岳志芹
- 作品数:142 被引量:331H指数:9
- 供职机构:山东出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金:国家质检总局科技计划项目国家科技支撑计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 病毒性出血性败血症病毒N基因的病毒样颗粒制备及定值被引量:2
- 2018年
- 为制备含有病毒性出血性败血症病毒(VHSV)N基因的RNA病毒样颗粒标准样品,通过RT-RCR扩增VHSV的N基因,将其克隆至含有组氨酸标签的pNH-MS_2his载体中,构建重组原核表达载体pNHMS_2his-N;将重组质粒pNH-MS_2his-N转化至表达菌株BL21(DE3),用1 mmol/L IPTG诱导表达、纯化;对病毒样颗粒进行鉴定及稳定性试验,使用数字PCR对病毒样颗粒进行定值。结果显示,该病毒样颗粒含VHSV N基因序列,并且稳定性良好,定值结果为8×10~6 copies/m L。结果表明,构建的病毒样颗粒可以作为RNA病毒检测时的标准品和质控品使用。
- 王群姜帆岳志芹孙涛郑小龙张晓文房保海
- 关键词:病毒样颗粒N基因
- 马鼻肺炎病毒的液相芯片检测引物及检测方法
- 本发明涉及一种马鼻肺炎病毒的液相芯片检测引物及检测方法,本发明的检测方法能够对样品进行快速检测,从样品处理到出结果仅需4小时左右;由于采用了接近生物反应体系的液相芯片系统和特异性的探针,使该方法可与荧光定量PCR相媲美。...
- 郑小龙徐彪梁成珠朱来华王群肖西志岳志芹邓明俊孙涛赵玉然
- RAPD标记在中国对虾Fenneropenaeus chinensis单对交配亲本及其子一代的分离方式被引量:3
- 2004年
- 利用RAPD标记对中国对虾单对交配亲本及其子一代(全同胞家系)的分离方式进行了研究。100个RAPD随机引物扩增结果的统计分析表明,标记在F1代的分离方式可归为3类,即符合孟德尔遗传比例、偏离孟德尔遗传比例和异常分离。符合孟德尔遗传的情况又包括:不分离,亲本均有而在子代不分离的标记(代表了亲本基因型的3种组合:AA×AA、AA×Aa、Aa×AA)和亲本中呈多态而在子代中不分离的标记(代表了亲本基因型的2种组合:AA×aa、aa×AA);亲本中呈多态而在子代中1:1分离(代表了亲本基因型的2种组合:Aa×aa、aa×Aa);亲本均有而在子代中3:1分离(代表了亲本基因型的1种组合:Aa×Aa)。偏分离的标记包括,亲本中呈多态而在子代中偏离1:1分离的标记和亲本均有而在子代中偏离3:1分离的标记。异常分离的标记为在F1代出现双亲均不具备的标记。3种分离位点出现的频率分别为89.3%,7.4%和2.8%。其中呈1:1和3:1孟德尔分离规律的位点占分离位点总数的69.5%。母本特有标记和父本特有标记中符合孟德尔分离(1:1)分别占分离位点总数的27.8%和19.5%。本研究结果证明RAPD标记结合“双假测交构想”构建中国对虾遗传连锁图谱的可行性。
- 申雪艳孔杰岳志芹张庆文王清印宫庆礼
- 关键词:RAPD标记中国对虾子一代AA随机扩增多态性
- 病毒性出血性败血症病毒液相芯片检测技术的建立被引量:3
- 2015年
- 为建立检测病毒性出血性败血症病毒(VHSV)的液相芯片快速检测技术,用DNAStar软件对GenBank中VHSV的G基因进行序列分析,设计VHSV特异性引物并标记生物素。探针氨基化修饰并与荧光编码微球偶联后与VHSV RT-PCR产物杂交反应,用液相芯片仪器检测荧光信号。结果表明液相芯片检测体系能够正确检出VHSV。病毒核酸的最低检出量为10pg,检测特异性高,说明初步建立了检测VHSV的液相芯片技术,为VHSV的检测提供了新方法。
- 尹伟力梁君妮林超张四化岳志芹刘荭
- 关键词:液相芯片
- 焦磷酸测序技术鉴别禽流感病毒亚型的方法
- 本发明属于动物病原检测技术领域,涉及一种采用焦磷酸测序技术鉴别禽流感病毒亚型的方法,先设计禽流感病毒H5、H7、H9、N1和N2特异性引物及焦磷酸测序引物;再提取待测样品的核糖核酸,然后分别用各亚型的引物进行逆转录-聚合...
