孟祥贤
- 作品数:37 被引量:143H指数:8
- 供职机构:湖南大学生物学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域:生物学理学医药卫生农业科学更多>>
- 双链荧光核酸适体探针用于蛋白质的简便快速检测被引量:3
- 2010年
- 发展了一种基于双链荧光核酸适体(F-Aptamer)探针的简单快速检测蛋白质的分析方法.该双链荧光Aptamer探针由一条带荧光标记的Aptamer探针和带猝灭标记的互补DNA组成,当靶蛋白存在时,能形成比双链荧光Aptamer探针更稳定的F-Aptamer/蛋白质复合物,并发出荧光,从而实现对蛋白质的简便快速检测,检测线性范围为6~100 nmol/L,检出限为6 nmol/L.该方法设计简单,对核酸适体分子的大小和空间结构没有要求,可作为一种通用的基于F-Aptamer识别机理的蛋白质检测方法.
- 郭秋平羊小海王柯敏孟祥贤李军仲志鸿
- 关键词:核酸适体蛋白质检测凝血酶
- miRNA定量检测方法的研究进展被引量:5
- 2018年
- MicroRNA(miRNA)是广泛存在于真核生物当中的一类长度为18~25个核苷酸的小分子RNA,由DNA转录产生。作为一种内源性非编码小分子RNA, mi RNA在许多生命活动中起着重要作用,如当机体内的某些mi RNA表达下调时,就会更容易罹患癌症和其他一系列疾病。这一现象提示,人们可通过对mi RNA进行定量检测来实现对相关疾病的早期诊断。本文综述了基于杂交、扩增和测序原理的mi RNA检测技术的研究进展,并对mi RNA的研究方法及方向予以了阐述。
- 蓝琳喻芬黄明敏孟祥贤
- 关键词:MIRNA杂交扩增测序
- 分子信标用于核酸连接过程的实时监测被引量:12
- 2003年
- 建立了一种新的核酸连接实时监测方法, 利用分子信标作为核酸连接反应的DNA模板和检测分子, 在核酸分子连接的同时检测荧光信号. 实时、准确地获取核酸连接过程信息, 为核酸连接酶分析、核酸连接动力学过程研究提供全新、有效的手段, 也为深入研究核酸连接酶与核酸分子间的相互作用提供了新的思路与技术. 在此基础上建立了T4 DNA连接酶分析方法, 其线性响应范围为2.3(10-4 ~ 0.23 U/mL, 检测下限为2.3(10-4 U/mL.
- 唐志文王柯敏谭蔚泓李军刘凌凤郭秋平孟祥贤黄杉生李杜罗维方
- 关键词:分子信标实时监测
- 一种基于分子信标荧光探针快速检测烟草花叶病毒的新方法被引量:13
- 2003年
- 研究了一种利用新型荧光探针———分子信标进行植物病毒检测的方法 ,可以不要求对病毒RNA进行严格的分离和纯化 ,就能快捷地得到检测结果。此方法被用于烟草花叶病毒 (tobaccomosaicvirus,TMV)基因组RNA的检测 。
- 刘凌凤王柯敏谭蔚泓李军孟祥贤郭秋平唐志文刘选明李杜
- 关键词:分子信标荧光探针烟草花叶病毒植物病毒纯化核糖核酸
- 一种核酸分子内扩增的探针及其检测方法
- 一种核酸分子内扩增的探针及检测方法,本发明之核酸分子内扩增的探针,至少含有(5’)a‑b‑a‑c‑a*(3’)五个区,含有两个相同的a区,一个在5’末端,一个在中间;b区和两个a区相连,其中一个a区在5’末端和b区5’端...
