李端华 作品数:15 被引量:14 H指数:2 供职机构: 成都大学 更多>> 发文基金: 四川省国际科技合作与交流研究计划项目 四川省青年科技基金 国家科技基础条件平台建设计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 化学工程 生物学 理学 更多>>
α-氨基酸酯水解酶合成头孢克洛 被引量:7 2015年 用实验室自制的α-氨基酸酯水解酶(AEH)催化合成了头孢克洛。考察了pH值、温度、酶浓度、7-ACCA/D-PGM·HCl投料比、有机溶剂和D-PGM·HCl流加方式等多个因素对该反应的影响。所得最优工艺组合为:pH 6.1,温度15℃,7-ACCA浓度100 mmol/L,投料比1∶1.3,反应体系含25%乙醇,加料方式为侧链流加。优化工艺后头孢克洛的转化率达80%以上,为其酶法合成的进一步发展提供了参考。 潘月 王佳珉 李端华 王辂 易八贤关键词:头孢克洛 苯丙氨酸脱氢酶分离纯化的开放实验教学设计与实践 被引量:1 2023年 开放实验教学既是一种教学理念,又是一种教学策略,在本科生毕业阶段和向研究生过渡的阶段显得尤为重要。本次开放实验教学设计依托课题组研究较为深入的苯丙氨酸脱氢酶,将发酵、提取、粗纯、精纯、酶活测定、高效液相色谱(HPLC)分析和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析的整条项目链作为教学和实践内容,同时训练学生整理、处理数据和撰写报告的能力,提升其综合科研水平。 李进军 赵晨 王辂 李端华关键词:纯化 教学设计与实践 噬菌体药物开发及质控研究进展 2024年 噬菌体治疗作为抗生素治疗细菌感染的替代方法之一,近年来受到越来越多科学家们的关注,该法主要用于针对由耐药菌及多重耐药菌(Multi-drug resistant,MDR)引起的公共卫生安全问题。如今,噬菌体在农业和兽医治疗方面及其在西方国家用于人类治疗方面越来越受到重视,过去几十年西方世界进行了许多临床试验和治疗探索,并且国外某些授权药店正在销售人用噬菌体药物。但噬菌体用于人类治疗时仍然存在一些问题,如噬菌体的高度特异性限制了其应用范围和噬菌体制剂管理法规不完善使得其不能进行规模化生产等。本文结合我国现行药典关于生物制品生产、制备及质量控制要求和欧洲药品管理局(The European Medicines Agency,EMA)近年来以噬菌体治疗药物批准途径的探索为参照,着重对噬菌体库构建与控制、噬菌体制备与质控和临床前测试等进行分析。 杨蓉 赵晨 李端华 饶峻 王辂关键词:细菌 抗生素 制剂 α-氨基酸酯水解酶突变体催化合成头孢丙烯 被引量:2 2014年 目的通过α-氨基酸酯水解酶突变体合成头孢丙烯的工艺条件实验,获得相关实验数据,为推行头孢丙烯的绿色生产技术打下基础。方法通过定向进化对野生型α-氨基酸酯水解酶进行改造,用突变体酶催化合成头孢丙烯,考察了包括pH、温度、酶浓度、母核/侧链投料比及有机溶剂等多个因素对酶法合成头孢丙烯的影响。结果对野生型AEH酶进行分子改造,筛选出一株突变体。动力学数据分析表明,突变体酶比野生型更适合用于头孢丙烯的合成。在突变体酶催化合成头孢丙烯的过程中,体系最适合的pH为6.0;最适温度为30℃;底物浓度为50mmol/L;最适的母核侧链比为1:2;最适的反应体系为15%异丙醇-水溶液。结论相对于野生型的α-氨基酸酯水解酶,该突变体更适合用于头孢丙烯的合成,实验数据为头孢丙烯酶法合成的实际应用打下基础。 潘月 李端华 王佳珉 王辂 王欣荣关键词:头孢丙烯 突变体 双水相系统纯化重组苯丙氨酸脱氢酶的条件研究 被引量:1 2022年 目的 研究重组大肠埃希菌表达的苯丙氨酸脱氢酶在双水相系统中的分配,并对其影响因素进行单因素考察,优化出最佳的双水相系统。方法 采用高效液相色谱法检测,依据纯度和收率来优化纯化条件。