李刚
- 作品数：6 被引量：10H指数：2
- 供职机构：广东医学院基础医学院生物化学与分子生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金东莞市高等院校科研机构科技计划项目广东省中医药局建设中医药强省科研课题更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- HPV-16 E6癌蛋白对肺癌体外血管生成影响的初探
- 唐旭东李刚何丽史景莉张二盈张勤林观平陈江燕
- 绿茶提取物EGCG对肺癌细胞HIF-1α和VEGF表达的影响被引量：4
- 2009年
- 绿茶的水溶性提取物含有多种多酚类化合物，其中表没食子儿茶素没食子酸酯[（-）-epigallocatechin-3-gallate，EGCG]的含量最高，也最具有药用功效。已发现EGCG可抑制人肺癌血管生成，但其抑制肺癌血管生成的机制还不完全清楚。低氧诱导因子1α（hypoxia inducible factor-1α，HIF-1α）和血管内皮生长因子（vascular endothelial growthfactor，VEGF）是促血管生成的关键因子。本文的目的拟探讨在非小细胞肺癌细胞A549中，EGCG是否通过影响HIF-1α和VEGF表达来抑制肺癌血管生成。方法：将已在无血清培养液中饥饿24h的A549细胞用不同浓度的EGCG[0（对照）、10、25、50、100μmol／L）预处理1h后，再加终浓度为40ng／mL的胰岛素样生长因子（insulin—like growthfactor-1，IGF-1）在37℃继续孵育16h。将各组细胞和条件培养液收集后，采用Westernblot分析各组细胞中HIF-1α蛋白的表达、ELISA检测各条件培养液中VEGF的蛋白分泌、实时PCR测定各组细胞HIF-1α和VEGFmRNA的表达水平。
- 唐旭东周新李刚丁航覃燕梅周克元
- 关键词：HIF-1Α蛋白肺癌细胞A549VEGF表达绿茶提取物EGCGWESTERNBLOT
- HPV-16 E6癌蛋白对肺癌体外血管生成影响的初探
- 目的:许多流行病学研究已发现高危型人乳头状瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染可能与肺癌有关,而血管生成在肺癌发展中起重要作用,但迄今为止高危型HPV癌蛋白与肺癌血管生成的关系还不清楚。因此,本...
- 唐旭东李刚何丽史景莉张二盈张勤林观平陈江燕
- 文献传递
- 人乳头状瘤病毒癌蛋白E6和E7双标记质粒的构建及应用被引量：2
- 2012年
- 目的:构建人乳头状瘤病毒(human papillomavirus,HPV)-16 E6、E7癌蛋白及其突变型的双筛选标记质粒并筛选出稳定表达HPV-16癌蛋白的肺癌A549细胞株。方法:以携带新霉素抗性基因neo的pEGFP质粒(pEGFP-N1)为空载体,在EcoRⅠ和BamHⅠ位点间插入HPV-16 E6、E7及其突变型基因。新构建的质粒鉴定后转染A549细胞并用G418筛选,多次挑取单克隆后用流式细胞仪分选带荧光的细胞。结果:PCR、双酶切鉴定结果及DNA序列测定结果均证实质粒构建正确;PCR扩增结果显示细胞中存在目的基因;流式细胞术结果显示细胞阳性率高;Western blotting结果显示细胞能表达HPV-16 E6、HPV-16 E7蛋白。结论:成功构建pEGFP-E6、E7质粒并筛选出稳定表达E6和E7癌蛋白的A549细胞株,为进一步研究HPV对肺癌的影响奠定了基础;同时发现G418筛选结合流式细胞仪分选可提高稳定转染细胞的阳性率。
- 张二盈李刚何丽史景莉唐旭东
- 关键词：人乳头状瘤病毒增强型绿色荧光蛋白质粒构建稳定转染
- 人乳头状瘤病毒感染与肺癌关系的研究进展被引量：4
- 2011年
- 近年越来越多的研究发现肺癌组织中有人乳头状瘤病毒(human papillomavirus,HPV)DNA和癌蛋白的检出,其检出率具有地域差异性,但不同地方HPV检出亚型具有高度的一致性,主要是高危型HPV-16和HPV-18。HPV可能主要通过血液循环从宫颈癌病灶等原发部位转移到肺,从而可能诱发肺癌的发生。HPV诱发肺癌的机制可能与影响p53的失活及端粒酶的激活等有关。
- 李刚何丽唐旭东
- 关键词：人乳头状瘤病毒肺癌P53端粒酶
- HPV-16癌蛋白促宫颈癌血管生成及其机制
- 2010年
- 多种肿瘤组织中有人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)相关癌蛋白的检出,尤其是宫颈癌活检组织中高危型人乳头瘤病毒(high risk human papillomavirus,HR-HPV)癌蛋白的检出率高达95%。近年的研究发现,HR-HPV癌蛋白(特别是HPV-16E6和E7)与宫颈癌血管生成有关,其机制主要是:(1)HR-HPV癌蛋白可以增强一些血管生成促进因子,如血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)等的表达从而促进血管生成;(2)HR-HPV癌蛋白也可以降低一些血管生成抑制因子,如血小板应答蛋白(thrombospondin,TSP)、乳腺丝酶抑制蛋白(mammary serine protease inhibitor,maspin)等的表达进而使血管生成免受抑制。本文对HPV-16癌蛋白及其与宫颈癌血管生成的关系作一综述。
- 李刚唐旭东
- 关键词：人乳头瘤病毒癌蛋白血管生成宫颈癌
