张洪梅
- 作品数：59 被引量：116H指数：6
- 供职机构：上海交通大学医学院附属新华医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金安徽省自然科学基金上海市教委科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学核科学技术更多>>
- 高脂肪高果糖(HFHF)饮食诱导的代谢综合征ICR小鼠模型建立
- 目的:代谢综合征在全球范围内流行性显著增加,提高对这种疾病机制的认识对临床治疗干预代谢综合征而言十分必要的。在这里,我们描述了一种在啮齿类动物中建立MS模型的新方法。方法:雄性癌症研究所(Institue of Canc...
- 张珠华汪志全杨震李晓勇张洪梅苏青
- 盐酸小檗碱通过调节氧化应激和炎症通路改善小鼠肝脏衰老被引量：1
- 2023年
- 目的研究盐酸小檗碱对小鼠肝脏的抗衰老作用及可能的机制。方法取12只4周龄C57BL6/J小鼠,分为老年对照组(普通饲料喂养)、老年干预组(含有1 g/kg盐酸小檗碱饲料喂养),每组6只,饲养60周。小鼠64周龄时取材,肝组织石蜡切片进行HE染色观察小鼠肝脏组织病理变化;免疫荧光法检测肝脏组织中p16蛋白表达水平;比色法检测小鼠肝脏中丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性;酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测肝脏组织中白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和血清中IL-8的表达;Western印迹法检测p16、p21、核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid-2 related factor 2,Nrf2)、核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)、磷酸化(phospho,p-)NF-κB、NF-κB抑制蛋白(inhibitoryκB,IκB)α、p-IκBα、p38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)表达。同样饲养条件的普通饲料喂养16周龄小鼠作为年轻对照组。结果与年轻对照组相比,老年对照组肝脏组织形态老化,抗氧化物水能力降低(P<0.01),炎症因子水平明显上升(P<0.05或P<0.01);对比老年对照组,盐酸小檗碱干预可以明显改善肝脏衰老形态,衰老标记物p16和p21蛋白表达水平显著升高(P<0.05或P<0.01),提高小鼠抗氧化能力(P<0.05或P<0.01),降低炎症因子水平(P<0.05或P<0.01),下调p38 MAPK/NF-κB蛋白及相关因子Nrf2表达水平(P<0.001)。结论盐酸小檗碱改善老年小鼠肝组织的衰老形态,可能通过抑制p38 MAPK/NF-κB炎症信号通路降低炎症因子水平和抑制Nrf2通路改善衰老机体的氧化应激而发挥抗衰老作用。
- 李涵胡秋月苏青张洪梅
- 关键词：衰老盐酸小檗碱炎症氧化应激
- 高效液相色谱-串联质谱法检测糖尿病患者血浆甲基乙二醛和乙二醛浓度被引量：2
- 2013年
- 目的建立一种测定糖尿病患者血浆甲基乙二醛和乙二醛浓度的高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)。方法采用HPLC-MS/MS技术测定1型(n=15)和2型糖尿病(n=17)患者以及正常受试者(n=10)血浆甲基乙二醛和乙二醛的浓度。待测血浆加入2,3-二氨基萘(2,3-DAN)和内标乙二酮,充分反应及用乙腈沉淀蛋白后,以乙腈-0.1%甲酸水溶液(57∶43,v/v)为流动相,通过Hypersil GOLD色谱柱(50 mm×2.1 mm,5μm)分离;采用电喷雾电离源,选择正离子检测,甲基乙二醛-DAN结合物、乙二醛-DAN结合物和乙二酮-DAN结合物用于定量分析的选择性离子分别为m/z 195.18→m/z 126.25、m/z 181.14→m/z 126.10和m/z 237.34→m/z 209.34。结果甲基乙二醛-DAN结合物和乙二醛-DAN结合物线性范围分别为2～1 000 ng/mL和50～1 000 ng/mL,平均回收率均>70%。1型和2型糖尿病患者血浆甲基乙二醛和乙二醛浓度显著高于正常受试者。结论成功建立测定糖尿病患者血浆中甲基乙二醛和乙二醛浓度的HPLC-MS/MS方法,灵敏度、准确度和回收率均较高,专属性强,适用于大批临床样本的分析。
- 孔祥黄凯张洪梅杨震李晓永苏青
- 关键词：甲基乙二醛乙二醛高效液相色谱-串联质谱法糖尿病
- 转染中国仓鼠卵巢细胞人TSH受体的功能评价被引量：1
- 2008年