研究了聚乙二醇(PEG)分子量,聚乙二醇(PEG)浓度,硫酸铵浓度,氯化钠浓度,pH对苯丙氨酸脱氢酶在双水相中分配的影响。结果 优化的双水相系统为:PEG4000 10%,硫酸铵14%,氯化钠10%且pH 6.5,此系统下的酶活收率、纯化倍数及酶比活分别为162%、578及9280 U/mg。结论 在双水相系统的中间层提取苯丙氨酸脱氢酶是一种新的纯化方式,此方法简单易行,收率较高,纯度好且处理量大,仅通过一步实验就达到初级纯化和浓缩的目的,是一种经济有效的纯化方法,为下步工业化生产奠定基础。 李进军 赵晨 王辂 李端华关键词:硫酸铵 纯化 GLP-1-RA类药物市场现状分析 2024年 胰高血糖素样肽-1受体激动剂(GLP-1-RA)类药物凭借降糖平稳,适应证广泛,用药依从性强的优点,在最近十几年里,发展迅速,一跃成为糖尿病药物中销售额最大的品类,但因价格高,上市时间短,普及率不足10%,故市场前景有待挖掘。GLP-1-RA类药物市场竞争激烈,有多款重磅炸弹药物问世,甚至有年销售额超百亿美元的产品。本文从作用机理、分类、市场演变史、专利状态,国内仿制药现状及国内医疗政策方面描述了GLP-1-RA类药物特点和市场现状。 李进军 赵晨 王辂 李端华关键词:糖尿病 仿制药 内生真菌SEF15927对截短侧耳素的微生物羟化研究 被引量:1 2011年 目的研究植物内生真菌SEF15927对截短侧耳素的转化作用。方法利用液体培养生长细胞对截短侧耳素进行生物转化。发酵液经乙酸乙酯萃取和硅胶柱层析分离获得一个羟化产物。运用质谱和核磁共振光谱鉴定结构。结果转化产物为2-羟基截短侧耳素。结论植物内生真菌SEF15927为一具有高转化率的截短侧耳素羟化菌株, 李端华 陈祈磊 邹昆 徐欣 王辂 李直 郭义东 褚以文关键词:生物转化 羟基化 植物内生真菌 重组α-氨基酸酯水解酶合成头孢曲嗪 被引量:1 2013年 为了探索酶法合成头孢曲嗪的产业化工艺路线,从红纹黄单胞菌Xanthomonas rubrillineans中克隆-氨基酸酯水解酶基因全序列,转化入大肠杆菌中表达。以头孢曲嗪的合成转化率为指标,分别考察纯化的重组-氨基酸酯水解酶合成头孢曲嗪的最适温度、最适pH和最佳底物摩尔比。经聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,重组-氨基酸酯水解酶的单体分子量为70 kDa。催化合成头孢曲嗪的最适pH为(6.0±0.1),最适温度为36℃。底物浓度约为7-ATTC 30 mmol/L、HPGM HCl 120 mmol/L,酶用量22 U/mL时,头孢曲嗪的转化率达到64.3%。结果为优化酶法合成头孢曲嗪的产业化工艺奠定了基础。 潘佳林 王辂 李端华 叶丽娟关键词:动力学控制 转化率 α-氨基酸酯水解酶酶促合成β-内酰胺类抗生素的研究进展 2012年 β-内酰胺类抗生素是临床应用最为广泛的一类抗感染药物,在我国医药工业中占有十分重要的地位。由于β-内酰胺类抗生素的酶法合成比传统化学法更节能环保、经济,国外已有企业开始大规模应用酶法合成工艺。加强酶法合成β-内酰胺类抗生素研究对于我国医药产业具有十分重要的现实意义。本文主要综述了α-氨基酸酯水解酶的研究进展,并展望它在合成β-内酰胺类抗生素中的应用。 屈凤 李端华 王辂 易八贤关键词:酶法合成 甲基2,3-O-磺酰-α-D-葡萄糖苷合成5-羟甲基糠醛(5-HMF)及其衍生物的新方法 2024年 为解决现有的以生物质为起始原料制备5-羟甲基呋喃甲醛(5-HMF)工业化所存在的问题,本研究开发了一种新颖的5-HMF的制备方法。该制备方法以最重要的生物质——纤维素的酸水解得到的无水D-葡萄糖单体为起始原料,经甲苷化、异丙叉化、环硫酸酯化和高温脱水反应,最终获得5-HMF。该方法中,各步所获得的中间体无需纯化即可用于后续制备过程,制备中所涉及到的各类型试剂廉价易获取,因此该方法具有较好的工业应用前景。 张菡旭 李敏娇 杨蓉 李端华 陈国华关键词:葡萄糖 5-HMF 硫酸酯