- 孟祥贤蓝琳刘孟坛刘志强
- 文献传递
- 古尼虫草对苏云金杆菌抗紫外辐射的保护作用被引量:15
- 2001年
- 用古尼拟青霉 (paecilomycesgunnii)不同生长天数的培养液所培养的苏云金杆菌 (bacillusthuringiensis)经紫外辐射后 ,其活菌数有很大差异 .说明古虫尼草处于稳定生长期的培养液中所含抗紫外辐射的成分最高 ;古尼拟青霉的培养液、菌丝体浸提液、古尼虫草 (cordycepsgunnii)子实体浸提液所培养的苏云金杆菌经紫外辐射后 ,活菌数依次比对照提高 .说明了抗紫外辐射的成分在古尼虫草子实体浸提液和菌丝体浸提液中的含量比较高 。
- 孟祥贤张志光陈作红
- 关键词:古尼拟青霉苏云金杆菌培养液
- 分子信标用于p53 mRNA的体外定量检测被引量:9
- 2006年
- 根据p53基因的序列设计并合成了能特异性检测p53mRNA的分子信标(MB),发展了一种快速定量测定细胞内总RNA提取物中p53mRNA的方法.采用鼻咽癌(CNE2)细胞系和经RNA干扰技术降低p53基因表达的CNE2-p53RNAi细胞系,抽提总RNA并用MB检测,验证了MB的检测对象是p53mRNA.将该方法应用于多种肿瘤细胞内p53基因表达水平的分析,表达变化趋势与经典的mRNA分析方法RT-PCR检测结果相符.在此基础上,用MB对5-氟尿嘧啶(5-Fu)处理的肺腺癌细胞(A549)进行了p53mRNA的体外定量检测,结果表明采用MB能够快速地获知该药物对细胞内p53mRNA表达影响的信息.
- 何丽芳唐红星王柯敏谭蔚泓刘斌孟祥贤李军王炜
- 关键词:分子信标P53RNA干扰5-氟尿嘧啶
- 基于聚合酶反应和发夹型核酸适体的蛋白质荧光检测新方法被引量:14
- 2008年
- 设计合成了一种发夹型核酸适体(Aptamer),结合聚合酶反应建立了蛋白质荧光分析新方法.该核酸适体同时作为蛋白质配体和聚合反应模板,与靶蛋白特异结合后,其构象发生了变化,启动聚合反应,从而在未直接标记核酸适体的情况下,通过监测聚合反应进程来检测蛋白质的浓度.采用该方法检测凝血酶的线性范围为0.5~8nmoL/L,检测下限为0.5nmoL/L,为蛋白质检测提供了一种简便快速的非直接标记的荧光分析方法,有望在蛋白质组学的研究中得到广泛的应用.
- 郭秋平羊小海王柯敏孟祥贤李军谭蔚泓
- 关键词:核酸适体蛋白质检测聚合酶反应凝血酶
- 金纳米颗粒介导不对称PCR:制备单链核酸的新方法被引量:8
- 2010年
- 单链核酸杂交技术是现代医学生物学等领域诊断与检测的重要手段.传统不对称PCR制备单链核酸的方法,需要严格控制引物和模板数量及反复摸索退火温度,操作复杂.发展了一种利用金纳米颗粒介导的不对称PCR快速制备单链核酸的新方法.浓度为0.1~0.5nmol/L金纳米颗粒可显著改善PCR扩增特异性,提高扩增效率.在不对称PCR扩增中,加入合适浓度的金纳米颗粒方便快捷得到单链核酸产物,不需要进行复杂的条件优化等操作步骤.通过快速制备地中海遗传病两个点突变CD17(A→T)和IVS-2-654(C→T)位点的单链DNA靶序列,证实该方法是一种简便、有效的获得单链核酸的方法,有望在单链核酸技术领域发挥重要作用.
- 孟祥贤羊小海王柯敏郭秋平黄青山
- 关键词:金纳米颗粒
- 古尼虫草生物学特性及其生理活性物质的研究
- 本论文利用菌种分离技术、紫外吸收光谱技术、高效液相色谱技术、氨基酸组成分析技术、定性分析与定量分析技术、电镜技术、原生质体技术和脉冲电泳核型分析技术对古尼虫草(C.ordycep·gunnii)的生物学特性及生理活性物质...
- 孟祥贤
- 关键词:生物学特性生理活性物质菌种分离
- 文献传递