- 目的研究转染中国仓鼠卵巢(CHO)细胞人促甲状腺激素(hTSH)受体(hTSHR)的功能。方法抽提已转染hTSHR的CHO细胞基因组DNA,PCR扩增目的条带,并对产物进行序列测定。采用受体的放射配体结合分析法,以固定量125I的牛促甲状腺激素(125I-bTSH)和浓度递增的未标记bTSH与hTSHR发生竞争结合反应分析受体的基本功能;通过TSH刺激试验测定细胞环磷酸腺苷(cAMP)含量,评价hTSHR的生物学活性。结果PCR扩增片段长度与预期相符,且序列完全正确。竞争结合反应表明,随着bTSH浓度的递增,125I-bTSH与hTSHR的结合量逐渐下降;TSH刺激试验显示,随着bTSH浓度的递增,细胞cAMP含量亦逐渐升高,当bTSH浓度为10 mIU/mL时,cAMP水平达到峰值。结论cDNA序列整合在CHO细胞基因组内并在细胞膜上表达的hTSHR,具有受体的基本功能特性和良好的生物学活性。该实验为自身免疫性甲状腺疾病患者血清甲状腺刺激性抗体(TSAb)和阻断性抗体(TSBAb)的检测奠定了基础。
- 周亚芹张洪梅李晓永董艳苏青
- 关键词：中国仓鼠卵巢细胞促甲状腺激素受体促甲状腺激素受体抗体环磷酸腺苷
- 人甲状腺刺激激素受体cDNA的克隆及真核表达载体的构建被引量：3
- 2008年
- 目的克隆人甲状腺刺激激素受体(hTSHR)基因cDNA并构建其真核表达载体。方法以人甲状腺组织cDNA为模板,聚合酶链反应(PCR)扩增hTSHR基因编码区的全部序列,克隆入pGEM-T载体中,经限制性内切酶、DNA序列分析鉴定目的基因后,定向亚克隆到真核细胞表达载体pcDNA3.1中,并进行双酶切鉴定。结果PCR扩增的特异性片段长度为2 337 bp,以此构建的pGEM-T-hTSHR克隆载体,经限制性内切酶酶切及DNA序列分析证实载体中带有hTSHR基因编码区的目的片段,重组质粒pcDNA3.1-hTSHR经KpnⅠ和XbaⅠ双酶切后显示5 1000 bp和2 300 bp左右的2个条带,DNA序列分析显示与GenBank中的hTSHR基因cDNA序列一致,证明hTSHR基因已成功克隆入真核细胞表达载体pcDNA3.1中。结论成功构建了野生型pcDNA3.1-hTSHR重组真核表达载体。
- 李晓永冯绮文董艳周亚芹葛勤敏张洪梅苏青
- 关键词：克隆真核表达载体
- 甲亢为何会“变成”甲减
- 2020年
- 半年前,25岁的娜娜因“心悸、怕热、多汗、乏力、体重减轻3月”在医院就诊后被确诊为“甲亢”,医生给娜娜开了药物以控制甲亢。服药1个月后,娜娜自觉症状明显好转,便自己去药店照着医师的处方买药吃。半年后,娜娜感觉怕冷、反应迟钝、食欲减退、颜面部及双下肢浮肿,全身乏力,一天到晚老想睡觉,体重还增加了5千克,在朋友的劝说下她再次来到医院就诊,被诊断为“甲减”。娜娜很诧异:我的甲亢怎么变成甲减了?
- 张洪梅
- 关键词：双下肢浮肿全身乏力甲减颜面部甲亢体重减轻
- 缬沙坦对糖尿病大鼠肾组织糖化终末产物受体表达的影响
- 2008年
- 目的探讨缬沙坦对糖尿病大鼠肾脏糖化终末产物受体(RAGE)表达的影响,探索其肾保护机制。方法30只大鼠分为正常对照组、未处理糖尿病组和缬沙坦治疗组(n=10)。12周后测定各组大鼠肾质量/体质量比、血糖、糖化血红蛋白、24 h尿蛋白定量和血脂改变,并以实时定量PCR法测定RAGE表达水平。结果未处理糖尿病组大鼠肾质量/体质量比、24 h尿蛋白定量和肾组织RAGE表达均显著高于正常对照组;与未处理糖尿病组相比,缬沙坦治疗组大鼠肾质量/体质量比、24 h尿蛋白定量和肾组织RAGE表达显著下降。结论缬沙坦可抑制糖尿病大鼠肾脏肥大,并降低尿蛋白排泄率,这种肾保护作用可能与其抑制RAGE表达有关。
- 王瑞良张洪梅苏青
- 关键词：糖尿病大鼠肾保护
- 氯化钴诱导低氧对3T3-L1脂肪细胞脂连蛋白表达的影响
- 2014年
- 目的研究体外模拟低氧对小鼠3T3-L1脂肪细胞脂连蛋白(ADPN)表达的影响。方法体外培养小鼠3T3-L1前脂肪细胞,将其诱导分化成为成熟的脂肪细胞,油红O染色鉴定脂肪细胞分化程度和脂质积聚情况。氯化钴(CoCl2)化学模拟脂肪细胞低氧环境,采用实时PCR(Real-Time PCR)检测低氧诱导因子-1α(HIF-1α)和ADPN mRNA的表达,蛋白质印迹法(Western blotting)检测低氧诱导因子-1α(HIF-1α)的蛋白表达;酶联免疫吸附测定(ELISA)分析细胞培养上清液中ADPN蛋白的分泌水平。结果在CoCl2诱导3T3-L1脂肪细胞低氧的条件下,细胞内HIF-1αmRNA和蛋白的表达水平均显著上调;细胞内ADPN mRNA表达和细胞培养上清液中ADPN蛋白的分泌水平均显著下降;HIF-1αmRNA与ADPN mRNA的表达水平呈显著负相关(r=-0.854,P<0.001)。结论 CoCl2诱导低氧能够下调3T3-L1脂肪细胞ADPN的表达,该作用可能与脂肪细胞代谢功能障碍和胰岛素抵抗有关。
- 林宁张珠华李晓永张洪梅苏青
- 关键词：3T3-L1脂肪细胞氯化钴低氧诱导因子-1
- 稳定表达全长人TSH受体的细胞株及构建方法
- 本发明公开稳定表达全长人TSH受体(hTSHR)的细胞株TSHR‑LV‑CHO，其保藏编号为：CCTCC NO:C2017177。将全长hTSHR克隆到慢病毒真核表达载体中，用慢病毒—hTSHR真核表达载体感染CHO细胞...
- 张洪梅苏青屠晓芳刘冲霄胡帆
- 文献传递
- 晚期糖化终末产物对体外培养胰腺星状细胞活化的影响
- 目的 胰腺星状细胞(pancreatic stellate cells,PSCs)在2型糖尿病胰岛及其周围纤维化发病中起着重要作用。本研究将探讨晚期糖化终末产物(advanced glycation end produc...
- 李晓永张洪梅董艳苏青