- 徐彪张太翔岳志芹孙涛赵玉然凌宗帅梁成珠
- HAV病毒样颗粒的制备方法及其应用
- 本发明公开了含有甲肝病毒HAV5’-UTR基因的病毒样颗粒的制备方法。该病毒样颗粒是由MS2噬菌体编码外壳蛋白包裹HAV5’-UTR?RNA的一种RNA-蛋白复合体;将编码组氨酸标签序列插入MS2噬菌体编码外壳蛋白的β发...
- 张晓文房保海孙明君尹伟力岳志芹王群梁成珠王宫璞贾俊涛
- 文献传递
- 马动脉炎病毒的液相芯片检测引物
- 本发明涉及一种马动脉炎病毒的液相芯片检测引物及检测方法,本发明的检测方法能够对样品进行快速检测,从样品处理到出结果仅需4小时左右;由于采用了接近生物反应体系的液相芯片系统和特异性的探针,使该方法可与荧光定量PCR相媲美。...
- 郑小龙徐彪梁成珠王群朱来华邓明俊岳志芹肖西志赵玉然
- 文献传递
- 鸭坦布苏病毒E基因主要抗原域的原核表达及单克隆抗体的制备被引量:1
- 2016年
- 为制备鸭坦布苏病毒(DTMUV)E基因主要抗原域的单克隆抗体(MAb),本研究经DNAStar软件分析预测E蛋白含有的优势抗原表位区,以DTMUV QD株基因组RNA为模板,通过RT-PCR扩增涵盖编码主要优势表位的E基因片段(943 bp^1 287 bp),并将其克隆至表达载体p ET-28a中,转化于大肠杆菌中进行诱导表达。对表达的重组蛋白进行western blot鉴定,将纯化后的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾脏细胞与SP2/0细胞融合,经筛选和鉴定,获得了两株能够稳定分泌抗E蛋白的杂交瘤细胞株,命名为4G8和6B12,其亚型均为Ig G1型,并且识别于不同的抗原位点。经间接免疫荧光检测,MAb 4G8和6B12均能够与DTMUV发生特异性反应。本研究所制备的MAb为进一步鉴定DTMUV以及分析囊膜糖蛋白E的结构和功能奠定了基础。
- 孙涛王超徐彪王宏华邓明俊郑小龙岳志芹
- 关键词:原核表达单克隆抗体
- 一株猪源豕链球菌的分离鉴定被引量:2
- 2012年
- 从一头病死猪分离到一株疑似猪链球菌的菌株,通过生化鉴定、链球菌血清学分群、猪链球菌的血清学分型、PCR鉴定排除了是猪链球菌的可能。应用16SrDNA的通用引物27F和1492R对可疑菌的核酸扩增、测序及序列比对表明,所分离到的菌株与豕链球菌具有98%的同源性,因此判断为豕链球菌。小鼠感染试验显示,感染的小鼠没有明显的发病症状,且2周后仍正常存活,因此认为所分离的豕链球菌不具有致病性或具有较弱的致病性。
- 陈煜吴达孙敏王楷宬邓明俊吴振兴岳志芹郑小龙孙涛肖西志
- 黄尾鰤腹水病毒的实时定量RT-PCR快速检测方法
- 本发明公开了一种黄尾鰤腹水病毒的实时定量RT-PCR快速检测方法,该方法利用正向引物、反向引物和荧光探针并以体外转录RNA标准品作为逆转录和扩增的双重对照,可以对黄尾鰤腹水病毒进行定性、定量检测。本发明具有快速,准确、特...
- 岳志芹徐彪刘荭李琼肖西志孙涛赵巍辛学谦邓明俊凌宗帅方绍庆张太翔
- 文献传递