.01)。由此可见3种不同提取物组分对CHO细胞的作用是有差别的,其中酚酸类可能是产生有害作用的主要组分。
- 梅晶祖桂芳赵晓红何颖孙健
- 关键词：竹叶提取物黄酮苷类酚酸类AKT通路中国仓鼠卵巢细胞
- 大气细颗粒物对CHO细胞的损伤作用及天然物质的拮抗机制被引量：8
- 2015年
- PM2.5引起的健康危害日益受到广泛关注,但其确切的损伤机理仍不完全清楚,目前也缺乏有效拮抗PM2.5损伤的天然活性物质。因此本文对北京市PM2.5造成CHO细胞的损伤作用及天然物质的拮抗作用进行研究,结果可为PM2.5污染治理和疾病的预防提供科学依据。通过CCK-8法测定细胞存活率;通过流式细胞仪测定细胞凋亡;用荧光探针DCFH-DA法测定ROS;提取细胞内总蛋白并测定其中SOD含量;以及通过Western Blot法分别测定了p-akt/akt、p65及Bad的相对表达量。结果显示：（1）10~40μg·m L-1的PM2.5可明显降低CHO细胞存活率,并呈现极显著的剂量-效应关系（r=-0.964,P〈0.01）;15μg·m L-1PM2.5可以显著增加细胞凋亡、引起细胞内ROS增加、SOD含量下降;p-akt/akt、p65表达量增加说明Akt通路与NF-κB通路均被激活。（2）20μmol·L-1阿魏酸、50μmol·L-1绿原酸和10μmol·L-1荭草素预处理可拮抗PM2.5引起的细胞存活率下降以及细胞凋亡率增加,同时降低细胞内ROS并增加SOD含量,下调p-akt/akt、p65及Bad的相对表达量。其中20μmol·L-1阿魏酸的保护作用最佳。结果说明,PM2.5引起的CHO细胞损伤与细胞凋亡与Akt和NF-κB通路的激活有关;三种天然活性物质具有拮抗PM2.5造成的细胞损伤的能力,其保护机理是通过其降低PM2.5引起的细胞内氧化应激反应,进而降低被PM2.5激活的Akt通路与NF-κB通路和下调Bad蛋白表达量来实现的。
- 郭辰毕婷婷陈世杰赵晓红刘涛孙健
- 关键词：AKT信号通路NF-ΚB信号通路BAD蛋白
