时海浪
- 作品数:8 被引量:7H指数:1
- 供职机构:河北大学更多>>
- 发文基金:河北省自然科学基金国家自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 大鼠Fcε3-4基因克隆及原核表达
- 2012年
- 为了获得重组Fcε3-4蛋白,从变态反应性哮喘大鼠脾组织中提取总RNA,通过RT-PCR方法克隆大鼠Fcε3-4基因,构建成原核表达载体pET17b-Fcε3-4,并转化大肠杆菌进行诱导表达,Fcε3-4蛋白主要以包涵体形式存在.经Ni-NAT亲和层析柱对尿素溶解的Fcε3-4蛋白进行了纯化,并利用降低尿素梯度的方法柱上对纯化蛋白进行了复性.经Western Blotting和ELISA鉴定,Fcε3-4蛋白具有Fcε的免疫特异性,能被抗大鼠Fcε抗体特异性识别,为下一步研究该蛋白奠定了基础.
- 张艳芬时海浪王培莹乔晓强刘中成
- 关键词:克隆
- 负调控变态反应融合分子设计及其作用机制研究
- 刘中成毕克维张艳芬管立时海浪赵丽君解瑶
- 根据变态反应中肥大细胞和嗜碱粒细胞同时表达IgE高亲和力受体FcεRI和免疫负调节受体FcγRIIB的特点,利用噬菌体肽库展示技术筛选IgE结合肽与抑制性受体FcγRIIB结合肽,并通过构建融合分子的形式偶联FcεRI与...
- 关键词:
- 关键词:变态反应性疾病基因工程
- 新型羧基衍生试剂合成、性能研究及其在多肽质谱分析中的应用
- 乔晓强王蕊赵丽君时海浪申蕊
- 合成了两种同时具有高疏水性、强气相碱性且包含永久性正电荷的功能化咪唑季铵类衍生试剂-1-丁基,3-(3-氨丙基)咪唑溴和溴化1-丁基,3-(4-碘丁基)咪唑。进一步应用于肽段的衍生,结合电喷雾质谱(ESIMS)和基质辅助...
- 关键词:
- 关键词:蛋白质
- 一种IgE特异性结合多肽及其医药用途
- 本发明公开了一种IgE特异性结合多肽以其医药用途,该多肽含有12个氨基酸残基,其核苷酸序列如SEQIDNO.1,氨基酸序列如SEQIDNO.2所示。含有多肽P20活性成分的药物制剂,可与人体IgE结合,有效阻断过敏反应进...
- 刘中成张艳芬时海浪赵丽君
- 核酸适配子在IgE检测中的应用被引量:1
- 2013年
- 核酸适配子是一类经SELEX技术筛选出来的寡聚核苷酸,其功能与单克隆抗体类似但在诸多方面明显优于抗体,可用于测定靶物质含量等。免疫球蛋白E(immunoglobulin E,IgE)是介导过敏反应的关键因子,IgE定量检测是临床诊断过敏性疾病的重要指标。该文主要综述了核酸适配子在IgE检测中的应用。
- 刘中成赵丽君张艳芬解瑶时海浪
- 关键词:IGE
- Cε3-Cε4结合肽筛选及鉴定
- 2014年
- 为了获得免疫球蛋白E(IgE)特异性结合肽,采用固相筛选法,以Cε3-Cε4为靶蛋白,利用噬菌体随机多肽展示技术进行筛选,4轮筛选后,经ELISA鉴定获得19个阳性单克隆噬菌体,阳性率达38%,测序并翻译后共获得11个结合肽.竞争抑制性实验证明P7,P13,P20与Cε3-Cε4蛋白的结合能力较强,细胞水平分析表明:结合肽P7,P20可阻止IgE与其受体结合.本研究将为进一步探索IgE结合肽生物学功能奠定基础,并为设计治疗变态反应性疾病的小分子药物提供参考.
- 张艳芬刘利鹏赵立健时海浪刘中成
- 一种IgE特异性结合多肽及其医药用途
- 本发明公开了一种IgE特异性结合多肽以其医药用途,该多肽含有12个氨基酸残基,其核苷酸序列如SEQIDNO.1,氨基酸序列如SEQIDNO.2所示。含有多肽P20活性成分的药物制剂,可与人体IgE结合,有效阻断过敏反应进...
- 刘中成张艳芬时海浪赵丽君
- 文献传递
- Cε3-Cε4蛋白核酸适配子筛选与鉴定被引量:6
- 2012年
- 设计并合成随机ssDNA文库,以硝酸纤维素膜为筛选介质,利用SELEX技术筛选人Cε3-Cε4蛋白特异性高亲和力核酸适配子,通过对退火温度、循环次数及靶蛋白与ssDNA摩尔比等关键参数进行优化,建立了适合的筛选体系。ELISA测定各适配子亲和力,获得了人Cε3-Cε4蛋白高亲和力、高特异性适配子,并分析了其一级结构和二级结构。以所获高亲和力适配子分别作为捕获适配子和检测适配子,建立了酶联适配子吸附试验(enzyme-linked aptamers sorption assay,ELASA)方法,灵敏度达到120 ng.mL-1,可用于人IgE的定量检测。
- 刘中成赵丽君张艳芬时海浪解瑶
- 关键词:免疫球蛋白E适配子